胎球蛋白a检测试剂盒(elisa酶联免疫法)简介说明书

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1、人胎球蛋白A检测试剂盒(酶联免疫法)(德国DRGEIA4522)预期用途此试剂盒可用于血清,血浆,细胞上清,组织提取物和尿液中人胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白的定量的检测;血清或血浆中胎球蛋白A的检测可作为某些癌症及基因遗传缺陷的血清蛋白诊断的辅助工具;此试剂盒仅供实验室专业人士使用简介胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白,是由两个氨基末端抑制域和一个较小的羧基末端域组成的59kDa分子量的糖蛋白;由肝脏合成,分泌至血流,成年哺乳动物体内的浓度范围在0.5-1.0g/L;婴儿期的血清胎球蛋白A含量高,参与蛋白酶抑制活性,与钙代谢和骨生成调节相关;累积于骨和牙齿内,作为生物学上非胶原

2、骨蛋白的主要部分,研究表明,胎球蛋白A是循环中主要的钙化抑制剂;干涉钙盐沉淀;近期研究显示低水平胎球蛋白A的慢性肾脏衰竭患者与心血管病的高死亡率显著相关;另一方面,糖尿病老年人血清胎球蛋白A含量比正常人高,这是独立于胰岛素抑制剂的其他标记物;另外,高胎球蛋白A水平还可作为心血管疾病的的危险标记物实验原理此试剂盒可用于血清样本中人胎球蛋白A的定量检测;采用双位点夹心法,羊抗人胎球蛋白A多抗结合人胎球蛋白A的不同位点将含人胎球蛋白A的试验标准品,质控品和预稀释样本加至包被了高度亲和羊抗人胎球蛋白A多抗的微孔内,第一次孵育,包被抗体捕获样本中的人胎球蛋白A,未结合的蛋白洗板除去,然后加入HRP

3、标记的抗人胎球蛋白A酶联物加入至每孔,“夹心-人胎球蛋白A-HRP-标记的酶联物”形成夹心,未结合的示踪抗体通过洗板除去,结合于包被板上的HRP酶免物与底物液定时反应,然后在酶标仪上检测;结合于包被胎球蛋白A上示踪抗体酶活性与样本中胎球蛋白A的含量直接相关,在点对点或三次回归模式下以标准品的浓度比上OD值绘制标准曲线,样本中的胎球蛋白A可直接从标准曲线上得到试剂:准备与贮存此试剂盒收到后立即贮存于2-8℃下,效期见试剂盒标签;所有成分在2-8℃下可保存至有效期使用前,所有试剂平衡至室温,不同批次的试剂不能交换使用1.包被板,96孔,包被了抗人胎球蛋白A抗体;微孔板固定于板架上,密封于含有

4、干燥剂的铝箔密封袋内;贮存于2-8℃至有效期2.胎球蛋白A示踪抗体,1瓶,0.6ml,浓缩,HRP标记的抗人胎球蛋白A示踪抗体溶于稳定的蛋白基质中;此试剂使用前需用示踪剂抗体稀释液进行稀释;贮存于2-8℃至有效期3.示踪抗体稀释液,1瓶,11ml,即用,Trizma盐酸溶于缓冲液;根据实验步骤用于示踪抗体稀释;贮存于2-8℃至有效期4.试验缓冲液,浓缩,1瓶,11ml,含牛血清白蛋白的磷酸缓冲盐;建议使用前以1:10比例用双蒸水稀释(如11ml浓缩+99ml的双蒸水);贮存于2-8℃至有效期5.洗涤液,浓缩,1瓶,20ml,30倍浓缩;试验前需用580ml的双蒸水稀释,混匀;一旦稀释,不

5、含叠氮化物防腐剂的磷酸缓冲盐洗涤液会含表面活性剂;稀释的洗涤液在室温下可保存至效期6.HRP底物液;1瓶,12ml,含过氧化氢的TMB底物液;贮存于2-8℃至有效期1.终止液,1瓶,12ml,0.5M硫酸,贮存于2-8℃至有效期2.胎球蛋白A标准品,5瓶,含胎球蛋白A,不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质;各标准品浓度见瓶子标签;3次冻存周期使用后,所有标准品保存至-20℃或更低3.胎球蛋白A质控,2瓶,含人胎球蛋白A,不含叠氮化物防腐剂的液态牛血清基质,各质控的精确浓度范围见瓶子标签,3次冻存周期使用后质控保存至-20℃或更低安全注意事项1.此试剂用于临床参考实验室,仅供医生或实验室专业

6、人士体外诊断用2.若试剂是有潜在感染风险的,试验操作和处理时应戴手套3.避免接触含TMB,过氧化氢,硫酸的试剂,TM,B会刺激皮肤和粘膜,导致皮肤过敏反应;TMB还可能是致癌物质;皮肤接触到硫酸会导致严重灼伤,不要接触到眼睛,皮肤,衣服,不要吸入烟雾,一旦接触,应立即用大量水冲洗至少15min4.良好实验室操作规范实验所需材料但试剂盒未提供1.精确的单通道移液器,10-25-100-1000ul2.适于100ul的可重复用分液器3.适于所有体积的一次性枪头4.一次性玻璃管或塑料管12x75mm或13x100mm5.带盖的一次性塑料瓶;100-1000ml6.铝箔纸7.双蒸水或去离子水8.

7、塑料盖板或聚乙烯薄膜9.多通道洗涤瓶或全自动(半自动)洗板系统10.酶标仪,450nm样本采集人胎球蛋白A的检测所需血清或血浆样本量仅10ul个人在采样前无需特殊准备,全血采集,室温下立即凝集30min,然后离心分离出血清(850-1500xg10min)。全血采集3小时内需将血清从凝集中分离出来,转移至另一干净试管;血清样本可保存在-20℃或更低,避免超过三次的冻融建议采用24小时尿液来检测尿液中的胎球蛋白A;采集第二天早晨的尿液

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