实验二河蚌育珠手术作业

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1、实验二河蚌育珠手术作业目的:了解育珠手术操作全过程实验材料:背角无齿蚌实验内容:一。手术前的准备。二。手术操作一。手术前的准备一。手术器具的准备1.开壳工具2.制片工具3.插片工具4.手术工具的清洗和消毒二。手术蚌的准备1.采捕2.运输3.暂养4.选择三。保养液的准备1.冷血动物平衡盐保养液2.PVP组织间液保养液3.胰岛素保养液4.金霉素保养液二。无核珍珠的手术作业1.细胞小片的制备剖蚌→去污→分膜→弃去内表皮→取下小片条反拉到切片板上→去污去粘→修边(弃去色线边)→切片(3*3mm4*4mm5*5mm3*4mm4*6mm)2.细胞小片的插植排蚌

2、→开口加塞→整鳃去污→创口→取片→送片(插片)→整圆→换侧→扒塞浸水去除内表皮的三种方法:1.分离法:用刀在边缘膜靠近前闭壳肌或后闭壳肌附近开一小口,用镊子的一脚插入在内外表皮之间,另一手拿镊子夹住内表皮,两手协作,边伸入边分离,使边缘膜的内外表皮完全分开,插入的镊子一脚应尽可能偏向外表皮,以使制得的细胞小片厚薄均匀而且少带结缔组织。2.削膜法:用刀片把内表皮均匀地削去。3.撕膜法:用镊子夹住内表皮,撕去内表皮。保养液1.冷血动物平衡盐保养液:NaCL3.50克KCL0.05克CaCL0.1克MgSO40.20克NaHCO30.20克用蒸馏水配成1

3、000毫升。2.PVP组织间液保养液:由河蚌外套膜组织间液加配1.5%PVP溶液组成。(PVP=Polyvinylpyrrolidone,化学名称为聚乙烯吡咯烷酮,又可写作PNVP,povidone,polyvidone,crospovidone,为一种水溶性高分子聚合物,其单体为N-Vinylpyrrolidone(N-乙烯基-2-吡咯烷酮),是性能优异、用途广泛的水溶性高分子化合物,属高科技含量、高附加值精细化工产品,是国际倡导的重要化工中间体和医药中间体。)3.胰岛素保养液:0.1%胰岛素10毫升,0.07M生理盐水100毫升。4.金霉素保养

4、液:用过滤的池水将金霉素配成千分之一浓度的溶液。插植部位:1.边缘膜2.中央膜3.斧足基部插植排布:“品”字形排布插植法:1.横插法2.直插法插植行数:1.横插→3―4行2.直插→2―3行插植数量:根据小片插入后距伤口0.5―0.7厘米,片距1厘米左右的要求,按每侧外套膜植3―4行计算。则一般每只蚌可植40―50片,也有的单位根据自己的经验,按蚌体的大小决定植片的数量,即每厘米体长植3.5片左右。创口插片时要注意:1.创口时创口针要平稳,以免刺伤外表皮而形成附壳珠。2.口大小要适宜,以正好能让小片通过为好,创口过大,易吐片,且不易愈合,过小则当小片

5、强行挤过时损伤小片,并使小片拉长,影响珠形。3.创口深浅要适宜,一般三角帆蚌深约0.5―0.7厘米,褶纹冠蚌深约0.7―1.0厘米,过深,影响插片数量,过浅则易吐片或形成焦头珠。4.小片要一次插送成功,并要送达底部,以便于创口收缩,加快伤口愈合。5.插片后要整圆,一是为了提高成圆率,二是可以降低吐片率。6.插片时要先插边缘膜后插斧足基部,以防垮膜而影响继续操作。7.相邻两行小片,创口与小片的位置应交错排列,亦即创口与小片各自成“品”字形或“▼”形排列。作业:写出无核珍珠手术作业的程序和注意事项

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