全国基层医疗机构抗菌药物合理应用培训项目常见病原真菌

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1、全国基层医疗机构抗菌药物合理应用培训项目常见病原真菌李若瑜北京大学第一医院北京大学真菌和真菌病研究中心病原真菌鉴定的基本流程临床标本PDA,SDA28度培养不能生长鼻孢子菌、肺孢子菌、马拉色菌（厚皮除外）芽孢关节孢子念珠菌、隐球菌、红酵母等毛孢子菌、地霉等有隔菌丝无隔菌丝担子菌、子囊菌、半知菌接合菌等区分酵母样或霉样菌落常见病原真菌酵母及酵母样真菌_念珠菌_隐球菌_毛孢子菌_马拉色菌霉菌(丝状真菌)_皮肤癣菌_曲霉_毛霉_镰刀菌等双相真菌念珠菌属简介念珠菌大约有150个种，65%以上不能在37℃生长，

2、无致病性念珠菌属可以感染皮肤、粘膜及内脏器官引起念珠菌病常见的致病性念珠菌白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、乳酒念珠菌临床最常见的是白念珠菌生物学特性念珠菌在环境中和人体内均可寄生存在正常人皮肤、口腔、肠道、肛门、阴道中可分离出本菌显微镜下表现为芽孢和假菌丝假菌丝一般与致病相关寄生时一般表现为孢子相致病性条件致病菌白念珠菌致病力强念珠菌毒素、菌体形态、黏附性和分泌水解酶与其致病性密切相关临床表现-浅部念珠菌病口腔念珠菌病念珠菌性女阴阴道炎念珠菌性龟头炎皮肤念珠菌病

3、念珠菌性甲沟炎及甲床炎慢性粘膜皮肤念珠菌病念珠菌性角膜炎临床表现-系统性念珠菌病支气管、肺念珠菌病消化道念珠菌病泌尿道念珠菌病念珠菌败血症念珠菌性心内膜炎念珠菌性脑膜炎常见病原菌白念珠菌（Candidaalbicans）热带念珠菌（C.tropicalis）克柔念珠菌（C.krusei）近平滑念珠菌（C.parapsilosis)光滑念珠菌(C.glabrata)乳酒念珠菌（C.kefyr）季也蒙念珠菌（C.guilliermondii）少见病原菌链状念珠菌（C.catenulata）西弗念珠菌（C.c

4、iferrii）海默郎尼念珠菌（C.haemulonii）解脂念珠菌（C.lipolytica）葡萄牙念珠菌（C.lusitaniae）挪威念珠菌（C.norvegensis）铁红念珠菌（C.pulcherrima）皱落念珠菌（C.rugosa）产朊念珠菌（C.utilis）维丝念珠菌（C.viswanathii）涎沫念珠菌（C.zeylanoides）都柏林念珠菌(C.dubliniensis组织病理学实验室检查直接镜检：可见卵园形发芽孢子及菌丝，如查到大量假菌丝，说明念珠菌处于致病状态。染色：革兰氏

5、染色，菌丝、芽孢呈蓝色，着色不均匀。过碘酸染色，菌丝、芽孢染成红色。用1:1000吖啶橙染色，在荧光显微镜下，菌体呈现荧光。培养：最常用的培养基是沙堡氏培基，当菌落生长后再移种至米粉吐温80培基或其它鉴定培养基中，以便进一步鉴定菌种。念珠菌直接镜检（LPCB）假菌丝和芽孢致病性酵母菌鉴定原则鉴定目的：确定感染及传染源；选择敏感抗真菌药物；哪些酵母菌需要鉴定到种：所有分离自无菌体液，包括脑脊液、血液、尿液、穿刺液及其它体液的酵母菌；分离自所有严重疾患或免疫受损病人或怀疑真菌感染的病人的酵母菌；从任何临床标

6、本中分离出大量的酵母菌；分自若干连续取材的标本，除呼吸道分泌物，也应鉴定至种的水平；芽管试验（Germ-tubetest）原理：白念珠菌在有营养的液体环境中35℃培养，可从酵母细胞生出芽管。结果：白念珠菌可在2h内生成芽管，热带念珠菌和其他念珠菌则否。厚膜孢子形成试验（Dalmoplatetest）念珠菌显色培养基CHROMagarCandidaAPI—20C酵母鉴定系统ID32C酵母鉴定系统其它快速同化试剂VITEK全自动微生物鉴定仪YBC酵母菌鉴定卡。有30个孔的一次性塑料卡，包括26个常规生化反应

7、和4个阴性质控。利用YBC，只有21.3%的酵母需做补充生化试验或形态学检查。白念珠菌菌落特征沙氏培养基25℃中等速度生长，形成酵母样菌落，奶油样、光滑、闪光，老后有皱褶显色琼脂基上呈绿色菌落显微镜特征玉米粉吐温琼脂：真菌丝和假菌丝，多数假菌丝，假菌丝连接处产生多数呈簇状、葡萄状小分生孢子，顶端或侧支产生厚壁孢子血清芽管试验，在37℃1-3小时后，可以产生芽管白念珠菌(Candidaalbicans)酵母菌鉴定程序和路线酵母纯培养玉米粉吐温琼脂培养基(25℃)‘假菌丝（+）假菌丝（-）厚壁孢子（+）厚壁

8、孢子（-）尿素酶试验（+）尿素酶试验（-）白念珠菌光滑念珠菌关节孢子（+）关节孢子（-）酵母属芽孢（+）菌落无胡萝卜色菌落呈胡萝卜色芽孢（+）芽孢（-）念珠菌属红酵母属丝孢酵母属地霉菌属咖啡酸试验有棕色色素无棕色色素新生隐球菌隐球菌属血清学试验-菌种鉴定抗原型别：—因子血清（CANDIDACHECK）：九种因子+蔗糖分解，鉴别7种致病性念珠菌；—因子血清（CRYPTOCHECK）：八种因子，可鉴别8种隐球菌及变种分子生物学方法C.glabr