电针对大鼠脑缺血急性期治疗机理及神经保护作用的研究_1

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1、电针对大鼠脑缺血急性期治疗机理及神经保护作用的研究【摘要】目的探讨电针对大鼠脑缺血急性期治疗机理及脑组织自由基水平与神经功能缺损的相关性。方法3只健康的雄性Wister大鼠，随机分为针灸组、模型组、对照组。采用光化学法复制局灶性脑缺血急性期动物模型。分别在术后3h、24h检测脑组织中MDA含量和SOD活性，同时进行神经行为学观察和神经功能缺损评分。结果模型组脑缺血后hMDA含量已明显增高，2h其值为正常组的3倍(P【关键词】局灶性脑缺血模型大鼠电针丙二醛超氧化物岐化酶THERAPITICANDNEUROPROTECTIVEEF

2、FECTOFELECTRIAbstractObjectiveTostudythemechanismofelectricacupunctureonacutecerebralischemiaandfreeradicallevelinbraintissuecorrelatedwithdegreeofneurologicimpairmentinrats.MethodsWisterratsweredividedintoelectricacupuncturetherapygroupandcontrolgroup.Rats'focalcer

3、ebralischemiainacutestagewasinducedbyphotochemistrymethod.ChangesincontentsofMDAandinactivityofSODinbrainhomogenatewereobservedathand4h.ThedegreeofneurologicimpairmentwasexaminedbyZeaLonga'law.ResultsAfterhthecontentsofMDAinbrainischemiatissueincreased,andat4hitincr

4、easedbytimescomparedwithcontrolgroup.MDAcontentsat4hintheacupuncturetherapygroupdroppedsignificantly±mol·mL-1±·mL-1(PKeywordsCerebralischemiamodelratsElectricacupunctureMDASOD急性脑卒中后尽快改善脑部血液循环，纠正脑组织缺氧、维持神经细胞存活和促进神经生长是治疗本病的关键。目前除了早期的药物治疗以外也在行针灸治疗。本研究拟通过观察电针对脑缺血急性期大鼠脑组

5、织自由基水平的影响，以及分析脑组织自由基水平与神经功能的相关性，探讨脑缺血急性期应用电针治疗的机理和意义，为临床缺血性脑血管疾病早期应用电针治疗奠定理论基础。1材料与方法材料Wister雄性大鼠,12周,体重(250±50)g，二级动物。MDA、SOD测试盒(均购自南京建成生物工程研究所)；WFZ800-D3A型单光束紫外/可见分光光度计(北京第二光学仪器厂)；G680电子针灸仪。实验方法实验分组：将53只大鼠分为正常对照组(假手术组）12只、模型组22只、电针治疗组19只。根据缺血时间的不同，每组又随机分为3h和24h两组。

6、模型制备：采用光化学法［1］并略加改进,左侧颞部入路,牙科钻开直径mm的骨窗暴露大鼠大脑中动脉起始部及嗅束至大脑下静脉间的一段MCA为光照部位。光照分二步,首先股静脉注入虎红B［15g·L-1(·kg-1)］,持续光照MCA起始部10min,再经股静脉注入半量15g·L-1的虎红B，再光照嗅束至大脑下静脉间的MCA段10min，造模完成。正常对照组仅进行骨窗暴露。治疗方法：将大鼠用脑立体定位仪固定，选取百会、水沟、内关、合谷、足三里穴，以32号毫针刺入,进针～后连接至电子针灸仪的输出电极上，选用频率为30～50Hz交替的等波幅

7、的疏密波,刺激强度以大鼠肢体轻微颤动为宜。电针第一次实施在造模后1h，此后1次/h，10min/次。模型组：对造模成功的大鼠，在同等条件下进行大鼠的抓取但不实施电针治疗。MDA含量和SOD活性测定：术后h、2h分别将断头置冰块上取脑并用冰冷的生理盐水冲洗，滤纸拭干，取病灶侧脑组织块1g，称重剪碎加入生理盐水［1:9(W:V)］放入匀浆器碾磨，使组织充分匀浆，离心取上清液制备成10%组织匀浆液待测。MDA测定采用硫代巴比妥酸(TDA)比色法，利用可见分光光度计在波长53nm处测定，单位：nmol·mL-1。SOD测定采用黄嘌呤氧

8、化酶法，单位：nu/mg蛋白(pro)。具体操作步骤按试剂盒说明书进行。脑缺血大鼠行为学观察和神经功能缺损评分：连续观察造模后大鼠的行为学表现，并按ZeaLonga的6级评分法评分［2］：0分，无功能障碍；1分，不能伸展前肢；2分，向一侧旋转；3分，向一侧倾倒；4分，无自主活