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1、·专题综述·北方园艺2008(12):84~85香菇多糖硇分离纯化方法砜究进展李琚,钟耀广,刘长江。(1.上海水产大学食品学院,上海200090;2.沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161)摘要:香菇多糖因具有很高的生物学功能已得到广泛的研究。现对香菇多糖的分离和纯化方法进行综述,以期对今后香菇多糖的应用有所借鉴。关键词:香菇多糖;分离;纯化中图分类号:S646.12;Q539文献标识码:A文章编号:1001-0009(2008)12一O084一O2香菇(Lentinusedodes)是侧耳科的担子菌,含有多的同时能有效提高多糖提取率]。陈哲超等采用复合种有效药用组分
2、。近年来的研究发现,香菇中的多糖对酶解法提取香菇多糖蛋白,采用复合酶解和热水浸提法癌症患者有治疗作用。香菇多糖为白色粉末状固体,对分离纯化香菇中多糖蛋白。与单纯热水浸提法相比,香光和热稳定,在水中最大的溶解度为3mg/mI,溶于甲菇多糖含量提高了4倍,且酶解后大大改善了糖类的分醇、乙醇、丙酮等有机溶剂。香菇多糖具吸湿性,室温放布,具有抗肿瘤、抗病毒活性的较高相对分子质量的葡置15d,吸水量可达4O。相对分子量为4×10。~8×聚糖含量也明显提高]。10,这是采用凝胶过滤法(HPLC)和激光拉曼散射法测此外,超滤法提取香菇多糖也取得较好效果。念保得的数据j。义等利用超滤分离
3、技术,得糖率高,工艺流程简单,工序多糖的分离纯化是指多糖研究中获取研究对象的少,提取时间短,料液比和提取液的粘度降低,降低了成过程。一般这一过程包括分离、纯化和纯度鉴定。其中本。该法与传统工艺相比,提取率提高了40以上,多分离纯化是多糖研究的关键,其成功与否、效果的好坏糖中杂蛋白的含量降低了50,在提高产率的同时增加都会直接影响后续研究的可行性与可信度。所谓分离了多糖的纯度[5]。李志洲等采用膜分离技术,利用其分就是将存在于生物体中的多糖分离出来。而多糖的纯离、浓缩作用,大大提高了产品得率,操作简单,能耗少,化就是指将粗多糖中的杂质去除而获得的单一的多糖工序简捷,提取率高
4、,产品多糖含量高]。组分。在获得单一多糖组分后,必须对其纯度进行鉴定。卢成英等人采用超声波辅助热水浸提粗多糖,得率需要说明的是,多糖的纯度不能用通常化合物的纯度标准较高,但受水溶色素等杂质影响而致纯化中脱色困难,来衡量,目前常用于多糖纯度鉴定的方法有凝胶过滤法、并使多糖的纯度不高;热水浸提所得粗多糖得率、多糖高压电泳法、超离心法、旋光测定法、毛细管电泳法等。其含量均较高,经纯化处理多糖损失较多,纯化处理后多中应用最多的是凝胶层析法,该法的准确度高[2]。糖含量最高达93.12,但纯化后多糖得率较低[7]。由于香菇多糖具有的特殊生物活性作用,因此,建立综上所述,传统的热水浸
5、提法虽然是提取多糖的常高效、经济的香菇多糖提取方法具有重要的现实意义。用方法,操作简单,但时间长、效率低、能耗大,而利用复1香菇多糖的分离合酶解法、微波辅助法、超声波辅助法等可以提高提取常用的是“水溶醇沉法”,即将香菇子实体或菌丝体破率、减少能源消耗、缩短提取时间,但对香菇多糖的结构碎,放于100。C的热水中,4h后进行过滤,滤渣再反复提取及生物活性是否有破坏,仍有待进一步的探讨。因此,2~3次。取滤液加入3倍体积的95乙醇处理4h,经离探索更为高效、经济、可靠的提取方法对香菇多糖的研心、过滤、去除沉淀物、将滤液浓缩、烘干,即成为粗多糖。究开发具有现实意义。有人采用复合酶
6、与热水浸提相结合的方法提取香2香菇多糖的纯化菇多糖,复合酶由果胶酶、纤维素酶及中性蛋白酶组成,多糖的纯化有以下方法:①分级沉淀法:用不同浓此法条件温和、杂质易除、得率高。谢红旗等人采用中度的沉淀剂如甲醇、乙醇、丙酮等来分部沉淀纯化多糖;性蛋白酶辅助水提取香菇多糖,在降低杂质蛋白质含量②季铵盐沉淀法:常用的季铵盐是十六烷基三甲基胺溴化物((、TAB)及其碱(rA—OH)和十六烷基吡啶;③盐第一作者简介:李-~-(1984-),女,硕士,现从事功能性食品研究Z-.作。析法:常用的盐析剂有硫酸铵、氯化钠、氯化钾、醋酸钾通讯作者:钟耀广。E-mail:zhongyaoguang@
7、126.corn。等;④金属络合物法:常用的络合剂有费林溶液、氯化收稿日期:2O。8一O7—21铜、氢氧化钡和醋酸铅等;⑤层析法:有纤维素柱层析、84北方园艺2oo8(12):84~85·专题综述·纤维素阴离子交换树脂柱层析(如DEAE-纤维素)、凝胶杨娟等人用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Sepharose柱层析(SephadexG一250、Sepharose、DEAE—Sephadex)、CL_6B凝胶柱层析进行纯度鉴定,结果表明阿利新蓝和高压液相柱层析;⑥超滤法;⑦制备性区域电泳法等L8]。考马斯亮蓝R250染色方法均只出现一条电
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