专题九生物科技与技术实践

《专题九生物科技与技术实践》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、专题九生物科技与技术实践考纲要求内容要求1.基因工程基因工程的诞生Ⅰ基因工程的原理及技术Ⅱ基因工程的应用Ⅱ蛋白质工程Ⅰ2.克隆技术植物的组织培养Ⅱ动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ细胞融合与单克隆抗体Ⅱ3.胚胎工程动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础Ⅰ胚胎干细胞的移植Ⅰ胚胎工程的应用Ⅱ4.生物技术的安全性和伦理问题转基因生物的安全性Ⅰ生物武器对人类的威胁Ⅰ生物技术中的伦理问题Ⅰ5.生态工程阐述生态工程的原理Ⅱ生态工程的实例Ⅰ6.酶的应用酶的存在与简单的制作方法酶活力测定的一般原理和方法酶在食品制造和洗

2、涤等方面的应用（1）能独立完成“生物知识内容表”制备和应用固相化酶所列实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验的方法和技能进行综合运用（2）具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理（3）能对一些简单的实验方案作出恰当的评价和修订7.生物技术在食品加工及其他方面的应用（1）从生物材料中提取某些特定的成分（2）运用发酵加工食品的基本方法（3）测定食品加工中可能产生的有害物质（4）植物的组织培养（5）蛋白质的提取和分离（6）PCR技术的基

3、本操作和应用基因工程★目的基因的获取：分为直接分离基因、人工合成基因。人工合成法反转录法mRNA单链DNA双链DNA专一性强，目的基因不含内含子操作麻烦，mRNA存在的时间短，技术要求高根据已知氨基酸序列合成通过测出的核苷酸序列，通过化学方法合成专一性最强，目的基因不含内含子，可以合成自然界中不存在的基因目前，复杂的、尚不知核苷酸序列的基因不能合成基因表达载体的构建方法载体（质粒）DNA分子（含目的基因）同一种限制酶切割带有黏性带有相同黏性末端的末端切口目的基因片段DNA连接酶重组DNA（环状重组质粒

4、）将目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法（用Ca2+处理）受体细胞受精卵体细胞（需经组织培养）受精卵原核细胞目的基因的检测与鉴定导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。转录检测：分子杂交法，即目的基因作探表达检测针与mRNA杂交翻译检测：抗原—抗体杂交法个体生物学水平鉴定：转基因生物是否具有抗性或转基因产品的功能活性。细胞工程　　细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程。植物组织

5、培养　　植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。植物组织培养可培育繁殖速度快而且无病毒的植株，还可以通过大规模的植物、细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等，另外，还可用植物组织培养方法形成的胚状体，包裹上人工种皮，制成人工种子。过程名称过程形成体特点条件脱分化由外植体形成愈伤组织排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团①离体②提供营养物质（有机物、无机物）③提供激素（生长素和细胞分裂素）④提供其他适宜条件再分化由愈伤组织成为幼苗或胚状结构有根、芽或有生根发芽的能力植物组织培养与动物细胞培养项目原

6、理培养基结果培养目的植物组织培养细胞的全能性固体：营养物质、激素培养成植株快速繁殖，培育无病毒植株等动物细胞培养细胞的增殖液体：营养物质、动物血清等培育成细胞系或细胞株获得细胞的产物或细胞等植物体细胞杂交和动物细胞融合项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导克服远缘杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导制备单克隆抗体的技术单克隆抗体制备

7、过程中的两个核心问题◎为何制备单克隆抗体要将单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合?体内的B淋巴细胞数目很多，可以产生多达百万种以上的特异性抗体，这些抗体主要存在于动物体血清中，也存在于组织液及外分泌液中。如果从动物血清中分离出所需要的抗体，不仅获得的抗体产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不灵敏。如果利用单个B淋巴细胞通过无性繁殖，就可产生大量单一抗体，但B淋巴细胞在体外不能无限增殖（从动物细胞培养的过程可以理解，单个细胞要度过两次“危机”几乎是不可能的），这就需要利用肿瘤细胞无限增殖的特点，将单个B淋

8、巴细胞与骨髓瘤细胞融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特性，也就是既具有无限增殖的特点，又能产生单一抗体。◎制备过程中为何须经两次筛选?第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才是需要的杂种细胞。第二次筛选是在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。胚胎移植◎胚胎移植的供体和受体必须是同种生物，同一物