蜂胶中总黄酮的分离及其含量测定

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1、万方数据成都医学慧cAL学报2006,第JOURNALOFCHENGDUMEDICOLLEGEl卷第1期cAL‘。171”4·实验研究·蜂胶中总黄酮的分离及其含量测定高秀蓉，昝旺(成都医学院药学教研室，成都610083)【摘要】目的利用聚酰胺柱层析分离蜂胶中总黄酮，并运用紫外分光光度法(UV)对其进行含量测定。方法利用聚酰胺柱层析，干法上样，分别用30％、95％不同浓度的乙醇进行洗脱，盐酸一镁粉反应定性检测及分光光度法定量测定，并对分光光度法进行了改进。结果经定性检测，30％乙醇洗脱液几无黄酮，紫外分光光度法测量9

2、5％洗脱液中总黄酮的含量为0．956mr／ml。结论利用聚酰胺柱层析初步纯化蜂胶中总黄酮，并提供了测量蜂胶中总黄酮含量的一种快速、准确的方法一紫外分光光度法，为进一步分离其中的单体黄酮及研究其药理活性打下了基础。【关键词】蜂胶；总黄酮；聚酰胺柱层析；分光光度法【中图分类号】R284．2【文献标识码】ASeparationandDeterminationofFlavonoidsinProplisGAOXiu—tong，ZANwang(Dq卿伽删ofPharmacy，c^啦Med／ca／College，秭印础61008

3、3ck／na)Ab醴叫：ObjectiveToseparatetheflavonoidsinproplisbypolyamidecolumnchromatographyandtoestablishthemethodofUVfordeterminationofflavonoid．MethodsFlavonoidofproplisWaSseparatedbypolyamidecolumnchromatographywith30％．95％ethanolanddeterminedbyHd—Mgreactionandultr

4、aviolet—visiblespectrophotametry．ResultsTherewasalm鹏tnotlavonoidineluateof30％ethan01．theconcentrationofeluateof95％ethanolWas0．956mg／mlbyU—VSpectrophotometry．ConclusionTheflavonoidWaSprimarilypurifiedbypolyamidecolumnchromatowaphy．andafast，accuratemethod--ulwav

5、iolet—visiblespec·a'ophotometrywasputforword．Keywords：proplis；flavonoid；polyamidecolunmc11romatography；ultraviolet—visiblespec昀photometry蜂胶(proplis)是蜜蜂从植物树芽、花苞和树干处采集的树胶，并混入蜜蜂上颚腺分泌物和蜂蜡等成分而成的一种具有芳香气味的褐色胶状固形物。蜂胶的化学成分极为复杂，其主要活性成分包括黄酮类、萜烯类、有机酸、芳香醛、酯类及多种氨基酸、酶、维生素、矿物

6、质等⋯1。黄酮类是蜂胶中最主要的活性物质，具有抗癌，治疗糖尿病，抗菌，抗病毒，抗氧化，调节免疫等多种功能。蜂胶中的黄酮类成分有上百种，但到目前为止仅分离了30多种。为了更加明确蜂胶的有效成分，更加有收稿日期2006—02—20修回日期2006—03—9作者简介高秀蓉(1978一)，女，四川成都人，助教。硕士．四川大学华西药学院毕业．从事生物技术制药和药代动力学方面的研究。Td：13088014409，E—mail：$∞muxiuzi@tom．效地利用蜂胶，本文利用聚酰胺柱层析分离蜂胶中的总黄酮，并运用分光光度法进行

7、了含量测定。l材料与方法1．1主要试剂和仪器1．1．1仪器北京市朝阳区来广营医疗器械厂GD65一l型鼓风干燥箱；上海良平仪器仪表有限公司YB电子天平；上海沪西分析仪器厂DHL—A电脑恒流泵；安捷伦科技上海分析仪器有限公司751GW分光光度计。1．1．2原料蜂胶原料购自成都永丰养蜂场。1．1．3试剂芦丁标准品(中国药品生物制品鉴定所提供)；100。200目聚酰胺粉(江苏临江化工厂)；95％乙醇(成都化学试剂厂)；A1(N03)3(成都科龙化工厂)；NaN02(成都化学试剂厂)；万方数据42成OURNA都L蛊G学DUJ

8、OURNALOFENDUMED院ICALC学OLLEG报E2006年第1卷第1期CH一。”1。“11”NaOH(成都化学试剂厂)1．2方法1．2．1聚酰胺柱层析分离蜂胶总黄酮取一20℃冻存的蜂胶块20．Og，粉碎，80％乙醇回流提取3次，3次乙醇液分别为100ml，80IIll，60Hll(每次45rain)，提取液合并，减压浓缩，得总浸膏7．0譬。利用聚酰