饮用水中微囊藻毒素的健康影响

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1、饮用水中微囊藻毒素的健康影响复旦大学公共卫生学院环境卫生学教研室施玮（64039249,wshi@shmu.edu.cn）背景资料环境和人群暴露水平流行病学和毒理学研究结果研究方向概要背景资料水体富营养化富营养化对水质的影响富营养水体中的主要产毒藻类与饮水水质相关的主要藻毒素—微囊藻毒素LR湖泊、水库等水域的植物营养成分（氮、磷等）不断补给，过量积聚，致使水体营养过剩的现象称为水体“富营养化”。水体富营养化滇池水华藻类迅速繁衍水质污浊发臭透明度下降感观性状恶化水中溶解氧不足鱼类及其他生物大量死亡加速水域的消亡过程

2、富营养化引起的水质变化产毒藻种MicrocystisaeruginosaKuetz.Microcystisviridis(A.Br.)LemmM.wesenbergii产毒藻种AnabaenaOscillatoriaNostoc饮用水中的微囊藻毒素淡水中常见的蓝藻能产生神经毒素和肝毒素，与供水安全相关。大部分肝毒素是微囊藻毒素(microcystins)，已知70多种亚型的微囊藻毒素，微囊藻毒素－LR是最早被鉴定出来也是最常见的亚型。神经毒素在供水系统中不像肝毒素那样分布广泛，造成的危害程度也不及微囊藻毒素。MC

3、-LR环境暴露和人群暴露水平分析方法暴露水平检测方法生物测试法蛋白磷酸酶分析法酶联免疫吸附（ELISA）高压液相色谱（HPLC）液相色谱–质谱（HP－MS）生物测试法方法：腹腔注射染毒，测其LD50优点：快速筛查、可以区分毒素的毒作用特征缺点：灵敏度低、可比性差、不能定性定量、一种毒素可能掩盖另一种毒素的时相上较为延迟的严重毒性作用或致死作用。原理：PP1和PP2A可强烈专一性促进糖原磷酸化酶a的水解，而MCYST又可与PP1和PP2A共价结合，抑制其活性。据此，以32p标记糖原磷酸化酶a，三者相互作用，根据32

4、p的释放量来测定样品中MCYST的含量。磷酸酶分析法优点：检测限低（pg级），反应灵敏，可检测样品中总MC的含量。缺点：易受其它因素的影响结果偏高：功能性测试结果偏低：内源性蛋白磷酸酶活性磷酸酶分析法原理：利用毒素诱发免疫反应产生抗体，利用抗体对抗原的特异性识别来对各种毒素进行检测。ELISA优点：检测限低（ng级），一般灵敏度较高，适合作为筛检实验检测样品中总MC的含量。缺点：商品化的试剂盒来源有限，有交叉反应，特异度变化较大。ELISA固定相：C18硅胶柱流动相：乙腈或甲醇等极性溶剂，以TFA调节pH及离子对

5、检测器1.紫外(UV)检测2.荧光(FL)检测3.化学发光(CL)检测HPLC定性：以标准品的保留时间为对照定量：标准曲线法优点：能准确定性定量，灵敏度好，选择性好缺点：必需标准品作对照，样品处理复杂，仪器昂贵，技术复杂HPLCLC-MS法原理：质谱分析是通过对样品离子质量和强度来测定，来进行成分和结构分析的一种分析方法。与色谱法联用，色谱法是样品的预处理器，而质谱法则是检测器。优缺点：检测限低，反应灵敏，选择性好，但是成本高，技术复杂环境暴露和人群接触水平原水中毒素的浓度和变异度(nd～10µg/L)自来水中毒

6、素的浓度和变异度(nd～1.0±µg/L)其他：泳池中的藻类污染—非循环池淋浴、加湿器藻细胞内和细胞外：生长期:10:1～5:1消解期:3:7我国部分饮用水源水中MC-LR的污染情况地区采样时间样本数源水（ng/L）均数±标准差最大值(ng/L)样本数自来水(ng/L)均数±标准差最大值(ng/L)淀山湖94.7-855210±10120.61233001151淀山湖94.1－11323658.72±11511.6955400绍兴95.4-98.390360.7±536.442180970.89±112.2735

7、5海宁97.7-969141.08±244.371083.43224.85±2.8011.34深圳98.9-99.121156.81±31.411301516.93±19.4249宁波98.8-99.63586.79±66.692451211.33±17.3646淀山湖98.4－99.126321.72±450.341865淀山湖99.7-00.477375.22±390.991789巢湖19991611802000鄱阳湖00.7-00.1040243.09±356.05淀山湖02.6-02.103090±11(

8、游离的)184上海03.7-04.324620±590238012471.7±401.11270本课题组建立的HPLC条件HP1100型高效液相色谱仪（HP公司），矩阵二极管式紫外检测器，HypersilODSC18分析色谱柱流动相：A：水:CAN:TFA=80:20:0.04B：水:CAN:TFA=10:90:0.04柱温：35度检测波长：238nm梯度洗脱标准曲线工作