蜂胶清除自由基能力与总黄酮含量和醇溶物含量的相关性(1)

蜂胶清除自由基能力与总黄酮含量和醇溶物含量的相关性(1)

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1、万方数据§这墅婴窒塑鱼虫垦坚些垒型£旦呈墨!曼垦QEg奠!塑垒兰Q塑生箜鲤鲞箜!!塑【文章标号]0412--4367(2009)11-0006—03蜂胶清除自由基能力与总黄酮含量和醇溶物含量的相关性龚蜜陈瀚清刘明柱(福建农林大学蜂学学院,福州,350002)摘要:【目的】探讨蜂胶清除自由基的能力与总黄酮和醇溶物含量的相关性。【方法】选取16个不同地区的蜂胶,用超声波辅助乙醇浸提法提取,Fenton反应和邻苯三酚自氧化反应测定醇提液对羟自由基(·OH-)和超氧阴离子自由基(·0a的清除率,分光光度法和重量法测定总黄酮和醇溶物的含量。【结果】蜂胶醇提液清除·OH-的能力与其总黄酮含量

2、、醇溶物含量均存在极显著的正相关;清除·0—勺能力与其总黄酮含量、醇溶物含量均不存在明显的相关性(r=0.119,P:0.66>0.05)、(r=0.414,P=0.11>0.05)。【结论陬中总黄酮和醇溶物含量的高低,并不能完全代表蜂胶清除自由基能力的强弱。关键词:蜂胶;自由基;黄酮类化合物;醇溶物;相关性[中图分类号1S896.6【文献标识码】A蜂胶可作为天然的抗氧化剂[11,因为抗氧化清除自由基是蜂胶既突出又重要的功能。由于从不同产地、不同胶源植物采集的蜂胶成分有差异,从而导致不同来源的蜂胶抗氧化清除自由基能力也有差异。总黄酮含量、醇溶物含量是蜂胶质量标准中必测的重要理化指

3、标,探讨蜂胶抗氧化清除自由基能力与两者之间的相关陛,为是否可能在测定了蜂胶总黄酮含量或醇溶物含量的同时,还可以快速地判断来源不同的蜂胶抗氧化清除自由基能力的强弱提供依据。1材料与方法1.1蜂胶原始蜂胶样品共16个,分别来自辽宁喀左县紫金蜂业科技公司、辽宁丹东、北京蜂业公司、北京天宝康高新技术开发有限公司、青海民和县、陕西宝鸡、四川成都、河南长兴蜂业有限公司、河南新乡、山西榆次晋中总蜂场、山东蒙阴县蒙山蜂人蜂业有限公司、湖北随州鸿发蜂产品有限公司、湖北随州、杭州浙江大学动物科学院、上海康亨园蜂业有限公司、福州福建农林大学蜂学学院意蜂场。1.2仪器752紫外可见分光光度计、KQ一30

4、0VDE型双频数控超声波清洗器、多联过滤器、DZF一6050真空电热恒温干燥箱、BS224S电子天平、FWl00高速万能粉碎机、碘量瓶等实验室常规玻璃器皿。1.3试剂和溶液0.2mol·L。1磷酸缓冲液(pH7.4)、0.75mmol·L。1邻二氮菲无水乙醇溶液(现用现配)、0.75mmol·L。1硫酸亚铁溶液(现用现配)、0.01%过氧化氢溶液(现用现配)、100g·L。1硝酸铝溶液、9.8g·L‘1醋酸钾溶液、95%乙醇、无水乙醇(以上试剂均为AR级)。Tris—HCl缓冲溶液:称取三(羟甲基)氨基甲烷1.2119,用水溶解定容至100mL,得0.1mol·mL。1Tris溶

5、液;量取36%一38%Hcl0.429mL,用水稀释定容至100mL,得0.05mol/LHCl溶液,稀释5倍得10mmo]·L—HCl溶液;50mL0.1mol/LTris溶液和45mL0.05mol/LHCl溶液混匀,用0.05mol·L。1HCl溶液调至pH值为8.2。邻苯三酚溶液:称取0.03789邻苯三酚,用10mmol·L。HCl溶解,定容至100mL,得3mmol·L。1邻苯三酚溶液。芦丁标准溶液:精确称取经120。C减压干燥至恒重的芦丁对照品50mg,无水乙醇溶解、移人50mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,准确移取10mL,置于50mL容量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇

6、匀。1.4蜂胶乙醇提取液的制备蜂胶样品经冷冻,高速万能粉碎机粉碎,过80目筛后,准确称取29左右与95%乙醇按1:10(W/V)混和于碘量瓶中,摇匀,置于超声波发生器内超声提取[21(超声频率45KHz、时间30min),取出后抽滤,分别收集滤液、滤渣,滤液再用中速滤纸过滤,得到澄清滤液,用95%乙醇稀释滤液、定容,即为蜂胶乙醇提取液(简称蜂胶醇提液)。1.5蜂胶醇提液对羟自由基(·oH-)清除率的测定试验原理:Fenton试剂是以过氧化氢为氧化剂、万方数据2009V01.60No.11中国蜂业APICULTUREOFCHINA试验研究报告7Fez+为催化体系的氧化体系。其过程的

7、反应机理是:Fe2++H202_,Fe~OH-+·OH一。邻二氮菲一Fe2+水溶液被·OH一氧化为邻二氮菲一Fe3+后,其536nm最大吸收峰消失【3】,加入蜂胶醇提液后,由于·OH一被清除,溶液吸光值又回升。通过吸光值的变化可间接的测定蜂胶乙醇提取液对体系中·OH一的清除率。试验步骤:参照同类方法【4】,取lmL0.75mmol·L‘1邻二氮菲无水乙醇溶液于试管中,依次加入2mL0.2mol·L-1的磷酸缓冲液(pH=7.4)和0.2mL蒸馏水,充分混匀,加入lmL新配制的0.

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