猪血凝性脑脊髓炎病毒不同佐剂灭活疫苗免疫balbc小鼠的比较试验

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1、万方数据·34·生理生化中国畜牧兽医2009年第36卷第6期猪血凝性脑脊髓炎病毒不同佐剂灭活疫苗免疫BALB／c小鼠的比较试验陈克研1。贺文琦1，陆慧君2，赵魁1，赵传博1，曾凡勤1，高丰1(1．吉林大学畜牧兽医学院，长春130062；2．吉林大学人畜共患病与教育部重点实验室人畜共患病研究所，长春130062)摘要：用血凝／血凝抑制试验(HA／HI)检测自制的猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)氢氧化铝胶灭活苗和蜂胶佐剂灭活苗免疫BALB／c小鼠后的抗体效价，依据小鼠抗体效价比较不同免疫佐剂的效果。结果表明，用氢氧化铝胶佐剂配制的疫苗可刺激接种

2、动物产生快速免疫应答反应，抗体产生效价高、维持时间长，其效果优于其它佐剂，有望成为HEV灭活疫苗的候选佐剂。关键词：血凝性脑脊髓炎病毒；灭活疫苗；佐剂中图分类号：$859．79文献标识码：A文章编号：1671—7236(2009)06—0034—04猪血凝性脑脊髓炎是由血凝性脑脊髓炎病毒(hemagglutinatingencephalomyelitisvirus，HEV)引起仔猪的一种急性、高度传染性疾病。HEV属于冠状病毒属的成员，其主要侵害1～3周龄的乳猪，临床上感染猪以呕吐、衰竭或明显的神经症状为主要特征，死亡率高达20％～100

3、％(殷震等，1997；姚龙涛，2000)。流行病学调iI查结果显示，该病呈世界范围内分布(Chang等，1978；Hirano等，1999；贺文琦等，2005)，而且近年来其发病呈上升趋势(贺文琦等，2007；Quiroga等，2008)。收稿日期：2009—01-04作者简介：陈克研(1983一)，男，内蒙古人，博士生，研究方向：分子病理及分子免疫学。通信作者：高丰，主要从事动物病理学研究。Tel：0431—87836157，E—mail：gf86661@sohu．corn基金项目：国家自然科学基金资助项目(30671551)；吉林省科

4、技发展计划重点资助项目(20060206—2)。目前，国内该病的防制工作还处于空白期，仅在国外的部分国家应用“亚感染”进行预防，即在母猪临产前一个月与病猪接触或喷雾或肌肉注射培养的弱毒，使母猪免疫，通过初乳中的抗体保护所产的仔猪(Sekiguchi等，2004；斯特劳等，2008)。但此种免疫方法存在着散毒的危险，且HEV在猪体内可发生基因重组，存在毒力增强的可能性。因此，研制高效安全的疫苗对该病的防治有重要的现实意义。本试验选用市售蜂胶佐剂和铝胶佐剂制备的HEV灭活疫苗免疫小鼠，通过比较免疫小鼠的抗体效价，筛选出高效免疫佐剂，为HEV灭

5、活疫苗的研制奠定基础。1材料与方法1．1细胞与种毒猪肾传代细胞系PK一15引自中国兽药监察所，按常规方法传代培养。HEV一67N标准毒株(ATCCVR741)，购于美国标准生物收藏中心，经检测在PK一15细胞上增殖后，HA效价为，⋯，⋯，}M(1．DepartmentofAnimalScienceandTechnology，BeijingUniversityofAgriculture，Beijing102206，China；2．CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，JilinUnivers

6、ity，Changchun130062，China；3．BeijingKeyLaboratoryofTraditionalChineseVeterinaryMedicine，BeijingUniversityofAgriculture，Beijing102206，China)Abstract：Tostudytheeffectofbaicalinandforsythiasidetoinduceratpulmonarymicrovascularendothelialcellstoex—pressIFN—aandIFN一7，themodelwa

7、sbasedonculturedPMVECsinvitro．WiththemethodofELISA。wedetectedthese—cretoryvolumeofIFN—aandIFN一7afterPMVECswasinducedbybaicalinandforsythiasideatdifferentconcentrationandtime．TheresultsindicatedthatPMVECsproducedthemostIFN—aandIFN一7afterinduced24hbybaicalinat10／19／mL，while

8、forsythiasidewas20／19／mLat12hand5／lg／mLat24h，respectively．Theresultprovidedreferencesforscreenin