禾谷孢囊线虫heterodera avenae纤维素结合蛋白基因hacbp1的克隆和序列分析

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA41(3)：240—246(2011)禾谷孢囊线虫(Heteroderaavenae)纤维素结合蛋白基因(Ha—cbp一1)的克隆和序列分析顾晓川，彭德良，彭焕，龙海波，王高峰，黄文坤，何月秋(中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100193；。云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，昆明650201)摘要：禾谷孢囊线虫(Heteroderaayenae)是中国小麦上的重要病原线虫。纤维素结合蛋白基因是一种重要的植物线虫寄生和致病相关基因。用同源克隆的方法从禾谷孢囊线虫寄生

2、前二龄幼虫中克隆出一种纤维素结合蛋白新基因Ha-c印一(GenBank注册号GQ178086)cDNA序列。Ha．cbp—J基因cDNA包含1个开放阅读框，编码131个氨基酸残基的蛋白质，预测蛋白由1个长度为l8氨基酸残基的信号肽和1个纤维素结合区域(CBD)组成。Ha—cbp—的基因组DNA序列含有2个内含子。预测的禾谷孢囊线虫纤维素结合蛋白(HA—CBP一1)序列与大豆孢囊线虫纤维素结合蛋白(HG—CBP一1)序列有60％的同一性和76％的相似性，与甜菜孢囊线虫纤维素结合蛋白(HS—CBP一1)序列有60％的同一性和75％的相似性。本研究首次从禾谷孢囊线虫中成功克隆出CBP蛋白

3、基因。关键词：禾谷孢囊线虫；纤维素结合蛋白基因(Ha—cbp-j)；基因克隆Molecularcloningandsequencingofcellulosebindingproteingene(Ha—cbp一7)fromthecereaIcystnematode(Heteroderaavenae)GUXiao—chuan，PENGDe—liang，PENGHuan’，LONGHai．bo，WANGGao—feng，HUANGWen—kun，HEYue—qiu(TheStateKeyLa—boratoryforBiologyofDiseaseandInsectPests，Instit

4、uteofPlantProtection，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100193，China；KeyLaboratoryofAgriculturalBiodiversityandPestsControl，MinistryofEducation，YunnanAgriculturalU—niversity，Kunming650201，China)Abstract：Thecerealcystnematode，Heteroderaavenae，isanimportantnematodepathogenofwheatinChi—n

5、a．Thecellulosebindingproteingenesaretheimportantparasitismgenesforinvasionofplantparasiticnema—todes．ThecDNAsequenceofHa—cbp-(GenBankaccessionGQ178086)wasclonedbyRACEkitbasedonhomologouscloningmethod．TheresultsshowedthatthecDNAsequenceofHa—cbp一，conminedanopenrea—dingframe，whichencoding131amino

6、acidswithapredictedsignalpeptidesequenceforsecretionandacellu—lose—bindingdomain．TheDNAsequenceofHa—cbp—containedtwointronswiththelengthof932bp．ThepredictedHA—CBP—laminoacidsequencehad60％identityand75％一76％similaritywithHS—CBP—landHG—CBP一1．Keywords：cerealcystnematode；cellulose—bindingprotein(Ha

7、—cbp—)；geneclone中图分类号：$432．45文献标识码：A文章编号：0412-0914(2011)03-0240-07禾谷孢囊线虫(HeteroderaavenaeWol1．，Ce—realcystnematode，简称CCN)又称燕麦孢囊线收稿日期：2010-03—11；修回日期：201l-03—15基金项目：科技部国际合作项目(2009DFB30230)；国家自然基金国际合作项目(30921140411)；公益性行业(农业)科研专项(20090304