我国部分地区禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

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1、·66·旦里壁生理坠堕鱼凹业坐坐里!璺塑塑!!型‘!!!!垡!!竺翌璺翌!些，曼蔓!!塑皇!!坚-!!!业型坚!!!!!!g!!，!里!我国部分地区禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验’刘吉山，沈志强一，徐可利，赵蕾，王燕，吴信明，李峰，林初文．张颖，莫玲(山东省滨州畜牧兽医研究所滨州256618山东省畜禽用蜂胶疫苗研究开发推广中心)[摘要]从山东、河南、江苏、辽宁、河北、广西等10余个省、市、自治区临诊上有典型大肠杆菌病病变的病禽2000多羽采集病料，分离培养和鉴定出504株大肠杆菌。其中126株，经

2、O血清型鉴定，除18株未能定型，7株自凝外，共鉴定出101个分离株为0血清型，这些分离株覆盖了31个血清型，但以078、02、045、0109、()18、08／093、0107、053、0154等10个血清型为主，共53株，占定型菌株的52．3％，前5种血清型在种类上只占定型菌株血清型的总数的16．1％，却拥有38个分离株，占定型菌株的37．6％。因此，可以认定02、078、045、0109、018等5个血清型为优势血清型。另外，融合株6个，占定型菌株5．9％，其中，oI／0154、02／086、08／

3、093、02／078、0107／0154、053／080、035／0107／ol54、0I／018／0142等为首次分离报道。药敏试验结果表明：82％的菌株对丁胺卡那霉素高敏，65％的菌株对头孢氨苄高敏，63％的菌株对壮观霉素高敏，50％的菌株对左旋氧氟沙星高敏，38％的菌株对新霉素和庆大霉素高敏。[关键词]禽；大肠杆菌；分离株；致病性；0血清型；药敏试验；分离鉴定禽大肠杆菌是家禽常见的病原菌之一，可引起家禽胚胎死亡、脐炎、败血症、肉芽肿、卵黄性腹膜炎和全眼球炎等一系列疾病，给养禽业造成了严重的经济损失

4、。世界许多国家已经作了详细调查，确定了最常与禽病有关的血清型是01、02、078等优势血清型。我们从山东、河南、江苏、辽宁、河北、广西等10余个省、市、自治区临诊上有典型大肠杆菌病病变的病禽2000多羽采集病料，分离培养和鉴定出504株大肠杆菌。其中126株，经。血清型鉴定，除18株未能定型，7株自凝外，共鉴定出101个分离株为0血清型，这些分离株却覆盖了31个血清型，现将结果报告如下：1材料和方法1．1病料来源1999年1月至2003年4月，山东，河南，辽宁等省送检和采集的大肠杆菌病病死鸡。1．2培养

5、基营养琼脂，本中心实验室自制；麦康凯琼脂，购自山东省卫生防疫站。1．3大肠杆菌标准抗0血清由中国兽医药品监察所、卫生部成都生物制品研究所提供。1．4细菌分离培养按无菌要求将病死鸡肝脏取出，接种于营养琼脂平皿上，37℃培养12～18小时后，将长出的菌落划线接种于麦康凯琼脂37℃培养18～24小时后，取典型的红色菌落接种于营养琼脂平皿上进行纯化37℃培养12—18小时后，将纯化后的细菌接种于试管斜面上37℃培养18—24小时，置于4℃冰箱中备用。1．5生化试验将上述细菌接种于个生化反应管中，37℃培养72小

6、时观察结果。1．6血清型鉴定取被检细菌纯培养物用生理盐水离心、洗涤2次，稀释成100亿／ml的菌液，用水煮2．5小时，破坏其荚膜抗原，应用平板凝集试验及微量凝集试验，用中监所提供的抗0血清，对所分离的菌株进行鉴定，其中大部分菌株由中国兽医药品监察所进行血清型复核鉴定。1．7药敏试验纸片法：将被检细菌适当稀释后均匀涂于营养琼脂表面，5分钟后，贴上药敏纸片，置37℃培养12—18小时，观察结果。。基金项目：山东省重大科技攻关项目的一部份作者简介：刘吉山(1975一)，男，山东高唐人，助理研究员，主要从事预防

7、兽医学与兽医生物制品学的研究开发工作**通讯作者主垦堂皇塑芏叁壁些熊皇塑主些童基垒!塑!生堂查生盒·67·2试验结果2．1细菌分离鉴定结果表12．2生化试验结果表22．3血清型鉴定结果表3、4、52．4药敏试验结果表63小结与讨论3·1本次试验共鉴定了126株大肠杆菌的血清型，出现了31个血清型，说明我国部分地区血清型复杂，流行范围广。但也从本次调查结果得出，078、02、045、0109、018、08／093、0107、053、0154等10个血清型为主，共53株，占定型菌株的52．3％，前5种血清型

8、在种类上只占定型菌株血清型的总数的16．1％，却拥有38个分离株，占定型菌株的37．6％。有理由认为，前5种血清型是在我国流行优势血清型，这也为选择优势血清型制备疫苗控制该病提供了科学依据。寰1504株大肠杆菌的来源与126株0血清型定型鉴定结果鸡、鸭鸡鸡、鸭鸡鸡、鸭、猪鸡、鸭鸡i93H65454322弛9O4O7㈣；雪㈣眈㈣叫吣㈣叫㈣123456789¨厶日‘68。旦塑堡型垫呈苎』￡墨坚坠堡巫坐堕!堕旦也婪兰!!!!婴!g!!!!堡旦!!