转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用

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1、中国临床康复第8着第20期2004-07-15出版3966ChineseJournalofClinicalRehabilitation,July152004Vol.8No.20·东础研究·转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用’“王立春,韩雪峰,张宏颖,石义钢,韩剑锋,夏景君,林欣王立春,韩雪峰,石义钢,韩剑锋,夏景君,林欣,哈尔滨医科大学附属0引盲第二临床医学院骨外科,黑龙江省哈尔滨市150086关节软骨缺损的修复始终是骨科领域的难题。组织工程作张宏颖,哈尔滨市穆斯林医院内科,瓜龙江省哈尔滨市150042王立春☆,男,1972

2、年生,黑龙江省哈尔滨市人,汉族,2002年哈尔滨医为一门新兴的交叉学科为该病的治疗提供了新的希望。然而软科大学毕业,博士,主治医师,主要从事软于及骨的组织工程与基因治骨细胞作为种子细胞来源及扩增困难,间充质干细胞修复组织疗研究。wlcbox@sina.com力学强度又低于正常关节软骨。本实验拟将骨形态发生蛋白一2电话:+86-451-86605151黑龙江省自然科学基金资助项目(DOl-11)(BMP-2)cDNA通过5型复制缺陷重组腺病毒转染人骨髓基质中圈分类号:11318文做标识码:A文章编号:1671一5926(2004)20一

3、3966-03细胞(mesenchymalstemcell,MSC),体外于纤维蛋白凝胶中三维收稿日期:2004-04-16修回日期:2004-04-28(26/GY)培养,促使MSc向软骨细胞转化,分泌软骨基质,以期获得软骨Applicationoftransgenictechnologyintissueengineeringto组织,为解决软骨组织工程中种子细胞不足探索新方法。culturecartilageinvitroLi-ChunWang,Xue-FengHan,Hong-Yng1材料和方法Zhang,Yi-GangShi,

4、Jian-FengHan,Jing-JunXia,XinLinLi-ChunWang,Xue-FengHan,Y-GangShi,Jian-FengHan,Jing-JunXia,设计:非随机对照的实验研究。XinLin,DepartmentofOrthopaedics,SecondAffiliatedClinicalCollege,地点和材料:实验地点为哈尔滨医科大学附属二院实验中HarbinMedicalUniversity,Harbin150086,HeilongiiangProvince,China心。实验对象为哈尔滨医科大学

5、动物实验中心提供的清洁级Hong-YingZhang,DepartmentofInternalMedicine,HarbinMuslimHos-pital,Harbin150042,HeilongjiangProvince,ChinaWister大鼠10只,雌雄不拘,体质量200一250g,饲养温度23℃,Li-ChunWang*,Male,HanNationality,Bornin1972inHarbinCity,Hei-湿度40%一70%。所需试剂包括1640培养基,胎牛血清,胰蛋longjiangProvince,China,D

6、octorofHarbinMedicalUniversityin2002,At-tendingphysician.Researchdirection:tissueengineeringofboneandcarti-白酶,淋巴分离液,纤维蛋白原冻干粉,凝血酶,X-gal,CollagenIIlage,genetherapy.wlcbox@sina.com单克隆抗体,BMP-2单克隆抗体,二抗试剂盒均为罗氏公司生Telephone:+86-451-86605151Supportedby:theNaturalScienceFoundatio

7、nofHeilongjiangProvince,产;骨形态发生蛋白一2重组腺病毒载体(Ad-BMP-2),半乳糖昔No.D01一11*酶重组腺病毒载体(Ad-Lacz)由刘建宇博士惠赠。Received:2004一04一16Accepted:2004一04一28参与者:研究设计者为第一作者,实验干预者为全部作者。Abstract干预措施:①Msc培养:大鼠取股骨干,剪除两端后磷酸盐AIM:Tostudytheeffectoftransgenicofbonemorphogeneticprotein-2缓冲液(PBS)冲洗骨髓;淋巴分离液

8、离心取单核细胞层,计数后adenoviralvectorAd-BMP-2onthecultivationinvitroofcompoundoffibrin以4x10'L一’,37℃,50mL/LC02,95%湿度培养。7

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1、中国临床康复第8着第20期2004-07-15出版3966ChineseJournalofClinicalRehabilitation,July152004Vol.8No.20·东础研究·转基因技术在组织工程体外软骨组织培养中的应用’“王立春,韩雪峰,张宏颖,石义钢,韩剑锋,夏景君,林欣王立春,韩雪峰,石义钢,韩剑锋,夏景君,林欣,哈尔滨医科大学附属0引盲第二临床医学院骨外科,黑龙江省哈尔滨市150086关节软骨缺损的修复始终是骨科领域的难题。组织工程作张宏颖,哈尔滨市穆斯林医院内科,瓜龙江省哈尔滨市150042王立春☆,男,1972

2、年生,黑龙江省哈尔滨市人,汉族,2002年哈尔滨医为一门新兴的交叉学科为该病的治疗提供了新的希望。然而软科大学毕业,博士,主治医师,主要从事软于及骨的组织工程与基因治骨细胞作为种子细胞来源及扩增困难,间充质干细胞修复组织疗研究。wlcbox@sina.com力学强度又低于正常关节软骨。本实验拟将骨形态发生蛋白一2电话:+86-451-86605151黑龙江省自然科学基金资助项目(DOl-11)(BMP-2)cDNA通过5型复制缺陷重组腺病毒转染人骨髓基质中圈分类号:11318文做标识码:A文章编号:1671一5926(2004)20一

3、3966-03细胞(mesenchymalstemcell,MSC),体外于纤维蛋白凝胶中三维收稿日期:2004-04-16修回日期:2004-04-28(26/GY)培养,促使MSc向软骨细胞转化,分泌软骨基质,以期获得软骨Applicationoftransgenictechnologyintissueengineeringto组织,为解决软骨组织工程中种子细胞不足探索新方法。culturecartilageinvitroLi-ChunWang,Xue-FengHan,Hong-Yng1材料和方法Zhang,Yi-GangShi,

4、Jian-FengHan,Jing-JunXia,XinLinLi-ChunWang,Xue-FengHan,Y-GangShi,Jian-FengHan,Jing-JunXia,设计:非随机对照的实验研究。XinLin,DepartmentofOrthopaedics,SecondAffiliatedClinicalCollege,地点和材料:实验地点为哈尔滨医科大学附属二院实验中HarbinMedicalUniversity,Harbin150086,HeilongiiangProvince,China心。实验对象为哈尔滨医科大学

5、动物实验中心提供的清洁级Hong-YingZhang,DepartmentofInternalMedicine,HarbinMuslimHos-pital,Harbin150042,HeilongjiangProvince,ChinaWister大鼠10只,雌雄不拘,体质量200一250g,饲养温度23℃,Li-ChunWang*,Male,HanNationality,Bornin1972inHarbinCity,Hei-湿度40%一70%。所需试剂包括1640培养基,胎牛血清,胰蛋longjiangProvince,China,D

6、octorofHarbinMedicalUniversityin2002,At-tendingphysician.Researchdirection:tissueengineeringofboneandcarti-白酶,淋巴分离液,纤维蛋白原冻干粉,凝血酶,X-gal,CollagenIIlage,genetherapy.wlcbox@sina.com单克隆抗体,BMP-2单克隆抗体,二抗试剂盒均为罗氏公司生Telephone:+86-451-86605151Supportedby:theNaturalScienceFoundatio

7、nofHeilongjiangProvince,产;骨形态发生蛋白一2重组腺病毒载体(Ad-BMP-2),半乳糖昔No.D01一11*酶重组腺病毒载体(Ad-Lacz)由刘建宇博士惠赠。Received:2004一04一16Accepted:2004一04一28参与者:研究设计者为第一作者,实验干预者为全部作者。Abstract干预措施:①Msc培养:大鼠取股骨干,剪除两端后磷酸盐AIM:Tostudytheeffectoftransgenicofbonemorphogeneticprotein-2缓冲液(PBS)冲洗骨髓;淋巴分离液

8、离心取单核细胞层,计数后adenoviralvectorAd-BMP-2onthecultivationinvitroofcompoundoffibrin以4x10'L一’,37℃,50mL/LC02,95%湿度培养。7

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