SNT2426-2010进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法.pdf

《SNT2426-2010进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２４２６—２０１０进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犻狋狉犻狀犻狀犮狅狀狋犲狀狋狊犻狀犮犲狉犲犪犾狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犎犘犔犆犿犲狋犺狅犱２０１００１１０发布２０１００７１６实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜２４２６—２０１０前言本标准的附录Ａ为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：林雁飞、赵晓亚、胡小钟、王鹏、李晶、

2、付晓芳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ标准分享网www.bzfxw.com免费下载犛犖／犜２４２６—２０１０进出口粮谷中桔霉素含量检测方法液相色谱法１范围本标准规定了进出口粮谷中桔霉素含量液相色谱检测方法。本标准适用于进出口大米、大麦、燕麦、小麦中桔霉素含量的检测。２方法提要用乙腈异丙醇水的混合溶液提取试样中桔霉素，Ｃ１８固相萃取小柱净化，用配荧光检测器的液相色谱仪测定，外标法定量。３试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的水。３．１异丙醇：色谱纯。３．２乙腈：色谱纯。３．３磷酸：优级纯。３．４

3、提取溶剂：乙腈异丙醇水（３５＋１０＋５５，体积比），用磷酸调ｐＨ为１．５。３．５磷酸溶液：取５．６ｍＬ磷酸，以水定容至１０００ｍＬ。３．６流动相：乙腈异丙醇０．０８ｍｏｌ／Ｌ磷酸（３５＋１０＋５５，体积比）。３．７Ｃ１８固相萃取柱：５００ｍｇ，３ｍＬ，或相当者。使用前分别用５ｍＬ甲醇和５ｍＬ水预淋洗并保持柱体湿润。３．８桔霉素标准物质（ｃｉｔｒｉｎｉｎ，Ｃ１３Ｈ１４Ｏ５，ＣＡＳ编号：５１８７５２）：纯度大于等于９７％。３．９桔霉素标准储备液：称取适量桔霉素标准物质，用乙腈溶解并定容至１．０ｍｇ／ｍＬ，０℃～４℃保存。３．１

4、０桔霉素标准工作液：根据需要用流动相将标准储备液稀释成２５ｎｇ／ｍＬ、５０ｎｇ／ｍＬ、１００ｎｇ／ｍＬ、５００ｎｇ／ｍＬ、１０００ｎｇ／ｍＬ的标准工作溶液。３．１１玻璃纤维滤纸：直径１１ｃｍ，孔径１．５μｍ。４仪器和设备４．１高效液相色谱仪：配有荧光检测器。４．２振荡器。４．３离心机：４０００ｒ／ｍｉｎ。４．４真空固相萃取装置。４．５氮吹仪。４．６分析天平。５试样制备和保存取有代表性样品５００ｇ，用粉碎机粉碎并通过８３０μｍ圆孔筛，混匀，分成两份，装入洁净容器内，密封并标识。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化

5、。１犛犖／犜２４２６—２０１０６测定步骤６．１提取称取试样约５ｇ（精确至０．０１ｇ）于５０ｍＬ离心管中，加１０ｍＬ提取溶剂（３．４），在振荡器上振荡提取３０ｍｉｎ。于３５００ｒ／ｍｉｎ离心４ｍｉｎ，上清液转入另一离心管中。在残渣中再加入５ｍＬ提取溶剂（３．４），重复上述操作，合并上清液。在提取液中加水至４０ｍＬ，并用磷酸调ｐＨ为１．５，过玻璃纤维滤纸（３．１１），待净化。６．２净化将上述溶液过预淋洗好的Ｃ１８固相萃取柱，用５ｍＬ水淋洗柱子。待淋洗液全部流出柱子后，减压抽干３ｍｉｎ。用１０ｍＬ甲醇以１．０ｍＬ／ｍｉｎ的速度洗脱，收集全部

6、洗脱液，在４０℃下，Ｎ２吹干，再以１．０ｍＬ流动相溶解，过０．２μｍ滤膜，供液相色谱测定。６．３测定６．３．１液相色谱条件ａ）色谱柱：Ｃ１８柱，２５０ｍｍ×４．６ｍｍ（内径），粒径５μｍ，或相当者；ｂ）流动相：乙腈异丙醇０．０８ｍｏｌ／Ｌ磷酸（３５＋１０＋５５，体积比）；ｃ）流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）进样量：５０μＬ；ｅ）柱温：２８℃；ｆ）检测波长：Ｅｘ＝３３１ｎｍ，Ｅｍ＝５００ｎｍ。６．３．２色谱测定根据样液中被测桔霉素含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作液和样液中桔霉素响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作

7、液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，桔霉素保留时间约为９．１ｍｉｎ，标准物质色谱图参见附录Ａ中图Ａ．１。６．３．３空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。７结果计算和表述用色谱数据处理软件或按式（１）计算试样中桔霉素含量，计算结果需将空白值扣除：犃×犮×犞犡＝…………………………（１）犃ｓ×犿式中：犡———试样中桔霉素含量，单位为毫克每千克（ｍｇ／ｋｇ）；犃———样液中桔霉素的峰面积；犃ｓ———标准工作液中桔霉素的峰面积；犮———标准工作液中桔霉素的浓度，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ）犞———样液最终定容体积，单位为毫升

8、（ｍＬ）；犿———最终样液所代表的试样量，单位为克（ｇ）。８测定低限、回收率８．１测定低限本方法的测定低限为０．０１ｍｇ／ｋｇ。８．２回收率粮谷中桔霉素检测的添加回收率数据见表１。２标准分享网www.bzfxw.com免