SNT1248-2003国境口岸淋病检验规程.pdf

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1、rJ拍中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1248-2003国境口岸淋病检验规程Inspectioncodesforgonorrheaatfrontierport2003-05-28发布2003-12-01实施中_华人民共和国.*国家质量监督检验检疫总局.IIJSN汀1248-2003前言本标准的附录A为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口.本标准起草单位:中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫局。本标准主要起草人:王远忠、于长友、刘福奎、杨启生、易晨。本标准系首次发布的检验检疫行业标准.S

2、N/T1248-2003国境口岸淋病检验规程1范围本标准规定了国境口岸实验室淋病检验标本的采集及运送、检验的方法步骤和结果报告.本标准适用于国境口岸对淋球菌感染的实验室诊断。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB15975-1995淋病诊断标准及处理原则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。淋病gonorrhea由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖道的化脓性感

3、染.淋球菌gonococcus是引起淋病的病原体，在分类学上属奈瑟菌属，学名为淋病奈瑟菌。4标本的采集及运送41标本的采集标本的采集部位及方法步骤.按照GB15975-1995附录A的规定。标本采集后，接种于培养基培养或直接涂片.防止菌体死亡影响培养或标本干固无法涂片。4.2标本的运送取材地点离实验室较远时，应接种到改良的Stuart运送培养基上，并在12h以内送达实验室培养。运送过程中，应保持样品温度在350C^36℃之间、湿度在80%以上。5实验室检验5.1实验室诊断流程实验室诊断流程(见附录A)52试剂的准备5.2.1革兰氏染色液(或美蓝染色液):成分及配制方法按照GB1597

4、5-1995附录A的规定。5.2.2Thayer-Martin(T-M)培养基及改良的Stuart运送培养基:成分及配制方法按照GB15975-1995附录A的规定。5.2.3糖发酵试剂:成分及配制方法按照GB15975-1995附录A的规定。用于糖发酵试验的搪类试剂应为分析纯级。5.2.4氧化酶试剂:成分及配制方法按照GB15975-1995附录A的规定。1SN/T1248-20035.3涂片显徽镜检查5.3.1涂片固定5.3.1.1分泌物的直接涂片固定5.3.1.1.1将采集的棉拭子标本，在洁净载玻片上轻轻滚动，防止细胞破裂或变形，厚薄要均匀适当。5.3.1.1.2自然干燥后加热

5、固定。固定时，将玻片迅速通过酒精灯火焰上三分之一处2次~3次，应防止加热过度使细胞变形，以玻片放到手背上不感到太烫为宜。5.3.1.2培养物的涂片固定5.3.1.2.1滴一滴生理盐水于洁净的载玻片上，用白金耳取菌环从培养基典型或可疑菌落上轻轻葫取细菌，在载玻片盐水上混匀、铺平。5.3.1.2.2按5.3.1.1.2的规定操作.5.3.2革兰氏染色按照GB15975-1995附录A的规定.5.3.3检验结果5.3.3.1分泌物的直接涂片镜检可见到大量红色多型核白细胞，有些细胞吞噬双球菌，细胞内可有一对或数十对不等的革兰氏染色阴性菌，呈肾型或卵圆型.常为成对排列，两菌接触面扁平或稍凹，菌

6、体长约为0.7pm，宽为。.5pm，两菌大小可有差异。有时可见到单个、四联型或八叠状的双球菌，为阳性结果。5.3.3.2培养物的涂片镜检菌体符合5.3.3.1的形态，但菌体大小及染色深度有差异，排列也不一致。约25%为双球菌，而多数为单球菌，个别呈四联型或八叠状，为阳性结果。5.4分离培养5.4.1方法步骤按照GB15975-1995附录A的规定。5.4.2检验结果经24h--48h培养后，淋球菌可在培养基上形成圆形、凸起、表面光滑、湿润、半透明或灰白色菌落，边缘呈花瓣状，直径约为0.5mm-1.0mm，用接种环触之带粘性，培养超过48h时，菌落面积增大，表面粗糙，边缘皱缩，为阳性结

7、果。5.5妞化酶试验5.5.1方法步骤按照GB15975-1995附录A的规定。直接向菌落滴加氧化酶试剂时，应先挑取留做其他试验的备用菌种。5.5.2检验结果加人试剂后，经15s-20s菌落呈红色，并逐渐变为紫色，最后呈黑色，为阳性结果.5.6福发酵试验5.6.1方法步骤按照GB15975-1995附录A的规定。5.6.2检验结果淋球菌只发酵葡萄糖，葡萄糖管颜色变为黄色，其他搪管不变色，保持红色，为阳性结果。5.7直接荧光抗体试验5.7.1方法步骤按照GB