SNT1181-2010口蹄疫检疫技术规范.pdf

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准!"!#!!"!"#$!$代替!"!#$$%$&$"'(()#!"!#$$%$&'"'(()#!"!#$$%$&)"'(()口蹄疫检疫技术规范$%&'&()*(+,'-)-.-/0-'0--)&(12-%)31*4+&4+#$!$5!!5$!发布#$!!5$%5$!实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行!业!标!准口蹄疫检疫技术规范!"!#$$%$"&'$'"中国标准出版社出版北京复兴门

2、外三里河北街$(号邮政编码#$''')*网址+++,-./,012,/0电话#(%*&34)(!(%*$5*)%中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷"开本%%'6$&3'$!$(!印张$,*!字数34千字&'$$年3月第一版!&'$$年3月第一次印刷印数$"$(''"书号#$**'(($&7&$*4%!定价!",##元!"!#!!"!"#$!$版权所有·禁止翻制、电子发售前!!言!!本标准按照!"!#$%$"&''(给出的规则起草#本标准代替)*!#$$+$%$"&'',$口蹄疫病毒感染抗体检测方法琼脂免疫扩散试验%&)

3、*!#$$+$%&"&'',$口蹄疫病毒抗体检测方法!微量血清中和试验%&)*!#$$+$%,"&'',$食道咽部口蹄疫病毒探查试验%#本标准与)*!#$$+$%$"&'',&)*!#$$+$%&"&'',和)*!#$$+$%,"&'',相比'主要技术变化如下("""增加了口蹄疫病毒分离及鉴定)"""增加了酶联免疫吸附试验)"""增加了反转录-聚合酶链反应)"""增加了荧光反转录-聚合酶链反应)"""增加了固相竞争酶联免疫吸附试验)"""增加了液相阻断酶联免疫吸附试验#本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口#

4、本标准起草单位(中华人民共和国深圳出入境检验检疫局&中华人民共和国珠海出入境检验检疫局&中华人民共和国云南出入境检验检疫局#本标准主要起草人(花群义&阮周曦&卢体康&杨素&罗宝正&徐海聂&周晓黎&杨云庆&曾少灵&曹琛福&陈兵&陶虹#本标准所代替标准历次版本发布情况为(""")*!#$$+$%$"&'',)""")*!#$$+$%&"&'',)""")*!#$$+$%,"&'',#!!"!#!!"!"#$!$版权所有·禁止翻制、电子发售口蹄疫检疫技术规范!!范围本标准规定了口蹄疫病毒分离及鉴定&酶联免疫吸附试验&反转

5、录-聚合酶链反应&荧光反转录-聚合酶链反应&病毒中和试验&固相竞争酶联免疫吸附试验&液相阻断酶联免疫吸附试验和琼脂免疫扩散试验的技术规范#本标准适用于口蹄疫检疫##!规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的#凡是注日期的引用文件'仅注日期的版本适用于本文件#凡是不注日期的引用文件'其最新版本*包括所有的修改单+适用于本文件#!"!#..+&!分析实验室用水规格和试验方法%!缩略语下列缩略语适用于本文件#"/0-&$(幼仓鼠肾细胞1234(焦碳酸二乙酯561(口蹄疫5617(口蹄疫病毒83(食道咽部黏液#4

6、91:'(半数组织培养感染量##2(三氯三氟乙烷&!病毒分离及鉴定&%!!设备器材生物安全柜&二氧化碳培养箱&倒置显微镜&高速冷冻离心机&食道探杯&:;<耐冷冻密封瓶&&:;<细胞培养瓶或&=孔细胞培养板等#&%#!材料与试剂除特别说明以外'本标准所用试剂均为分析纯'试验用水应符合!"!#..+&二级水的规定#&%#%!!运输保存液(配制见附录>#&%#%#!细胞(敏感的细胞培养系统包括原代牛甲状腺细胞和原代猪&犊牛和羔羊肾细胞#已建立的细胞系如"/0-&$和9"-?)-&细胞也可以使用#&%#%%!硫乙醇酸盐*#

7、%!+培养基&'%:@酚红&/ABC,D溶液&'%:@<-/&E%:@碳酸氢钠溶液&细胞培养基&细胞维持液&胰蛋白酶溶液&抗生素等'配制见附录>#$!"!#!!"!"#$!$版权所有·禁止翻制、电子发售&%#%&!三氯三氟乙烷*##2+#&%%!样品的采集和处理&%%%!!样品的采集&保存&运送方法和要求见附录"#&%%%#!83液样品的处理(将样品与等量的##2混合'用组织捣碎机$''''F!;GB乳化,;GB','''F!;GB离心$';GB'取上清液用于接种细胞&乳鼠或用于其他试验#&%%%%!水泡皮的处理(

8、从:'@3")-甘油中取出上皮样品'用灭菌滤纸吸去甘油#无菌称量后剪碎'加入少量组织培养液和抗菌素磨成糊状'制备成$'@的组织悬液'以,'''F!;GB离心$';GB#取上清液接种细胞培养物&乳鼠或用于其他试验#&%%%&!水泡液的处理(无菌采集的新鲜水泡液可不作任何处理'直接使用#若水泡液不清洁'则需,'''F!;GB离心:;GB"$';GB'并加入抗生素

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