SNT1035-2011进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法.pdf

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜１０３５—２０１１代替ＳＮ／Ｔ１０３５—２００２进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犘犲狀犻犮犻犾犾犻狌犿犮犺狉狔狊狅犵犲狀狌犿，犃狊狆犲狉犵犻犾犾狌狊犪狀犱狉犲犾犪狋犲犱狋狅狓犻狀犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋２０１１０２２５发布２０１１０７０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜１０３５—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给

2、出的规则起草。本标准代替ＳＮ／Ｔ１０３５—２００２《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。本标准与ＳＮ／Ｔ１０３５—２００２相比，主要技术变化如下：———将中文名称改为《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。———增加了附录Ｂ培养基与试剂。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国齐齐哈尔出入境检验检疫局。本标准主要起草人：刘伟、张宏伟、马旭、侯丽萍、张海英、蔡国瑞、贺艳、庞春贤、曲鹏。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ／

3、Ｔ１０３５—２００２。Ⅰ犛犖／犜１０３５—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法１范围本标准规定了食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验方法。本标准适用于食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ４７８９．１６食品卫生微生物学检验常见产毒霉菌的鉴定ＳＮ／Ｔ１５３８（所有部分）培养基制备指南３试样的制备和保存３．１

4、试样制备从原始样品中取出部分有代表性的样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀。用四分法缩分出不少于５００ｇ，作为试样。装入清洁容器内，加封并表明标记。３．２试样保存将试样于－１８℃以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。４测定方法４．１方法提要以无菌操作称取有代表性的样品，然后进行微生物培养，按照ＧＢ／Ｔ４７８９．１６中检索表进行镜检、鉴定，对可疑的真菌进行产毒培养，用标准菌株检测培养液是否存在毒素，从而得到定性的结果。检验流程参见附录Ａ。４．２材料和设备４．２．１试管：直径１７ｍｍ，长１７

5、０ｍｍ。４．２．２吸管：１．０ｍＬ和１０ｍＬ。４．２．３离心机：３０００犵。４．２．４振荡器。４．２．５培养皿：内径９０ｍｍ。４．２．６载玻片和盖玻片。４．２．７Ｕ形玻璃棒。１犛犖／犜１０３５—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售４．２．８定性滤纸。４．２．９牛津杯：外径８．０ｍｍ±０．１ｍｍ，内径６．０ｍｍ±０．１ｍｍ，高１０．０ｍｍ±０．１ｍｍ。４．２．１０毛细管。４．２．１１游标卡尺。４．２．１２显微镜。４．２．１３标准菌株：巨大芽孢杆菌（犅犪犮犻犾犾狌狊犿犲犵犪狋犺犲狉犻狌犿）。４．２．１４标准产毒真菌菌株：纯绿青霉（犘犲狀

6、犻犮犻犾犾犻狌犿狏犻狉犻犱犻犮犪狋狌犿）、桔青霉（犘犲狀犻犮犻犾犾犻狌犿犮犻狋狉犻狀狌犿）、寄生曲霉（犃狊狆犲狉犻犵犻犾犾狌狊犘犪狉犪狊犻狋犻犮狌狊）、杂色曲霉（犃狊狆犲狉犻犵犻犾犾狌狊狏犲狉狊犻犮狅犾狅狉）。４．３培养基和试剂除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。４．３．１肉汤培养基：参见Ｂ．２。４．３．２孟加拉红培养基：参见Ｂ．３。４．３．３察氏培养基：参见Ｂ．４。４．３．４产毒培养基：参见Ｂ．５。４．３．５营养琼脂培养基：参见Ｂ．６。４．３．６２０％甘油水溶液。４．４细菌菌种培养和芽孢悬浮液的制备４．４．１菌种培养将装有菌

7、种的安瓶上部消毒后敲碎，加入少量肉汤培养基，使其溶解并移至肉汤管中混匀，置于３７℃±１℃培养６ｈ，再转接至另一肉汤管中３７℃±１℃培养１８ｈ。将培养物接种于营养琼脂斜面，３７℃±１℃培养１周，镜检，芽孢数达８５％以上时便可制备芽孢混悬液。４．４．２芽孢混悬液的制备用适量灭菌生理盐水冲洗菌苔，然后将该菌液移至离心管中，充分摇匀后于３０００犵离心３０ｍｉｎ，弃去上清液，再加入同样量的灭菌生理盐水，摇匀后６５℃水浴中加热３０ｍｉｎ，然后于１０００犵离心５ｍｉｎ，取上清液并转入灭菌试管中，即为芽孢悬浮液，稀释并测定浓度，置于冰箱中４℃保存。

8、４．５检验步骤４．５．１接种培养４．５．１．１样品制备精确称取２５ｇ（或吸取２５ｍＬ）有代表性的样品，放入装有２２５ｍＬ无菌水的三角瓶或广口瓶中，振荡３０ｍｉｎ，然后１０倍递增稀释至所需要的浓度。４．５．１．２分离培养用灭菌吸管吸取１