分子生物学课件重点整理__朱玉贤

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1、四、DNA的修复DNA修复系统功能错配修复恢复错配碱基切除修复切除突变的碱基核甘酸切除修复修复被破坏的DNADNA直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNASOS系统DNA的修复，导致变异1、错配修复（mismatchrepair）●Dam甲基化酶使母链位于5’GATC序列中腺甘酸甲基化●甲基化紧随在DNA复制之后进行（几秒种后至几分钟内）●根据复制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子链上的错配碱基2、碱基切除修复excisionrepair所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核苷酸位点的糖苷水解酶，它能特意切除受损核苷酸上的N-β-糖苷键，在DNA链上形成去嘌

2、呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。一些碱基在自发或诱变下会发生脱酰胺，然后改变配对性质，造成氨基转换突变*腺嘌呤变为次黄嘌呤与胞嘧啶配对*鸟嘌呤变为黄嘌呤与胞嘧啶配对*胞嘧啶变为尿嘧啶与腺嘌呤配对3、核苷酸切除修复1）通过特异的核酸内切酶识别损伤部位2）由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸3）DNA聚合酶以母链为模板复制合成新子链4）DNA连接酶将切口补平4、DNA的直接修复在DNA光解酶的作用下将环丁烷胸腺嘧啶二体和6-4光化物还原成为单体甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对SOS反应(SOSresponse)：是细胞DNA受到损伤

3、或复制系统受到抑制的紧急情况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。*包括诱导DNA损伤修复、诱变效应、细胞分裂的抑制以及溶原性细菌释放噬菌体等。细胞癌变也与SOS反应有关。两个作用（1）DNA的修复；（2）产生变异五、DNA的转座DNA的转座或叫移位（transposition)：由可移位因子(transposableelement)介导的遗传物质重排现象。转座子（transposonTn）：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。已经发现“转座”这一命名并不十分准确，因为在转座过程中，可移位因子的一个拷贝常常留在原来位置上，在新位点上出现的仅仅是它

4、的拷贝。因此，转座有别于同源重组，它依赖于DNA复制。29原核生物转座子的类型：1、插入序列(IS)IS是最简单的转座子，不含有任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。2、复合转座子(compositetransposon)复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列3、TnA家族nTnA家族没有IS序列、体积庞大(5000bp以上)、带有3个基因，其中一个编码β-内酰胺酶(AmpR)，另两个则是转座作用所必须的。(三）转座作用的机制n转座时发生的插入作用的普遍特征，是受体分子中有一

5、段很短的(3～l2bp)、被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。n对于一个特定的转座子来说，它所复制的靶序列长度是一样的，如IS1两翼总有9个碱基对的靶序列，而Tn3两端总有5bp的靶序列。n靶序列的复制可能起源于特定内切酶所造成的黏性DNA末端。（三）转座作用的遗传学效应p63（1）转座引起插入突变（2）转座产生新的基因（3）转座产生的染色体畸变（4）转座引起的生物进化反转录转座子（retrotransposon）：指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。第三章生物信息的传递（上）——从DNA到RNA转录(t

6、ranscription)：生物体以DNA为模板合成RNA的过程。参与转录的物质原料:NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)模板:DNA酶:RNA聚合酶其他蛋白质因子RNA合成方向：5'到3'转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链；将另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链。DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因。转录单元（transcriptionunit）一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。二、参与转录起始的关键酶与元件（

7、一）RNA聚合酶●原核生物RNA聚合酶（大肠杆菌为例）---全酶=核心酶+σ因子亚基基因相对分子量亚基数组分功能29αrpoA365002核心酶核心酶组装，启动子识别βrpoB1510001核心酶β和β'共同形成RNA合成的活性中心β'rpoC1550001核心酶ω？11000（需查）1核心酶？σrpoD700001σ因子存在多种σ因子，用于识别不同的启动子真核细胞的三种RNA聚合酶特征比较酶位置转录产物相对活性对α-鹅膏蕈碱的敏感性RNA聚合酶Ⅰ核仁rRNA50-70%不敏感RNA聚合酶Ⅱ核质hnRNA20-40%敏感RNA聚合酶Ⅲ核质tRNA约10%存在

8、物种特异性RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 RNA聚