实验十三 螺旋体检验(1稿)

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1、实验十三螺旋体检测一、临床意义1、螺旋体(Spirochaeta)广泛分布在自然界和动物体内，分5个属：包柔氏螺旋体属（Borrelia），又名疏螺旋体属，密螺旋体属（Treponema），钩端螺旋体属（Leptospira），脊螺旋体属（Cristispira），螺旋体属（Spirochaeta）。前三属中有引起人患回归热、梅毒、钩端螺旋体病的致病菌，后二属不致病。梅毒螺旋体（TreponemaPallidun）是人类梅毒的病原体，主要经性接触直接传染，也可通过接触污染物、手术、输血等途径传染。患梅毒的孕妇可通过胎盘感染胎儿，致胎儿流产、早产或患先

2、天性梅毒。人体感染梅毒螺旋体后，体内可产生多种抗体（抗类脂质抗体、抗梅毒螺旋体抗体等），其中一类是特异性制动抗体，为lgM，当有补体存在和厌氧条件下，对活螺旋体的动力有抑制作用，并可将螺旋体杀死或溶解，对机体的再感染有保护作用；另一类是反应素，为lgA与lgM的混合物，可与正常生物组织中的类脂抗原发生非特异性结合，对人体无保护作用。用血清学试验检测这些抗体，对诊断梅毒有意义。但梅毒血清学试验阳性，只能提示有反应素或抗梅毒螺旋体抗体存在，不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据，阴性结果也不能排除梅毒螺旋体感染，检测结果应结合临床综合分析。用活的或死的梅毒

3、螺旋体或其他成分作为抗原检查抗梅毒螺旋体抗体这种方法敏感性及特异性都高，用于证实试验，尤其适用晚期梅毒。但血和脑脊液行RPR试验均为阴性者，由于这类方法检测的是抗梅毒螺旋体IgG抗体即使患者已经经过充分的治疗IgG抗体仍保持阳性，所以不能用以观察疗效、复发及再感染。①荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS试验)：用间接免疫荧光法检查血清中抗梅毒螺旋体抗体②梅毒螺旋体抗体微量血凝试验(MHA-TP)：用梅毒螺旋体提取物致敏的红细胞微量血凝分析法检查相应的抗梅毒螺旋体抗体其滴度在1∶80以上则可判定为抗体阳性此试验的特异性与敏感性均高而且方法比FTA-

4、ABS试验简便故应用广泛③梅毒螺旋体制动试验(TPI)：活的梅毒螺旋体加入患者血清在补体参与下梅毒螺旋体活动可受到抑制临床上主要采用RPR和TPHA两种方法检测，RPR的敏感性和特异性均低于TPHA检测。这主要是由于RPR是非特异性试验，受某些自身抗体免疫疾病和传染病的影响，常常会出现假阳性.同时，RPR试验对一期梅毒早期、治疗后梅毒及潜伏性梅毒往往出现假阴性，因此它的敏感性和特异性有一定的局限性，且肉眼判断易受检验者主观因素的影响。而TPHA检测特异性强，灵敏度高，并可实现自动化、标准化，适应大量标本的检测。梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性感染性疾病。

5、梅毒螺旋体可以通过接吻、哺乳、性接触、胎盘或接触有传染性的患者的日常用品等方式而传染。在性传播疾病中，梅毒的患者数相对较低，但由于其病程长，危害性大，早期检出具有一定的意义。获得性梅毒分三期：第一期（初期）梅毒，下疳分泌物中有大量螺旋体，传染性极强；第二期梅毒，梅毒疹及淋巴结中有大量螺旋体；第三期（晚期）梅毒，病灶中螺旋体数量很少。梅毒螺旋体在体外不易培养，至今尚不能在无生命的培养基上生长，也不能用常规方法染色，可通过直接镜检和血清中抗体进行实验室检测。实验室常用的检测方法有：梅毒螺旋体暗视野显微镜检查法，非密螺旋体抗原试验（初筛试验）和梅毒螺旋体抗

6、原试验（确证试验）等，不同的感染阶段应选用不同的检测方法。2、钩端螺旋体病是由钩端螺旋体所致的一种自然疫源性疾病。钩端螺旋体在自然界广泛存在，尤其是在降雨量多的热带国家，它可在淡水、潮湿的土壤、植物和淤泥存活很久，可感染人类、野生动物和家畜（尤其是啮齿目动物）。动物受感染后，大多无症状而呈带菌状态，但钩体可以在肾中长期存在并繁殖，从尿中排菌，污染水源、食物和土壤。人类若接触被钩体污染的水源、食物、土壤，钩体可经皮肤破损处、黏膜表面（譬如眼睛或鼻子）进入人体，引起钩体病，大雨后的洪水有助将细菌在周围环境传播，但一般不会在人与人之间传播。　　疾病潜伏期是

7、2天到4个星期。病情可持续几天到3个星期或更久。征状包括发高烧、严重头痛、冷颤、肌肉疼痛和呕吐，亦可能出现黄疸(眼球和皮肤呈黄色)、红眼、肚痛、腹泻或出疹。如果病人不及早接受治理，可能会出现肾脏损伤、脑膜炎、肝脏功能衰竭和呼吸困难；有些罕见的例子更会导致死亡。二、螺旋体的检验程序（一）梅毒螺旋体检验程序渗出液、皮疹、淋巴结或组织穿刺液等直接镜检镀银染色检查血清学检查暗视野检查图13-1梅毒螺旋体检验程序（二）钩端螺旋体检验程序血液、尿液、脑脊液等直接镜检分离培养动物接种（豚鼠）血清学检查观察发病情况暗视野检查镀银染色检查抽心血显微镜凝集试验等暗视野检

8、查图13-2钩端螺旋体检验程序三、试验目的要求（题前空二格，五号宋体加粗）1．熟悉梅毒螺旋体、钩端螺旋体的形