SNT0456-1995进出口纱线霉斑鉴定方法.pdf

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1、SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准sN/T0456一95进出口纱线霉斑鉴定方法Identificationmethodofmouldspeckonimportandexportyarn1995一09一06发布1996一01一01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布中华人民共和国进出口商品检验行业标准进出口纱线霉斑鉴定方法SN/T0456一95IdentificationmethodofmouldspeckonImportandexportyarn，主肠内容与适用范围本标准规定了进出口纱线霉斑的鉴定方法。本标

2、准适用于进出口棉纱、毛纱、麻纱、化纤纱线、混纺纱线上的霉斑的检验。2仪器和设备2.1显微镜(400^-1000X)。2.2恒温箱(25^280C)o2.3无菌操作台。2.4高压灭菌锅。2.5酒精灯。2.6不锈钢接种针、无菌镊子。2.7烧杯(300^500mL),2.8三角瓶(500^-1000mL),2.9培养平皿，内径9cm,2.10称量皿，内径6.5cm,2.11吸管，1mL,5mL,10mL.3培养垂3.1虎红培养基(RBC)3.11成分葡萄搪(分析纯)10.0g硫酸镁(分析纯)。59磷酸二氢钾(分析纯)1.0g

3、蛋白陈(微生物培养基用)5.0g氯霉素(1mg相当于992单位)0.1g1/3000虎红水溶液100.0mL琼脂15.0g蒸馏水定容至1000.0mL2制备将3.1.1中的葡萄糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白陈、琼脂于800.0mL蒸馏水中加热溶解后，再加入虎红溶液和氯霉素，然后用燕馏水定容至1000.0mL。调节pl-I5.5-6.0,将配制好的培养基装人三角瓶后，在121'C高压灭菌20mine中华人民共和国国家进出口商品检验局1995-09-06批准1996一01一01实施sN/T0456一95注1/3000虎红水溶

4、液的配制取0.033g孟加拉红(虎红)琼脂溶于”.97mL无菌水中3.2马铃薯培养基(PDA)3.2.1成分葡萄糖(分析纯)20.0g去皮马铃薯200.0g琼脂15.0g蒸馏水定容至1000.0ml.3.2.2制备将去皮马铃薯切成小块，先用蒸馏水煮15min,然后用滤布过滤，过滤后加入3.2.1中的葡萄糖和琼脂于800.0mL蒸馏水中，加热溶解后，用蒸馏水定容至1000.0mL.调节pH5.5-6.0.将配制好的培养基装入三角瓶后，在121℃高压灭菌20min.3.3察氏培养基3.3.1成分硝酸钠(分析纯)3.09磷酸

5、氢二钾(分析纯)1.0g硫酸镁(MgSO,·7H,O)(分析纯)0.5g氯化钾(分析纯)0.5g硫酸亚铁(分析纯)0.01g蔗搪30.0g琼脂15.0g蒸馏水定容至1000.0mL13.2制备将3.3.1各成分(除蔗搪外)加热溶解后，加入蔗糖，调节pH6.8^-6.9,将配制好的培养基装入三角瓶后，在121C高压灭菌20min.4试剂4.1无菌水。42列西尔透明剂(镜检用透明剂)甘油(分析纯)120.0mL2%乙酸钾(分析纯)300.0mL无水酒精180.0mL将上述各成分充分混合均匀后备用。注:2%乙酸钾溶液的配制，

6、称取6.0g乙酸钾溶于294.0mL无菌水中20%甘油(镜检用透明剂)甘油(分析纯)20.0mL无菌水100.0mL将上述成分充分混合均匀后备用(此透明剂仅次于列西尔透明剂)。7500酒精量取75mL酒精、100mL无菌水充分混合均匀。0.1%升汞水称取。.1g升汞(氯化汞)充分溶解于100mL无菌水中。样品制备将带有霉斑部位的线体，用无菌剪刀剪取4cm长的短纱。sx/T0456一95‘内产︺L将剪好的样品放入带盖的称量皿内，再放入0.1%升汞水25mL3-5s;立即弃去升汞水。一月卜﹂︺量取25mL75%酒精液放入称

7、量皿(5.2)内1min，立即弃去酒精。只︺用无菌水冲洗样品(5.3)35次。‘d将未带霉斑的纱线按5.1,5.2,5.3,5.4同样方法制备样品作为空白样品对照。6检验步骤6.1用无菌镊子将制备好的样品，分别放在虎红培养基上。6.2将6.1培养平皿放入25-28C恒温箱内培养3-7天。在培养期间要观察菌落生长状态。6.3将6.2培养出的菌落在显微镜上观察，初步鉴定到属。6.4将6.3不同属的菌用无菌接种针，分别接种于马铃薯培养基和察氏培养基上(青霉属、曲霉属接在察氏培养基上)。6.5将6.4培养平皿放入25^28℃恒

8、温箱内培养3-7天，在培养期间要观察菌落生长状态。6.6将6.5培养的单个菌落用无菌接种针挑取菌株放在载玻片上，然后用滴管吸取少许列西尔透明剂或20%甘油，滴入载玻片的菌株上，盖上盖玻片进行镜检，观察菌落的形态特征及细微结构。了检验结果根据6.6菌落形态特征及细微结构结合检索表来确定菌名。附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口