722光栅分光光度计原理及使用方法

722光栅分光光度计原理及使用方法

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时间:2018-09-05

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1、722型光栅分光光度计使用说明(图)1.构造原理一、原理当一束单色光照射待测物质的溶液时,当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时,待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。由于在一定条件下,吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比,即A=KCL所以,在测得吸光度A后,可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。722型分光光度计由光源室、单色器、试样室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成。光源

2、为钨卤素灯,波长范围为330nm~800nm。单色器中的色散元件为光栅,可获得波长范围狭窄的接近于一定波长的单色光。其外部结构如附图所示。722型分光光度计能在可见光谱区域内对样品物质作定性和定量分析,其灵敏度、准确性和选择性都较高,因而在教学、科研和生产上得到广泛使用。 722型分光光度计1.数字显示器     2.吸光度调零旋钮     3.选择开关     4.吸光度调斜率电位器5.浓度旋钮     6.光源室     7.电源开关     8.波长手轮9.波长刻度窗     10.试样架拉手     11.100%T旋钮     12. 0%T旋钮13.灵敏度

3、调节旋钮     14.干燥器2.使用方法(1)预热仪器 将选择开关置于“T”,打开电源开关,使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳,不要连续光照,预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开,使光路切断。(2)选定波长 根据实验要求,转动波长手轮,调至所需要的单色波长。(3)固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下,尽可能采用灵敏度较低的挡,使用时,首先调到“1”挡,灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后,须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度,实验过程中不要再变动。(4)调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮,使数字显示为“00.0”(此时试样室

4、是打开的)。(5)调节T=100% 将盛蒸馏水(或空白溶液,或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,并对准光路,把试样室盖子轻轻盖上,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示正好为“100.0”。(6)吸光度的测定 将选择开关置于“A”,盖上试样室盖子,将空白液置于光路中,调节吸光度调节旋钮,使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内,盖上试样室盖,轻轻拉动试样架拉手,使待测溶液进入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后,打开试样室盖,切断光路。重复上述测定操作1~2次,读取相应的吸光度值,取平均值。(7)浓度的测定 

5、选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。(8)关机 实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架用软纸擦净。3.注意事项(1)为了防止光电管疲劳,不测定时必须将试样室盖打开,使光路切断,以延长光电管的使用寿命。(2)取拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,而不能碰比色皿的光学表面。(3)比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤,也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干,不要擦拭,以免损伤它的光学表面。三、使用方法72

6、2型光栅分光光度计的使用方法(1)操作步骤①在接通电源前,应对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固,接地线通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源。②将灵敏度派或调至“1”档(放六倍率最小)。调彼长调节器至所需波长。③开启电源开关,指示灯亮,选择开关置于“T”,调节透光度“100%”旋钮,使数字显示“100.0”左右,预热20分钟。④打开吸收地暗室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上吸收地盖,将参比溶液置于光路,使光电管受光,调节透光度“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。⑤如果显示不到“100”,则可适当增加

7、电流放大器灵敏度档数,但应尽可能使用低档数,这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须按④重新校正“0”和“100”。⑥按④连续几次调整“00.0”和“100”后,将选择开关置于A,调节吸光度调零旋钮,使数字显示“.000”。然后将待测溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A。⑦浓度C的测量。选择开关由“A”旋至“C”,将标准溶液推入光路,调节浓度旋钮。使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。将待测样品溶液推入光路,即可读出待测样品的浓度值。⑧如果大幅度改变测试波长时,在调整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓

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