人与大猩猩_黑猩猩和猩猩亲缘关系的探讨_丁波

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1、遗传学报,26(6):604一609,1999月e扭6`ne吞ca”icais人与大猩猩、黑猩猩和猩猩亲缘关系的探讨①丁波张亚平(中国科学院昆明动物研究所细胞与分子进化开放研究实验室昆明650223)OliverA.deryR(美国圣地亚哥动物协会,圣地亚哥,CA92112)摘要有关人猿超科的系统发育仍然存在争议。争论焦点在人与大猩猩和黑猩猩哪个关系更近一点。酪氨酸酶是黑色素合成中的关键酶,酪氨酸酶基因的突变将导致白化病。测定了人猿超科中大猩猩、黑猩猩、猩猩和长臂猿酪氨酸酶基因全部1)NA。5个外显子的序列结合已发表人的序列,用简约法构建了基因树。结果表明,人与大猩猩的关系

2、比黑猩猩要近一些。关键词人猿超科,酪氨酸酶基因,系统发育分类号075人猿超科(人、、黑猩猩、猩猩和长臂猿)系统发育关系争论已久。大猩猩基于血清白蛋,白差异Siarch和iWlson在1967年首次提出如果现生人猿超科起源于中新世晚期的某一种形式,。然而其系统发育关系仍未则人和非洲猿有一上新世的共同祖先(约五百万年前)得到解决1[]。isbley和Ahlst用,卿DNA一DNA杂交方法研究表明人和黑猩猩的关系近于人和大猩猩的关系,大猩猩世系在九百三十万年前分化,人和黑猩猩分化于五百九十万年。,。前2[,’]基于标准电泳方法儿gn和lson的研究结果显示人和黑猩猩的关系较近4I

3、]iWDNA序列在人猿超科基因分化时间和分支顺序间题上提供了更加肯定的结论。,、大猩猩关系较近,6.3一8.1百万介珠蛋白基因序列表明人和黑猩猩序列分化时间在。。年之间5I,“]许多灵长类系统发育研究都基于DNA序列分析17一9〕线粒体。NA全序列,,黑猩猩序列和人序列最接近l[o〕此结果与68obP长的con分析表明序列比较分析结果,。一致1[’」9bp长的1rRNA但与4525序列分析结果不一致l2[]根据猩猩和非洲猿分化于一千三百万年前的假设,人/黑猩猩和大猩猩线粒体DNA分化时间估计为6.6百万年,人和黑猩猩为4.9百万年l0[,”,]这一结果暗示这些物种在.49百

4、万年前出现生殖隔离。同样,大猩猩世系分化一定发生在6.6百万年前之后。近年来,有关人与大猿关系的研究,NA,已在国际权威杂志上发表了数十篇文章但多数是基于线粒体D的数据最终对人与大猩猩还是黑猩猩关系更近一点仍没有完全一致的结论。核基因组序列的研究对于澄清该间题是必不可少的。酪氨酸酶(ytornase,114..,isCE181)是一含铜的氧化还原酶催化酪氨酸氧化成多巴199848收,19989一21本文于刃一到一修回、国家自然科学基金中国科学院“九五”重大项目和美国圣地亚哥动物协会基金资助项目①联系人6期丁波等:人与大猩猩、黑猩猩和猩猩亲缘关系的探讨605,,(do进一步将

5、多巴氧化成多巴醒(doputnone)此酶是黑色素合成当中的一个关键aaqP)。,,。酶l[4J人类酪氨酸酶基因包含5个外显子在染色体上位于llql4一q21区长约50kb这。。[]4]一功能性基因的突变将导致白化病目前这一基因的研究已成为一个热点我们查询,,、、、、、nan了eGbk中酪氨酸酶基因数据库截至于1997年1月7日已有人牛犬小鼠金鱼、,、黑猩猩、猩猩和长臂猿的报道,鸡青蛙等物种的序列报道但尚无大猩猩为了进一步探讨人猿超科各物种在核基因中的系统发育关系,我们特选择酪氨酸酶基因进行分析,以提。供核基因又一新的分子证据1材料和方法.、、11样品大猩猩黑猩猩猩猩、长臂

6、猿各一只,取DNA样品,材料全部来自美国圣地亚哥动物协会。1.2PCR扩增我们用了5对引物分别扩增酪氨酸酶基因的5个外显子,引物序列如下:1:一es’I一外显子lL(5’ATGCTCCTG〔汇TGT门TGTA3)H(’5〔丁(汇CAAGAGGAG一`;:5,一一’`一AAGAATG3)外显子22L(ATTGTCTG汀AG〔CGATT(刃A3)2H(5〔汗TC〔!A一`;:’CTGTATTTC丁AAAG3)外显子3L3(’5州GATTTG〔TAGTCCACTTA〔了一3)3H(’5{丁G.3,;4:一T,」丁CAC犯AGTGGCTCTCAACAAATGCATGGTG)外显子拼

7、(’5ATTIG’3)`一一`;5:一4H(5〔丁GAATCTTGTAGATAG〔TA3)外显子LS(’5ACCCAGA(汀(江丁丁TCAA-。`HS5,`[`4〕GAG3)(TAAAT〔汇汇汗CTGATACAAG-C3)同时11,:又设计了对内引物用于外显子的测序引物序列如下:`一z;IH:`一TATGGGGA内引物IL(5ATTTGAGTGCCCCAGAGAAG3)内引物(5。,TGACA’PCR:拜1:NAATGTCTG3)扩增条件如下每50反应体积包括基因组D50gn.,,。5户1dp(4mmol/召I)引

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