6pcr技术的基本操作和应用

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1、“汉水丑生的生物同行”超级群整理校对PCR技术的基本操作和应用本卷整理：【粤】蓝色冰点（庞淇尹广东省吴川市第一中学）2012江苏22.下列事实能体现细胞全能性的是（）“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）A.棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B.单细胞的DNA在体外大量扩增C.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D.小鼠体细胞经诱导培育成小鼠“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【答案】AD【解析】在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。要能产生完整的个体，才能体现全能性。【试题点评】本

2、题考查细胞全能性这一知识点，要求学生能根据细胞全能性的原理，对一些现象进行分析。属于理解层次。2011江苏33．（8分）请回答基因工程方面的有关问题：(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为。②在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学

3、设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame“汉水丑生的生物同行”超级群整理校对“汉水丑生的

4、生物同行”超级群整理校对①第1组：；②第2组：。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。33．（8分）(1)①15/16②三“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对

5、而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上(4)见右图2011北京31.（16分）“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为代）。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthen

6、extdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame“汉水丑生的生物同行”超级群整理校对“汉水丑生的生物同行”超级群整理校对（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除，因为后者产生的会抑制侧芽的生长。（2）为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T代）。（3）为筛选出具有抗盐性状

7、的突变体，需将T代播种在含的培养基上，获得所需个体。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与植株进行杂交，再自交代后统计性状分离比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性。（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是