抗氧化测定和细胞衰老相关

《抗氧化测定和细胞衰老相关》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、一、中药中的抗氧化成分1.黄酮类黄酮类化合物的抗氧化作用主要通过直接捕捉和清除氧自由基来实现，另外其抗氧化活性也与调节和提高体内抗氧化酶活性相关。其抗氧化作用与3,7位羟基密切相关，其化学性质主要是具有还原性和捕获自由基的特性；能与多种金属离子发生络合或静电作用；能与蛋白质结合；具有两亲结构和诸多衍生化反应活性。其中淫羊霍、黄芬、桔皮、雪莲等提取物中分离的黄酮类物质均具有较强的清除自由基能力。2.酚类植物多酚以大量的酚羟基作为氢供体，对多种活性氧具有清除作用，对于氧化酶存在的系统不但可以清除.OH和脂质自由基，还

2、能抑制NO和O2.-反应形成过氧亚硝酸的氧化活性。茶多酚与自由基反应形成比较稳定的半醌自由基，且部分可进一步演化成无毒的聚合物。茶多酚还可激活SOD/CAT/GSH-Px的活性，起到抗氧化，防衰老的功效。具有很强的抗氧化能力。白藜芦醇（Resveratrol，RES）是一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，具有较弱的抗氧化能力。Sgambato等的研究表明白藜芦醇可通过上调活性氧（ROS）清除剂和第二阶段酶的表达发挥抗氧化性能，其中第二阶段酶包含超氧化物歧化酶，过氧化氢酶，谷胱甘肽过氧化物酶，谷胱甘肽还原酶，硒磷

3、酸合成酶2，硫氧还蛋白还原酶和NAD（P）H：醌氧化还原酶1。Robb等发现RES长期作用可诱导线粒体MnSOD的表达和活性。3.皂苷类皂苷类物质对氧自由基本身影响较少，大多能提高体内SODCAT(过氧化氢酶)等抗氧化酶的活性，从而增强机体抗氧化系统功能。皂苷类的抗氧化活性较弱。人参皂苷可显著抑制由乙醇所引起的小鼠肝脏内脂质过氧化反应、抑制脂褐素的形成和堆积。抗氧化性皂苷包括五科皂苷:人参、西洋参、党参、竹节参、三七等此外，Vc是活细胞氧化还原的催化剂，参与体内多种代谢，具有促进体内多种激素合成的作用。Vc具有很

4、强的还原性，捕获自由基的能力极高。富含生物碱类、蛋白质和酶类以及微量元素的一些中草药也有抗氧化作用.石斛的抗氧化作用于其富含微量元素硒有关,硒作为抗氧化酶GSH-Px的活性结构组成部分，通过该酶催化过氧化氢或过氧化脂质的生成及破坏作用，保护细胞膜和DNA。总结：抗氧化性强的物质有Vc和茶多酚；VE和白藜芦醇抗氧化性较弱。locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhic

5、hliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame目前研究较多的中草药抗氧化物：绿茶中的茶多酚、葡萄中的白藜芦醇、姜黄中的姜黄素、蜂胶中的咖啡酸苯乙酯等姜黄素是一种新型的抗氧化剂，可阻止丙酮痊/赖氨酸诱导的氧化应激和DNA损害，并且可抑制丙酮醛诱导的人单核细胞凋亡和活性氧的产生。Priyadarsini等证实，姜黄素分子结构中的酚羟基在姜黄素的抗氧化活性中起决定

6、性的作用。姜黄素及结构类似物通过抗过氧化脂质达到保护生物膜的作用。不仅如此，姜黄素还能抑制自由基介导的脂质过氧化反应，使其主要氧化副产物42羟基壬烯酸-氧化应激诱导剂生成减少，减轻线粒体的氧化还原反应及呼吸功能损害，增加还原型谷胱甘肽含量，减少活性氧产生并抑制蛋白质羟化，从而减轻氧化应激反应及细胞损伤。抗氧化作用机理：1．自由基吸收剂：如酚类抗氧化剂，维生素E，类胡萝卜素。2．氧清除剂：如类胡萝卜素及其衍生物、抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、异抗坏血酸和异抗坏血酸钠等。3．金属离子螯合剂：枸橼酸、EDTA和磷酸衍生物

7、。二、抗氧化活性的评价方法体外评价方法:主要通过测定样品抑制脂类物质氧化的能力和对自由基的清除能力来评价待测物的抗氧化活性。常用的测定方法有:DPPH、TRAP、TOSC等。DPPH(2,2-diphenyt-l-picrylhydrazylradicalscavengingcapacity)方法的原理是，DPPH·是一种稳定的自由基，其乙醇溶液显紫色，抗氧化物质可使其还原，从而颜色变浅，根据吸光度的变化可测得抗氧化剂的活性。通过计算DPPH自由基剩余一半时所需抗氧化剂的浓度(EC50)以及时间(TEC50)反应

8、抗氧化物的活性。DPPH法快速、简单，仅需要一台紫外分光光度计就可以测定，但DPPH方法存在的不足是，当被测物与DPPH紫外吸收有重叠时，将会影响测定结果，比如类胡萝卜素。此外，由于空间位阻决定反应的倾向，小分子化合物由于更易接近自由基而拥有相对较高的抗氧化能力。此外该方法线性范围也相对较窄，而且所有还原剂都能够对DPPH起作用，因此结果并不能完全代表抗氧化能力。此方法在