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时间:2018-08-25
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1、嗜碱性点彩红细胞瑞氏染色后,胞质内出现形态不一的蓝色颗粒(RNA),属于未完全成熟红细胞,颗粒大小不一、多少不等,原因为重金属损伤细胞膜,使嗜碱性物质凝集,或嗜碱性物质变性,或血红蛋白合成中阻断原卟啉与铁结合。见于铅中毒。正常人血涂片中很少见到嗜碱性点彩红细胞(约占1/10000)。其他各类贫血见到点彩红细胞表明骨髓造血旺盛或有紊乱现象。脱落细胞学检测染色是利用细胞中各种结构的生化组成不同,对染料的亲和力不同,而显示不同的颜色,使细胞的形态和结构易于辨认。常用的染色有HE、巴氏及瑞~姬氏染色,其特点如下。1.HE染色:此法染色效果也好,只是胞质色彩不丰富,不能用于观察阴道涂片对雌激素水
2、平测定。优点是操作简易,试剂易配制。2.巴氏染色:此法染色特点是细胞具有多色性,色彩丰富鲜艳,胞内结构清晰,染色效果好,是细胞病理学检查常用的方法,尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响。此法的缺点是操作程序复杂。3.瑞一姬氏染色:此法适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片。血氨测定血氨测定:有两类血氨测定方法。一类为两步法,先从全血中分离出氨,再进行测定,如扩散法(已淘汰)和离子交换树脂法;另一类为一步法,不需从全血中分离出氨直接测定,如酶法和离子选择电极法。(1)直接显色测定法:在床旁取静脉血2ml,以钨酸沉淀蛋白后,用酚-——次氯酸盐显色,参照标准计算氨含量。如严格掌握实验条件
3、,本法分析结果能满足临床要求。(2)谷氨酸脱氢酶速率法:血浆中的氨在足量的α-酮戊二酸和NADPH存在时,经谷氨酸脱氢酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH,NADPH的下降速率与血浆氨浓度成正比。(3)离子交换法:去蛋白血浆标本中的氨先被阳离子交换树脂吸附,再被分离出来,用酚——次氯酸盐显色反应求出氨含量。本法特异性好,精密度和准确度均较高,已被作为血氨测定的参考方法。(4)氨电极法:氨气敏电极选择性较高,故这类方法特异性好、准确度较高,但是耐用性差,而且电极稳定性受温度、渗透压、中介液等多种因素影响。结核分枝杆菌培养特点培养特点为专性需氧、营养要求高、生长缓慢,常用罗氏固体培养基,在固
4、体培养基上培养2~4周后,形成菜花样R型菌落,液体培养基上呈表面生长,形成菌膜。总蛋白定量测定1、原理磺基水杨酸为生物碱试剂,能沉淀蛋白质,但对白蛋白的沉淀能力比球蛋白强,加适量硫酸钠后,沉淀白、球蛋白的能力趋于一致,与标准蛋白浊度对比进行定量测定。2、试剂磺基水杨酸~硫酸钠试剂(SS~S)磺基水杨酸3.0g无水硫酸钠7.0g蒸馏水加至100ml过滤后,储存于棕色瓶中,如显色或混浊则不能用。3、方法(1)制备标准曲线含蛋白200、400、800、1200、1600mg/L的稀释混合人血清标准系列各0.5ml,加SS~S试剂4.5ml,充分混匀,7~15分钟后,用420nm波长比浊,以吸
5、光度为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。(2)样品检测取待测脑脊液标本各0.5ml于两只试管中,其中一只试locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame管加SS~S试剂4.5ml,另一试管加154mmol/L的NaCl溶液4.5m
6、l作为标本空白管。在与标准曲线相同的条件下比浊,所得得吸光度可从标准曲线上求得蛋白质浓度。4、注意事项(1)脑脊液如有多量细胞或混浊,应先离心以除去。如蛋白质浓度过高,应先行用生理盐水稀释后重新测定。(2)加入SS~S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变,勤作标准曲线。5、正常参考值腰穿CSF蛋白含量:0.2~0.4g/L池穿CSF蛋白含量:0.1~0.25g/L侧脑室穿刺CSF蛋白含量:0.05~0.15g/L脑脊液蛋白质含量与年龄成正比,儿童含量较低,成人稍高,老年人又比成年人高。6、临床
7、意义脑脊液蛋白质含量增高,为血脑屏障被破坏的标志。颇受临床工作者的重视。蛋白质含量增高常见于下列情况:(1)中枢神经系统炎症。脑部感染时,脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加,蛋白质分子容易透过,首先是白蛋白增高,随后是球蛋白和纤维蛋白增高。(2)神经根病变。如急性感染性多发性神经炎(Guillain~Barre综合征),多数病例有蛋白质增高,而细胞数正常或接近正常,即蛋白~细胞分离现象。(3)椎管内梗阻。脑与蛛网膜下腔互不相通,血浆蛋白由脊髓中的静
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