tb蛋白芯片检测系统原理

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1、TB蛋白芯片检测系统原理　　大渊蛋白芯片以微孔滤膜为载体，利用微阵列技术将纯化的脂阿拉伯甘露聚糖（LAM），基因工程生产并纯化的结核分枝杆菌蛋白16KDa(rTPA16)和38KDa(rTPA38)三种抗原固相于同一膜片上，在加入病人血清标本后利用微孔滤膜的渗滤、浓缩和凝集作用，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，再以免疫金作为标记物直接在膜上显色。显色后的芯片放入芯片识别仪，在专门软件的支持下对不同点阵的灰度值进行分析。实现了对这三种抗原的抗体进行同步检测，从而对结核菌的感染情况做出诊断。 TB蛋白芯片产品特点          （1）方法简便快速、

2、操作简单。       （2）可进行单人份操作。       （3）敏感性高，特异性强。        （4）采用芯片识别仪进行结果判定，以数据卡校正系统误差。       （5）可以同时检测多项抗体。       （6）提供动态的分析资料，供临床医师参考。 临床意义  　　结核病是当今全球范围对人类最具威胁的感染性疾病之一。据世界卫生组织（WHO）统计，目前全球人口的1/3约20亿人曾经感染过结核分枝杆菌，每年出现大约800万新病例，约300万人死于该病。发展中国家形势尤为严峻，其中95%的新发现结核病人出现在发展中国家。我国的结核病疫情相当严重，

3、患病人数居世界第二位。      脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）       脂阿拉伯甘露聚糖是一种非蛋白结核分枝杆菌抗原，属特异性抗原，具有较强的免疫原性，敏感性31.7%~94%，特异性为78.6%~100%。主要存在于结核菌表面，具有较强的抗原性，能够刺激结核菌感染者产生抗体。而其它分枝杆菌由于表面LAM含量低，不能刺激机体产生高水平的抗体量，故抗-LAM的特异性和敏感性都较高，对活动性肺结核，尤其对痰液涂片阴性及菌阴肺结核的诊断有较好的价值。      38KDa和16KDa蛋白质抗原        38KDa抗原具有强免疫性。这种抗原在区分结核

4、分枝杆菌感染还是非结核分枝杆菌感染方面具有重要的实际价值，重组38KDa抗原与结核分枝杆菌本身合成的38KDa抗原无免疫性差异，其特异性100%，locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame与正常健康

5、人、非结核分枝杆菌感染和麻风无交叉，敏感性为69%，高于结核分枝杆菌培养。38KDa与16KDa联合检测可提高11.1%的敏感性。结核分枝杆菌抗原多而复杂，在宿主体内表达的数量、种类或时机可能随病人的个体免疫背景和病程而异，表现出不同的抗原抗体谱。检测时有的抗原不表达，未检测出相应的抗体；有的抗体含量高，有的则低。因此，多种抗原联合检测，在保证特异性的基础上有助于提高灵敏度，并可用于结核分枝杆菌的自然感染或卡介苗接种后阳转者的区别。 血样的采集和准备　　采取新鲜静脉血或末梢血，分离血清使用，如果实验在采血后3天内不能做，应将其在-20℃保存。需要做时

6、，应使样本恢复至室温。 适应症       （1）用于各级医院对结核菌感染引起的疾病（包括肺结核、肾结核、骨结核、脑结核、皮肤结核等）的辅助诊断。       （2）对疑似结核病患者尤其是排菌阴性者或者其它体征不典型者有较大的提示诊断作用。       （3）适用于各级结核病防治机构对大规模人群的结核菌感染血清流行病学调查和感染者的筛查。 检测抗结核分枝杆菌LAM、16KDa和38KDa抗原之抗体的意义         ·鉴别痰涂片阳性者是否属于结核杆菌感染。         ·提高痰涂片阴性患者的检出率。         ·肺外结核的检测。    

7、     ·痰涂阴性者的早期诊断。         ·可作为判断治疗是否有效的指标。 作者：崔晓利，姚小红，刘春梅，张增贤【摘要】  目的：通过结核菌三种抗原脂阿拉伯甘露糖(LAM)、16KDa、38KDa固相于同一膜片上制作的结核蛋白芯片系统联合检测结核患者血清中的相应抗体，以达到快速诊断结核病的目的。方法：收集西安市结核病胸部肿瘤医院痰涂片或者结核菌培养阳性患者的血清98例，痰涂片或者结核菌培养阴性患者的血清54例，结核性脑炎、结核性胸膜炎患者血清20例，通过结核蛋白芯片系统检测三种抗体，任意一种抗体阳性即为结核抗体阳性。结果：活动性肺结核阳性率

8、86.7%(85/98)，痰涂片阴性的肺结核阳性率66.7%(36/54)，结核性脑炎、结核性胸膜炎阳性率4