hiv-1p24抗原elisa试剂盒说明书

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1、人类免疫缺陷病毒1型p24抗原酶联免疫试剂盒说明书【产品名称】通用名：人类免疫缺陷病毒1型p24抗原酶联免疫试剂盒英文名：ENZYMEIMMUNOASSAYFORDETECTIONOFHUMANIMMUNODEFICIENCYVIRUSTYPEIP24ANTIGENINHUMANSERUM,PLASMAANDCELLCULTURESUPERNATANT【包装规格】96人份/盒。【预期用途】本试剂盒用于人类免疫缺陷病毒1型p24抗原（HumanImmunodeficiencyVirusType1p24Antigen）

2、的定量检测，适用于人血清（或血浆）及细胞培养上清液等标本，仅供研究使用。【检验原理】本产品采用固相酶联免疫吸附分析法（Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，ELISA）检测人血清（或血浆）中的游离HIV-1p24抗原和细胞培养上清液等标本中的HIV-1p24抗原。本分析方法是基于双抗体夹心的非竞争性免疫分析。校准品和样品中HIV-1p24抗原与固相抗-p24单克隆抗体和生物素标记的抗-p24多克隆抗体通过免疫反应，形成固相抗-p24单克隆抗体—p24抗原—抗-p24多克隆抗体-生物素复合物

3、；温育后洗涤，洗去非特异或多余的抗原和多余的生物素标记的抗-p24多克隆抗体；然后加入HRP（HorseradishPeroxidase，辣根过氧化物酶）标记的链亲和素，形成固相抗-p24单克隆抗体—p24抗原—抗-p24多克隆抗体-生物素—链亲和素-HRP复合物；温育后洗涤，洗去多余的HRP标记的链亲和素。加入TMB-H2O2底物溶液，HRP催化H2O2氧化TMB生成蓝色的产物（最大吸收峰655nm），加入终止液终止酶催化反应，生成黄色产物（最大吸收峰450nm）。其吸光度与校准品和样品中的HIV-1p24抗原浓

4、度成正相关。通过剂量－反应曲线可得出样品中HIV-1p24抗原浓度。试验类型温育时间试验所需时间试验温度试验所需样本体积免疫度量分析120分钟大约150分钟37°C和室温（18~30℃）75μL反应原理图：MicrowellBiotinylatedrabbitanti-HIV-1p24antibodiesMouseanti-HIV-1p24antibodiesSampleHIV-1p24AntigenHRPConjugatedStreptavidinAbsorbanceSignalReagent【主要组成成份】1.

5、抗体包被板（AntibodyCoatedMicroplate）1块包被有鼠抗-HIV-1p24单克隆抗体的聚苯乙烯微孔板，约200ng/孔。8孔×12条。铝箔袋密封包装，含干燥剂。标签编号为R1。2.HIV-1p24抗原校准品（HIV-1p24AntigenCalibrator）1mL×1支重组HIV-1p24抗原溶液，200IU/mL（约相当于4,000pg/mL），稀释液为校准品稀释液。用英国国家生物标准与检定所(NationalInstituteforBiologicalStandardsandControl

6、,NIBSC)提供的WHO标准品（HIV-1p24Antigen90/636）校准。绿色PP盖子和无色PP塑料管。标签编号为R2。3.校准品稀释液（CalibratorDiluent）20mL×1瓶磷酸盐缓冲液，含动物血清和钙化的正常人血浆（经ELISA检测，HBsAg、抗-HCV和抗-HIV1+2均为阴性），pH约7.3。防腐剂为NaN3（不超过0.1%）和EDTA。绿色PP盖子和无色HPDE塑料瓶。标签编号为R3。4.生物素标记抗体（BiotinylatedAntibody）5mL×1瓶生物素标记的兔抗-HIV

7、-1p24多克隆抗体，约4µg/mL。缓冲液为Tris-HCl，含动物血清、稳定剂、表面活性剂和绿色染料，pH约7.4。防腐剂为NaN3（不超过0.1%）。蓝色PP盖子和无色HPDE塑料瓶。标签编号为R4。5.HRP标记链亲和素（HRPConjugatedStreptavidin）20mL×1瓶HRP标记链亲和素，约0.1µg/mL（25mU/mLHRP）。缓冲液为Tris-HCl，含动物血清、稳定剂、表面活性剂和红色染料，pH约7.4。防腐剂为ProClin®300（不超过1%）。红色PP盖子和棕色HPDE塑料瓶

8、。标签编号为R5。6.浓缩洗涤液（ConcentratedWashBuffer）50mL×1瓶含表面活性剂的磷酸盐缓冲液，20倍浓缩。防腐剂为ProClin®300（不超过1%）。无色PP盖子和无色HPDE塑料瓶。标签编号为R6。1.底物缓冲液（SubstrateBuffer）10mL×1瓶含H2O2的乙酸盐缓冲液，pH约5.0。无色PP盖子和无色HPDE塑