752紫外可见分光光度计使用方法

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1、752紫外可见分光光度计一、仪器的工作原理分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。τ=I/IologI/Io=KCLA=KCL从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。二、仪器的安装、使用、安装1仪器在安装使用前应

2、对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。2仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。使用：仪器使用前需开机预热30min。本仪器键盘共有4个键，分别为；1A/τ/C/F1SD2▽／0％3∆／100％4A/τ/C/F键：每按此键来切换A、τ、C、F之间的值。A——吸光度（Absorbance）T——透射比（Trans）C——浓度（conc）F——斜率（Factor）(2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置）5SD键：该键具有2个功能a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据

3、，仪器发向计算机）。b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C值（C=F*A）。6▽／0％键：该键具有2个功能a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。7∆／100％键；该键具有2个功能a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1

4、会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。例如：设置斜率为1500。方法一T）按A／τ／C／F键切换到F状态。b）如果当前F值为1000，则按∆／100%键，直到F值为1500。C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。方法二a）按A／τ／C／F键切换到F状态。b）如果当前的F值为1000，则按∆／100%键，直到F值为1500、再按A／τ／C／F键切换到C状态，假如所测的A值为0.224，则此时显示C值为0351。722型分光光度计一、测量原理分光光

5、度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc（a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L•mol-1•cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。T(透光率)=I/I0A(吸光度)=-lgT或A=K•C•L(比色皿的厚度)测定时，入射光I,吸

6、光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。 二、722型分光光度计的使用1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）。2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为000.0。（调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（

7、增加灵敏度的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。三、吸光度“A”的测量将选择开关置于A。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。四、浓度c的测量将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。注意事项：1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最

8、低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关