细胞化学染色ppt课件

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1、过碘酸-雪夫反应periodicacid-ScheffreactionPAS原理过碘酸是氧化剂，能使含有乙二醇基的多糖类物质（糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白及糖脂等）氧化，形成双醛基。醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，使无色品红变成紫红色化合物，定位于多糖类的细胞内。乙二醇基双醛基过碘酸氧化血夫试剂中的无色品红紫红色化合物粒细胞系统分化差的原始粒细胞阴性，分化好的原始粒细胞至中性分叶粒细胞呈阳性，随着细胞成熟阳性增强。嗜酸性粒细胞颗粒本身不着色，颗粒间胞质红色，是碱性粒细胞反之。正常细胞的染色反应红细胞系统：阴性单核细胞系统

2、：分化差的原始单核阴性，其它阳性。淋巴细胞系统：大多数阴性，少数阳性（阳性率常<20%）巨核细胞系统：巨核细胞和血小板呈阳性，阳性反应程度随成熟增强。其他细胞：少数浆细胞阳性，巨噬细胞可呈阳性。1.红细胞系统疾病：红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中有核红细胞呈阳性。缺铁性贫血、地中海贫血、巨幼细胞性贫血、再障有核红细胞呈阴性。临床意义2.白细胞系统疾病：主要用于辅助鉴别急性白血病的细胞类型。急性巨核细胞白血病：部分巨核细胞呈阳性，呈粗颗粒状、小块状、或弥散分布。急性粒细胞白血病:部分原始粒细胞呈阳性，呈细颗粒状或弥散

3、分布急性淋巴细胞白血病粗颗粒状或小块状急性单核细胞白血病有时胞质边缘颗粒较粗大慢性淋巴细胞白血病时淋巴细胞阳性率增加，呈粗颗粒状或小块状戈谢细胞呈阳性，尼曼-皮克细胞呈阴性。RS细胞阴性或弱阳性，骨髓转移性腺癌呈强阳性。酯酶染色分为特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色特异性酯酶染色：氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色。非特异性酯酶染色：酸性非特异性酯酶染色（酸性ɑ-醋酸萘酚酯酶染色）、碱性非特异性酯酶染色（ɑ-丁酸萘酚酯酶）和中性非特异性酯酶染色（ɑ-醋酸萘酚酯酶染色、醋酸AS-D萘酚酯酶染色）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色napht

4、holAS-DchloroacetateesteraseNAS-DCE原理血细胞内的氯乙酸AS-D萘酚酯酶水解基质液中的氯乙酸AS-D萘酚，产生AS-D萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞内酶所在部位。本实验常用重氮盐为坚牢紫酱GBC，形成有色沉淀为红色。原理：氯乙酸AS-DAS-D萘酚萘酚氯乙酸AS-D萘酚酯酶监牢紫酱GBC不溶性沉淀正常血细胞染色粒细胞系统分化差的原始粒细胞阴性，分化好的原始粒细胞至成熟粒细胞呈阳性。嗜酸性粒细胞呈阴性或弱阳性，嗜碱性粒细胞呈阳性。单核细胞系统:绝大多数为

5、阴性，仅个别单核细胞系统细胞呈弱阳性。其他细胞：如淋巴细胞、浆细胞、巨核细胞、有核红细胞、血小板等均呈阴性，肥大细胞阳性。临床意义主要用于辅助鉴别诊断急性白血病细胞的类型，是急性白血病的常规细胞化学染色。1.急性粒细胞白血病时原始粒细胞呈阴性或阳性，所以染色结果为阴性者不能排除急粒的可能。2.急性早幼粒细胞白血病早幼粒细胞呈强阳性。3.急性单核细胞白血病时原始单核细胞及幼稚单核细胞几乎均呈阴性，个别弱阳性。4.急性粒-单核细胞白血病时原始粒细胞及早幼粒细胞呈阳性，原始单核细胞及幼稚单核细胞呈阴性。5.急性淋巴细胞白血病和

6、急性巨核细胞白血病均呈阴性应用评价NAS-DCE是粒细胞的特异酯酶，它是急性白血病形态分型时常规做的细胞化学染色，尤其有助于POX染色阳性的急粒急单的鉴别。该实验敏感性较POX低，如有一定数量白血病细胞NAS-DCE染色呈阳性，可以肯定其中粒系成分的存在，阴性则不能排除有粒系成分的可能。ɑ-醋酸萘酚酯酶染色ɑ-naphtholacetateesteraseɑ-NAE原理ɑ-醋酸萘酚酯酶存在于单核细胞、粒系细胞和淋巴细胞中，是一种中性非特异性酯酶。血细胞内的ɑ-NAE在PH中性条件下，水解基质中的ɑ-醋酸萘酚释放出ɑ-萘酚

7、，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性有色沉淀，定位于细胞内酯酶所在部位。单核细胞系统可被氟化钠抑制，所以做ɑ-NAE时，需要同时做氟化钠抑制试验。ɑ醋酸萘酚ɑ萘酚ɑ醋酸萘酚酯酶水解重氮盐不溶性有色沉淀正常血细胞染色单核细胞系统：分化差的原始单核细胞呈阳性，分化好的原始单核细胞呈阳性，幼稚单核及单核细胞呈阳性，可被氟化钠抑制。所谓抑制是指氟化钠实验的抑制率大于50%。抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分氟化钠抑制率=前抑制阳性率或阳性积分粒细胞系统：阴性或阳性，但不能被氟化钠抑制。淋巴细胞系统：多属阴性，少数弱

8、阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。其他细胞：巨核细胞和血小板呈阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制；少数有核红细胞呈弱阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。临床意义主要用于辅助鉴别急性白血病的类型：1.急性单核细胞白血病中的细胞大多数呈阳性且较强，阳性反应能被氟化钠抑制。2.急性粒细胞白血病中的原始粒细胞呈阴性或阳性，阳性反应不能