硕士研究生毕业论文答辩

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1、南昌大学医学院硕士研究生毕业论文答辩会www.themegallery.comLOGO欢迎各位专家光临指导研究生严青春导师熊小亮副教授专业病理学与病理生理学研究方向肿瘤病理www.themegallery.comLOGONF-κB抑制剂PDTC对TRAIL诱导人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞凋亡的影响EffectofNF-κBinhibitorPDTCinTRAILinducedBurkitt’slymphomaRajicellsapoptosis目录材料方法结果讨论结论引言www.themegallery.comLOG

2、O引言www.themegallery.comLOGO肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体[tumorsnecrosisfactor(TNF)-relatedapotosis–inducingligand,TRAIL]，是新发现的肿瘤坏死因子TNF家族成员，它能够选择性地诱导多种肿瘤细胞凋亡，但不影响正常体细胞的生长分化，故而应用重组TRAIL进行肿瘤治疗已引起人们极大的兴趣。www.themegallery.comLOGO重组TRAIL能诱导多种白血病、肺癌、胃癌等细胞株凋亡，并且呈时间和剂量依赖性。但是后来的研究发现，部分肿瘤细胞对

3、TRAIL诱导的凋亡作用并不敏感，且TRAIL重复作用会导致某些敏感细胞对TRAIL产生获得性抗性，这与TRAIL介导的复杂的生物学功能有关。www.themegallery.comLOGOTRAIL蛋白广泛表达于人体组织TRAIL的受体结合区与Fas同源性高达23.2％有五个受体：TRAILR1（DR4）、TRAILR2（DR5）、TRAIL-R3（DcR1）、TRAIL-R4（DcR2）、OPG。包括胞外区、跨膜区及胞内区三个部分由281个氨基酸残基组成的分子量约为32.5kD的Ⅱ型跨膜糖蛋白TRAILwww.themega

4、llery.comLOGOTRAIL胞内信号传导www.themegallery.comLOGO核转录因子κB(nuclearfactor-kappaB）与Rel家族有较强的同源性，所以又称为Rel/NF-κB家族有多个成员如：Rel(p65）、RelB、C-Rel、NF-κB1(p50)、NF-κB2(p52)等静息状态通常与其抑制物IκB结合成三聚体存在于胞浆中。在刺激因子作用下，NF-κB二聚体释放并发生核易位。除与机体的免疫应答、炎症反应密切相关外，还可调控细胞增殖和凋亡相关基因参与肿瘤的生长调控。NF-κBNF-κB在

5、TRAIL凋亡信号传导过程中的作用Shetty等认为NF-κB在TRAIL凋亡信号传导过程中具有协同作用，促进细胞发生凋亡.NF-κB在TRAIL凋亡信号传导过程中的作用Tafuku等则认为NF-κB主要参与拮抗TRAIL的诱导凋亡作用，NF-κB的激活正是EBV阳性淋巴瘤对TRAIL不敏感的原因。www.themegallery.comLOGO本课题研究内容预实验MTTTUNELWestern预实验确定TRAIL及PDTC使用浓度MTT检测不同浓度TRAIL、PDTC单独及联用时对Raji细胞的生长抑制率TUNEL检测TRAI

6、、PDTC单独及联用时Raji细胞凋亡情况观察不同浓度TRAIL、PDTC单独及联用时DR4、DR5、及核内NF-κB的表达吡咯二硫代氨基甲酸盐（PDTC）为NF-κ特异性抑制剂www.themegallery.comLOGO材料www.themegallery.comLOGOwww.themegallery.comLOGOTUNEL试剂盒核蛋白抽提试剂盒、PMSF、EDTADMEM粉剂、FBS、PMSGHCGwesternblotting相关试剂、硝酸纤维素膜、超敏发光液主要试剂人重组TRAIL蛋白吡咯二硫代氨基甲酸盐（PDT

7、C）www.themegallery.comLOGO细胞株EBV阳性的人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞购自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。www.themegallery.comLOGO方法www.themegallery.comLOGORaji细胞，用含l0％灭活小牛血清的RPMI-1640培养液，在常规5％CO2，37℃饱和湿度下培养，3d传代1次。取对数生长期细胞用于实验。一、细胞培养www.themegallery.comLOGO二、实验分组1.细胞对照组2.TRAIL（100ng/ml）组3.TRAIL（1

8、0ng/ml）组4.TRAIL（1ng/ml）组5.TRAIL（1ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）组6.TRAIL（10ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）组7.TRAIL（100ng/ml）及PDTC（100μmol/ml）组8.PDT