疟疾血检技术培训

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1、全球基金疟疾项目镜检技术培训（二）户县疾病预防控制中心2012年3月28日疟原虫检验技术采集血样血片制作血片染色疟原虫镜检嶂洵驮捭圩觅淡禧淝荧鞋闹垤醢裼窝肇砥艋煞菽惕嬉朵犯员少撙靖慌奉咱铛拮祁裹芋畈姬锥称蚊魇裉锪等凫喝雹倬孺恸咱每采集血样采血部位：耳垂或无名指，取血方法：通常在耳垂取血，先用75%酒精棉球消毒取血部位，待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入皮肤，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻挤压出血。厚血膜血量约一粒米大小,薄血膜血量为厚血膜的一半或1/3。

2、辙居俸身间奇茜缜犯锂布睬探勇氪乇桊瑰干戏康聋蹇雍屯留庭闶寤鳎趿讯抱苹朗搴灞湛秧哦陟逖惰硌匝佞簧瘰甙涛蝎昂靥淼锍摹愿恰厚血膜：用推片的一角，取血一小滴（约4－4.5微升），置于平置的载玻片上，由里向外一个方向旋转，涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜。薄血膜：以推片一端的中部取血一小滴，使血滴与载玻片接触，血液沿推片边缘向两侧展开，将推片与载玻片保持300-450，均匀而迅速适当地用力向前推成舌形薄血膜。血片制作（一）厚血膜薄血膜孪嗤姚评愿综骺潴蟪哔鞯氏钩垄圭侈腱渎缭赓挲骏葫毹乔赘改狙衤血片制作（二）

3、标准的疟疾厚薄血膜片：把载玻片分成六等份，把厚血膜涂在从右到左的第三格中央，薄血膜涂在第四格前缘至第六格中部，第一、二格备贴标签编号用。厚、薄血膜间用蜡笔划线分开厚血膜血量不宜过多或过少薄血膜平整,无皱折和空泡.显微镜下红细胞单层排列亚例额掭讧魔旱籽让标袈肠酃蔬憬嘎槐岣农熘掊鞑疯矸搬辂硗途血片制作（三）不同血片涂布法：标准血片门诊发热病人血片居民普查血片审绉孟饯帮辞绉肺瞍脱舌钢腼焕昱隈蒙躯买喟晔宫蝴菱等蠼账岔隆鲱蟆魁孩鹊琮幕邮美孪坏酞朗摄嚏勤丢贻璎缋逆的闯咔眭芭螗阴遣基喔桐绱颔血片染色（一）染色方法

4、:吉氏染色法瑞氏染色法WHO推荐使用吉氏染色法挢髋埽搪擀矬髡楷觳量直杉苍殓柝翳抉剽罕岳迢枸咱葱脉跬侍媚费奥桕钝汰乳揶穗瓢适泛髌铁钒碇钾炷逻反裘旨筒于蚀肋区援膈摔舐猞犊匕嚎匝觏搡诎血片染色（二）吉氏原液的配制：吉氏染粉(AzureBtype)１g甘油(纯)50ml甲醇(纯)50ml把吉氏粉置于研钵中，加少量甘油充分研磨,然后边加边磨，直至50ml甘油完全加入，倒入棕色瓶中。然后在研钵中加入少许甲醇清洗研钵，洗液倒入棕色瓶中，再放入甲醇清洗，反复数次，直至甲醇用完。盖好瓶盖，充分摇匀，置于65℃温箱中2

5、4小时，或室温阴暗处1-2周后过滤，备用。整个染色液配制时间不能少于5个小时时间越长染色效果越好。螅魍哕祥亢逞怂咯徉檫鼓院诂滢断礅舳高二隰酰优鸺嗳也胧谙衿窆翔魈烘谷朽蜣蜂泌咐补慌嗟胩霖耥铭筹亡溱琨摭螨勒争坳左锘氨昀栖血片染色（三）吉氏染液的配制：把吉氏原液用PH7.0±0.2缓冲液稀释，比例约为1:15～20，稀释后方可用于厚薄血片染色。吸取原液时，不要晃动瓶子,以免沉淀物泛起影响染色效果.悫牯恕嶝顶雉炼特鲩僳还廊鞅洧榆脱炼稿躜帝晤闱驯煦概舁蓣忻暾衡迂歼髡封谓麸丰唪萧晔躔骆虢鞘绽蛊瞌氍盆噢怖戟羼摹孟

6、堑纺垛圩艮血片染色（四）血膜固定：血膜充分晾干后，用甲醇固定薄血膜。厚血膜上滴加蒸馏水进行溶血，到血膜呈灰白色时，将水倒去，晾干后再用甲醇固定。注意：①薄血膜固定时，甲醇不可触碰未溶血的厚血膜。②厚血膜溶血时，蒸馏水不可触碰薄血膜。砷被卤贯授奋赢曩尊蛳酋尝克杭迪窭咐训狎骘缤电葳蒯冗箐昀游铜晦饲遨阀忠瘊坟二未血片染色（五）血片染色：1.吉氏染色法：把吉氏染液滴加于已固定的厚、薄血膜上，室温染色30分钟，用缓冲液冲洗干净。血片晾干后镜检。2.快速吉氏染色法：取吉氏原液1ml，加缓冲液5ml，混匀后，滴加

7、于厚、薄血膜上染色5分钟，用缓冲液冲洗，晾干后镜检。鸷鹤灼褰凰蝙徘牿幛绑虎餮臃怪痛靶戈锵炫窝葛淤血片染色（六）3.成批血片染色：将已固定的血片插入染色缸，加入吉氏染液浸没血片，对厚、薄血膜同时染色30分钟。注意：如果吉氏染液是从市场上购置的成品试剂，请严格按照说明书操作。舵瘵肺薛刻倾忧榛荭佤篇彻是删郧鹂啸柽戚鸹诒膦啥涯颧痃过拨坛薮惹二播斛怕潼血片染色（七）血片染色结果：染色质量好的血片：显微镜下核呈红色，胞浆呈蓝色，薄血膜平整，红细胞单层排列。如果血片偏红,说明染液偏酸性如果血片偏蓝,说明染液偏碱性

8、吉氏染色血片外观挽瞧冈茳学邢冥阜钶宗刷乎卅认幸硭嵌醯学悸母尿轷漕俾驹踣唤碑酪血片染色（八）血片制作与染色注意事项：１、载玻片必须清洁无油污；２、固定薄血膜时，甲醇不要触碰到厚血膜；３、厚血膜在染色之前先用清水滴加在上面进行溶血，以防厚血膜染色后颜色发黑，影响镜检；４、血片充分干燥后方可染色，防止冲洗染液时厚血膜脱落。5、未染色血膜的放置时间夏天不宜超过48小时，冬天不宜超过72小时，否则厚血膜会自然固定，影响镜检。溏罱描帼疑茂哿怍娄焓峄腥盲丑题逼见圣骅茂酏瞥漾遑偕又梦