食品卫生与毒理学实验教程

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1、食品卫生与毒理学实验教程宜宾学院2010-2011学年度下期08级4班食品科学与工程专业项目序号实验项目名称计划学时实验教学执行单位执行实验室开课时间1实验动物一般操作技术2发酵资源与应用四川省高校重点实验室毒理实验室第十一周周日2－3节2经口急性毒性实验4发酵资源与应用四川省高校重点实验室毒理实验室第十二周周日1－4节3皮肤刺激实验4发酵资源与应用四川省高校重点实验室毒理实验室第十三周周日1－4节实验分组：六小组，每组7～8人实验一实验动物一般操作技术一、实验目的掌握实验动物体表检查、动物抓取和固定、性别鉴定、编号标记、随机分组

2、、染毒、处死和解剖等技术。二、实验器材共用：透明胶带1卷、：3％苦味酸溶液（100mL试剂瓶）、0.5％品红溶液（100mL试剂瓶）、棉签1包（100支）、创可贴（20个）、标签纸5大张、灭菌生理盐水（100mL）1瓶、每组：长镊子1支、医用手套2双、记号笔1支、玻璃注射器（1mL）1支、灌胃针1支、烧杯（50mL）1个、眼科剪1把、75％酒精（200mL）1瓶、一次性注射器（1mL，4号针头）1支受试动物：小白鼠三、实验内容与步骤（一）实验动物的体表检查1、发育状态：体格发育是否与年龄、品种相称，各部发育比例是否正常，有无畸形。

3、2、营养状态：丰满还是消瘦，检查时可用手抚摸实验动物背、腰部，营养良好时，背腰部厚实，皮肤弹性好。营养不良时，背腰部椎骨突出，肋骨明显。3、精神状态：实验动物的自主活动、运动情况，对外界的反应（迟钝或亢进）、步态如何。4、感觉器官：眼睛的瞳孔是否清晰等，有无分泌物，眼睑有无发炎及红肿，球结膜颜色变化，有否潮红、苍白、黄染或发绀。5、呼吸系统：呼吸动物如呼吸次数、节律、有无呼吸困难；上呼吸道检查如鼻腔分泌物多少、有无喷嚏和咳嗽；必要时可通过听诊检查肺部。6、消化系统：采食与饮水观察，包括食欲废绝、减退、亢进和异嗜，口腔黏膜颜色和气味

4、。有无呕吐、腹泻、便秘，肛周有无污物，粪便数量、硬度、颜色、气味等。7、被毛和皮肤：检查皮肤颜色、温度、弹性、有无创伤、脓疡、疥癣、湿疹，毛发色泽、疏密、有无脱落。（二）动物的抓取和固定1、小白鼠（1）抓取　双手法：用长镊子夹住鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，右手提起鼠尾，向后上方轻拉，小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。此时迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿(图1)。单手法：小白鼠置于笼盖上，先用左手食指与拇指抓住鼠尾，手掌尺侧及小指夹住尾根部，然后用左手拇指与食指

5、捏住颈部皮肤。（2）固定（完全固定法）：四肢固定在固定台上，头部上腭切齿用线绳固定（图2）。2、兔（1）抓取：用右手抓住颈背部皮肤(抓的面积越大，其吃重点越分散)，将兔提起，以左手托住其臀部或腹部，让其体重重量大部分集中在左手(图3)。不应采用抓取双耳或抓提胯部的方法。（2）固定：徒手固定（经口给药）：固定人员坐椅子上，一手抓兔颈部皮肤，同时捏住两耳，不让头动；一手抓住两后肢夹大腿之间，大腿夹住兔子下半身，用空着的手抓住两前肢。台式固定（手术）：四肢用粗棉线固定，头用家兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿后再固定在家兔台头端柱子上（

6、图4）。（三）实验动物的性别鉴定较大动物：如家兔、猫、犬等，可以从生殖器分辨其性别，较小动物：小白鼠、大白鼠、豚鼠等，通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断，距离近者为雌性♀，距离远者为雄性♂，成年雄鼠卧位可见睾丸，雌性腹部可见乳头（图5）。（四）动物的编号标记1、染色法：小鼠（1）、染料：黄色：3％～5％苦味酸溶液红色：0.5％中性红或品红溶液（2）、染色方法与原则：棉签蘸取染料，在动物体表不同部位涂上斑点，以示不同号码。（按性别编号）；先左后右，从上到下；最大编号为10时不标注10号；编号大于10时，黄色作为个位数，红色作为十位数

7、（图6）。2、剪毛法：家兔用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码，此法编号清楚可靠，但只适于短期观察。（五）实验动物随机分组方法（随机数字表法）实验动物按性别编号后，利用统计学的随机数字表，按完全随机分组法分组，小鼠称重，同次实验小鼠体重相差不超过4g，必要时可将实验动物适当调组，以使同一批次实验动物体重变异范围不超过平均体重的20％。60只小鼠（雌雄各半），随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ六组，每组10只（雌雄各半），雌雄小鼠分别随机分组。动物按性别依次编号后，任意从随机数字表的某一行某一列数字开始抄录30个数字，将各数除以6，以余数1

8、、2、3、4、5、6分别代表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ六组，若某组动物数多于6只，再从随机表中按斜角线抄录一数字，除以该组小鼠数量，余数为N，就把该组第N个动物归入动物数少于6只的组别。以此调整，直至所有组动物数相等为止。（六）实验动物染毒方法1、灌胃