鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属物种的生化和分子标记研究-生物化学与分子生物学专业论文

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1、优秀毕业论文四川农业大学硕士学位论文鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属物种的生化和分子标记研究姓名：张颖申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：周永红;张利20040501精品参考文献资料优秀毕业论文摘要鹅观草属RoegneriaC．Koch、披碱草属ElymusL．、猬草属HystrixMoench和仲彬草属KengyiliaYenetYang是禾本科Poaceae小麦族TnticeaeDumortier四个重要多年生属。许多物种是优良的牧草；有些种类还具有麦类作物抗病、抗虫和抗逆等优良特性，是麦类作物育种非常宝贵的种质资源。然而在这四个属的分类地位、系统亲缘关系和物种划分

2、上存在着极大的分歧，一直是禾草学家争论的焦点。本研究旨在：(1)通过醇溶蛋白、随机扩增微卫星多态性(RAMP)和细胞质基因组PCR-RFLP等三种生化和分子标记，探讨鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属的属间变异和亲缘关系，从而评价其系统地位；(2)评价醇溶蛋白、RAMP和PCR．RFLP等标记在多年生小麦族属、种的系统与分类学研究中的应用前景，为小麦族系统学研究积累资料。主要结果如下：1．应用酸性聚丙烯胺凝胶电泳(A．PAGE)对鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属19个物种进行了醇溶蛋白电泳分析，结果表明：属间醇溶蛋白谱带变异大于属内种间变异，同一属物种的醇溶谱带的相似程度大于不同属物种

3、间的谱带：物种间的醇溶蛋白带纹在数量、着色深浅和迁移率等方面具有明显差异，多态性较高。聚类分析显示供试鹅观草属、披碱草属和仲彬草属物种各自聚类在一起，猬草属模式种Hpatula与披碱草物种聚为一类，Hduthiei和Hduthieissp．10ngearistata单独聚类。醇溶蛋白标记的结果表明鹅观草属、披碱草属和仲彬草属分别作为属分类等级处理是恰当的，猬草属的系统地位还有待于进一步的研究。因此，醇溶蛋白图谱差异可以作为一项指标而在多年生小麦族植物的生物系统学研究中加以利用。2．对鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属23个物种进行了RAMP分析。结果表明属间变异极大，多态性极高。31个引物

4、组合产生的286条DNA扩增片段均具有多态性。聚类分析显示鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属物种各自聚为～类；Roegneriaalashanica、R，elytrigioides和R．magnicaespes聚类在一起：猖草属的模式种Hpatula与披碱草属物种聚类在一起，而Hystrixduthiei和爿：duthieissp．10ngear括tata单独聚为一类；形态相似、染色体组相同、地理分布一致的物种聚类在一起。本研究结果基本上同形态学和细胞学研究结果相吻合，将鹅观草属、披碱草属和仲彬草属作为属分类等级处理比较恰当，而猬苹属的系统地位有待进一步确认。RAMP标记可作为评价多年生小

5、麦族属物种的遗传多样性和亲缘关系的一种分子标记技术。3．应用PCR-RFLP技术对鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属23个物种和精品参考文献资料优秀毕业论文1份外类群共24份材料细胞质基因组DNA进行遗传变异分析。利用3个叶绿体和3个线粒体通用引物扩增出片段，然后用15种限制性内切酶对其进行酶切，共获得356条DNA片段，其中321条具有多态性，占90．2％。结果表明鹅观草属、披碱草属、猬草属和仲彬草属材料存在属间多态性和种问多态性，遗传相似系数较高。仲彬草属单独聚为一类，鹅观草属R．grandis、R．aristiglumis、R．elytrigioids、R．alashanica、Rm

6、agnicaespes聚为一类，R．caucasica、R。ciliaris、R．amurensis、R．japonens缸聚在一起。这些结果与醇溶蛋白标记、RAMP分析的结果基本一致。但不一致的是5个披碱草属材料、3个猬草属材料和1个鹅观草属物种史妇moj／聚在一起，其原因可能有：(1)细胞质基因组的遗传方式为单亲遗传，保守性强：(2)调查的基因组的区域较小和与选用的限制性内切酶较少有关。通过更多的叶绿体和线粒体基因组编码和非编码序列，并选用更多的限制性内切酶，细胞质基因组PCR—RFLP分析将会为多年生小麦族系统学研究积累更多的资料。总之，在评价小麦族属的系统地位和亲缘关系时，应综合地利

7、用形态学、生态地理学、细胞学和分子生物学等方面的研究结果，才能作出更准确、更趋于自然的分类系统。关键词：小麦族；鹅观草属：披碱草属：猬草属；仲彬草属；醇溶蛋白；RAMPPCR．RFLP：染色体组；系统地位；亲缘关系。2精品参考文献资料优秀毕业论文1前言小麦族TriticeaeDumortier是禾本科Poaceae植物中非常重要的一个类群。该族植物既包括了世界上重要的一年生粮食作物和工业用作物，如小麦Trit