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《抗瘟丽江新团黑谷稻瘟病菌致病性分化情况研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
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3、病水稻品种通常种植数年后极易丧失抗性。水稻品种丧失抗病性的主要原因是稻瘟病菌生理小种的变化以及新生理小种的出现和积累,因此,了解田间稻瘟病菌生理小种的变化动态和潜在致病小种的发展趋势,是水稻抗瘟性品种选育、新品种推广、品种合理布局和稻瘟病防治的重要课题,也是水稻病害可持续控制的长期任务。 水稻稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)生理小种监测是一项十分重要的工作,现在以多点、多面、多寄主地采样分离单孢菌株测定其小种类型,可准确反映某一地区总体稻瘟病菌生理小种组成与分布情况,但这种方法工作
4、量较大且费时费力。本试验从江西省井冈山稻瘟病抗性鉴定基地种植的不含已知抗瘟基因品种丽江新团黑谷(Lijiangxintuan-heigu,LTH)稻瘟病菌标本中分离单孢菌株,利用7个中国传统鉴别品种和30个单基因抗瘟品系分别测定稻瘟病菌致病性分化情况及其无毒基因,并与这一地区多点不同品种标本分离的稻瘟病菌致病性分化情况进行比较,旨在明确LTH稻瘟病菌群体构成与当地整体稻瘟病菌群体的相关性,为监测稻瘟病菌生理小种和鉴定品种抗性基因的研究提供新途径。 1、材料与方法 1.1供试材料 供试菌株:从
5、江西省井冈山稻瘟病抗性鉴定基地种植的LTH采集分离的100个有效单孢菌株和从其他20个水稻品种上分离的200个单孢菌株。供试品种:中国农业科学院作物栽培研究所育成的6个水稻抗稻瘟病近等基因系和国际水稻研究所与日本合作育成的24个水稻抗稻瘟病单基因系(表1);7个中国鉴别寄主特特勃、珍龙13、四丰43、东农363、关东51、合江18和LTH均由广东省农业科学院朱小源博士惠赠。 1.2接种孢子液的制备 单孢菌株在含PDA培养基试管里培养7~10d后转接到玉米粉稻秆琼脂培养基上扩大培养7~9d,然后
6、在黑光灯下光照培养3~4d。用无菌水冲洗孢子,将接种孢子液浓度调至1×105个/mL备用。菌株培养及产孢均在25℃下进行。 1.3致病性的测定 水稻种子催芽后穴播于长35cm、宽30cm、高5cm的塑料育秧盘里(50个孔),每盘播37份材料,每份材料播种量为8~10粒。采用旱育秧,待秧苗长至2叶1心期,每盘施尿素0.5g,接种前共施3次。待秧苗长至3.5~4.0叶龄,用制备的孢子液进行人工喷雾接种,接种菌液量为每盘40mL。接种前在孢子悬浮液中加入0.1%吐温20,接种后将秧苗置于培养箱中暗
7、培养,在25℃下保湿24h。 之后置于温室,在25~28℃[键入文字][键入文字][键入文字]精选公文范文管理资料下保湿至秧苗发病,接种7d后进行抗性测定。每个菌株的致病性测定均设2个重复。病级调查按国际水稻研究所稻瘟病圃苗瘟分级标准进行,1~3级为抗病、4~9级为感病,并按照中国稻瘟病菌生理小种联合试验组提出的方法划分稻瘟病菌生理小种。 1.4致病率与毒力频率的计算 致病性测定参照杨秀娟等的方法进行,单个菌株对所有测试水稻品种(基因)的致病率(patho-genicfrequency,PF
8、)=(感病的水稻品种数/所有测试水稻品种数)×100%,其中PF≥70%为强致病力,50%≤PF≤69%为较强致病力,29%≤PF≤49%为中等致病力,PF 稻瘟病菌无毒基因的出现频率(occurancefre-quency,OF)=(出现某个无毒基因的菌株数/总菌株数)×100%。 2、结果与分析 2.1同一寄主稻瘟病单孢菌的生理小种利用 7个中国传统鉴别品种和30个近等单基因系抗瘟品种,对100个从LTH稻瘟病菌标本中分离的单孢菌株分别测定生理小种和致病力。试验结果表明