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1、大白菜根系分泌物的GC-MS分析张照然1,范黎明1,吴毅歆2,毛自朝2,何月秋1,2基金项目:农业部公益性行业(农业)科研专项(201003029);云南省自然科学基金重点项目(2008CC024);云南省科技强省专项(2009EB060)。作者简介:张照然(1986-),男,辽宁省抚顺人,硕士研究生,E-mail:johnluxun@qq.com*通讯作者,何月秋;男,教授,博导,主要从事植物病理学研究。E-mail:ynfh2007@163.com(1.云南农业大学植物保护学院,云南昆明650201;2.云南农业大
2、学农学与生物技术学院,云南昆明650201)摘要:本文利用循环水式根系分泌物收集系统收集大白菜根系分泌物,经甲醇洗脱和正己烷萃取旋蒸制样后,利用气相色谱-质谱联用仪分析收集到的样品。结果共检测出50种化合物,主要有脂肪烃,芳香烃,酯类,羧酸和含有卤素和硫的化合物等。其中脂肪烃的相对含量为38.980%,1-甲基-1-苯基-2-环丙烯,占总含量的6.282%。关键词:大白菜;根系分泌物;GC-MS;十字花科根肿病GC-MSAnalysisforRootExudatesofChineseCabbageZhangZhaora
3、n1,FanLiming1,WuYixin2,MaoZichao2,HeYueqiu1,2(1.FacultyofPlantProtection,YunnanAgriculturalUniversity(YAU),Kunming650201,Yunnan;2.FacultyofAgronomyandBiotechnology,YAU,Kunming650201,China)Abstract:Bytherecycledwatercollectionsystem,therootexudatesofChinesecabbag
4、ewerecollected,,washedwithmethanol,extractedwithhexane,andanalyzedbyGC-MS.Fiftycompoundsweredetected,mainlyincludingaliphatichydrocarbons,aromatichydrocarbons,esters,carboxylicacidsandhalogenandsulfur-containingcompounds.Amongthem,aliphatichydrocarbonstoodfor38.
5、980%and1-Methyl-1-phenyl-2-cyclopropenefor6.282%intherelativecontent.Keywords:Chinesecabbage;Rootexudate;GC-MS;cruciferousclubroot植物在其生长发育过程中,根系作为植物与土壤的接触面,从土壤中吸收水分、养分的同时,也对土壤产生影响。根系在其生长期间不断分泌自身的代谢产物,主要包括有机酸类,糖类,氨基酸类和酚类物质,释放到土壤中。一方面可以改善植物的生长环境,影响土壤的物理、化学和生物学性状,另
6、一方面分泌物可做为信息化合物直接或间接地影响土壤的微生物活动[1,2]。如,嫁接茄子的砧木根系分泌物能够很好的抑制茄子黄萎病菌的生长[3];某些抗病黄瓜品种的根系分泌物对黄瓜枯萎病菌孢子的萌发和菌丝的生长具有明显的抑制作用[4]。十字花科植物容易受根肿菌的侵染形成根肿病,而根肿病是一种分布较广,危害较重,防止困难的土传病害,特别是芸薹属的大白菜发病最为严重[5]。根系分泌物作为植物最先和病原菌接触的部分,本实验利用根系分泌物收集系统和GC-MS等仪器[6],对大白菜的根系分泌物加以研究,以求获得分泌物中的有效成分,据此
7、开展防治大白菜抗根肿病的研究。1材料与方法1.1试验材料大白菜(Brassicarapaspp.pekinensis)种子为市售杂交种,精纯鲁春白1号(83-1)。XAD-4大孔吸附树脂[7]购于上海安澜德生物科技有限公司。500mL分液漏斗,石英砂,自制的循环水式根系分泌物收集装置,甲醇和正己烷等试剂为国产分析纯。1.2大白菜的种植大白菜的种植基质为石英砂。石英砂先用自来水洗涤,待水中无浑浊后,将水沥干,用1mol/L的盐酸溶液浸泡,除去其他杂质。浸泡一周后,用去离子水清洗至pH稳定至75。然后将石英砂转移至循环水式
8、根系分泌物收集系统的上层广口玻璃罐(直径11cm,深20cm)内待用。挑选颗粒饱满,大小均一的大白菜种子,经去离子水清洗后,种于盛有石英砂的广口玻璃罐内,每罐18粒。将收集装置整体置于温室中,采用自然通风与光照,每周施用一次Hoagland营养液[8]。1.3树脂的预处理为了方便运输和储存,新购置的XAD-4树脂为干燥状态,不能直