不同分子量壳寡糖对高脂糖尿病大鼠的果糖胺和血脂的影响

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1、不同分子量壳寡糖对高脂糖尿病大鼠的果糖胺和血脂的影响林强1*，王鑫1，2，葛喜珍1，桑帅1，高伟1（1．北京联合大学生物化学工程学院，北京100023；2．北京化工大学生命科学与技术学院，北京100029）摘要目的：探讨不同分子量壳寡糖对糖尿病大鼠的作用机制。方法：Wistar大鼠采用高脂高糖饮食同时腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型。将动物随机分为正常对照组、模型组、阳性对照和药物治疗组。给药两周后进行糖耐量试验。四周后处死大鼠取血清测定血糖、果糖胺和血脂各项指标。结果：与正常组比较，模型组血糖、果糖胺水平明显升高（P<0.01），血脂各项指标明显变化（P

2、<0.01）。与模型组比较，治疗组各项指标有明显改善(P<0.05,P<0.01)，且这种作用具有剂量和分子量依赖性。结论：本模型大鼠血糖升高，并引起脂代谢紊乱，分子量1700的壳寡糖、大鼠日用剂量为140mg.kg-1适合高脂糖尿病患者，可降低血糖、调节血脂，起到保健作用。关键词壳寡糖；糖尿病；血糖；血脂；果糖胺中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:糖尿病(diabetesmellitus，DM)病情严重或应激时可发生多种急性代谢性紊乱,研究和开发防治糖尿病及其并发症的药物越来越受到人们的重视。壳聚糖(chitosan)是以虾、蟹、昆虫的外壳或真菌

3、类藻类等细胞壁提取的甲壳素经脱乙酰化反应而得到的一种纯天然多糖类有机聚合物，是自然界中存在的唯一丰富的碱性多糖。研究发现，壳聚糖可降低胆固醇，具有抗肿瘤活性、免疫调节作用和调理肠胃的功能[1]。壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)是壳聚糖的降解产物，分子量小，溶于水，可被人体、动物及植物机体吸收利用，它不仅具有和壳聚糖相似的性质，而且一些生理活性或功能性质更加显著，如提高机体免疫力、抗肿瘤作用、调节血脂、作为促进双歧杆菌生长因子等，其降血糖作用国内外有相关报道[2]。但壳寡糖平均相对分子质量(Mr)在2000～10000之间，不同分子量

4、和用药剂量的药理作用报道不一[3]。本研究拟探讨不同分子量壳寡糖的降糖作用机制，为壳寡糖开发成糖尿病易感人群或患者的保健食品或药品提供实验依据。1材料1.1实验动物两月龄wistar清洁级雄性大鼠70只，体重150-200g，由军事科学动物中心提供。许可证号：SCXK-（军）2002-001。1.2实验仪器TGL-16C低速离心机：上海安亭科学仪器厂；ThermoMK3型酶标仪：热电（上海）仪器有限公司；scoutⅡ半自动生化仪：德国scout公司；优越型血糖测试仪：德国罗氏公司；JA2003精密电子天平称：上海恒平科学仪器有限公司；HW.SY11-KD2C电

5、热恒温水浴锅：北京长风仪器仪表公司。基金项目：北京市教育委员会科技成果转化项目（注：无课题号）。作者简介：林强（1964年4月-），男，博士研究生，研究方向为天然药物化学。*通讯作者：林强，E-mail：linqiang@buu.com.cntel：010-67373086,13910232705通信地址：北京朝阳区垡头西里三区18号北京联合大学生化学院制药工程研究所林强收邮编：10002361.3药物与试剂链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）：sigma公司，临用前以pH4.2的柠檬酸钠缓冲溶液溶解。胆固醇、胆酸钠：北京奥博星生物技术有限责任公

6、司。分子量1700和3000壳寡糖：由本实验室自制。拜唐苹：中国北京拜耳医药保健有限公司。葡萄糖（Glu）、甘油三酯（TG）、高度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、总胆固醇（TC）试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司。果糖胺（FMN）、游离脂肪酸（FFA）试剂盒：南京建成生物工程研究所。2方法2.1糖尿病大鼠模型的制备两月龄wistar清洁级雄性大鼠70只，适应性喂养一周。随机选取10只为正常对照组，灌胃0.9%生理盐水，其余60只灌胃高脂乳剂饲料10ml.kg-1。四周后除正常组外，各组均腹腔注射STZ40mg.kg。3天后尾静脉取血测血糖，取空腹血糖大于7.8m

7、mol.L-1的大鼠入选糖尿病模型。高脂乳剂配方：200g猪油加热溶化，加入100g胆固醇，待溶化后加入20g胆酸钠，300g蔗糖，充分搅匀后加入200ml吐温80，200ml丙二醇及适量蒸馏水，搅拌，待溶解后冷却至室温再加适量蒸馏水至1500ml并充分混匀，4℃封存，用时37℃水浴加热溶化。2.2分组处理65只大鼠除正常组10只，其余大鼠随机分为5组：模型组、拜唐苹阳性对照组，1700壳寡糖高剂量组，1700壳寡糖低剂量组，3000壳寡糖组；正常对照组、模型对照组：按体重每日生理盐水灌胃(10ml.kg-1)；拜唐苹阳性对照组：按13.5mg.kg-1.d-

8、1的剂量灌胃；1700壳寡糖组：分别按