2.3 分解纤维素的微生物的分离 规范训练(人教版选修1)

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1、课题3　分解纤维素的微生物的分离(时间：30分钟　满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难纤维素分解菌的筛选1、2、3、75、6刚果红染色法及实验结果评价48一、选择题(每小题4分，共20分)1．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，下列流程正确的是(　　)。A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→挑选菌落B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落解析　本题考查纤维素分解菌的分离过程的有关知识。正确的流程是“土壤取样→选择培养→稀释涂

2、布平板→挑选菌落”，其中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，因此需要在稀释涂布平板之前进行，最后根据菌落的特征挑选纤维素分解菌。答案　B2．在对纤维素分解菌进行选择培养用液体培养基的目的是(　　)。A．用液体培养基可获得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C．用液体培养基可以使菌体充分利用培养基中的营养物质D．用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌解析　使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。答案　A3．在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，一般先进行选择培养，其主

3、要目的是(　　)。A．完全除去其他微生物B．没有意义，去掉这一步更好C．增加纤维素分解菌的浓度D．使纤维素分解菌充分长大解析　如果在所采集的土样中纤维素分解菌含量较少，稀释涂布到鉴别培养基上后形成的菌落数就更少，不利于挑选所需菌落。通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。这种培养不能纯种分离，故A错。答案　C4．两种刚果红染色法的结果是(　　)。A．均会出现透明圈B．均不会出现透明圈C．方法一出现，方法二不出现D．方法一不出现，方法二出现解析　两种刚果红染色法都会出现透明圈，但方法一在加入刚果红溶液时会

4、造成菌落混杂，而先加入刚果红的方法则可能出现假阳性反应。答案　A5．下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，不正确的是(　　)。A．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B．对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验C．纤维素酶的测定方法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量的测定D．纤维素酶是一种复合酶解析　初步筛选只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产生纤维素酶的实验。答案　B二、非选择题(共30分)6．(10分)某研究性学习小组的同学为了从土壤中筛选纤维素分解菌，利用下列材料和用具进行了实验，请完善下列

5、实验步骤。材料用具：采集的土样、研钵、配制纤维素分解菌培养基的各种原料、琼脂、纤维素粉、刚果红溶液、培养箱、无菌水。实验步骤：(1)利用纤维素分解菌培养基的各种原料、琼脂及______，配制固体培养基，灭菌。(2)将采集的土壤样品在研钵中研碎后______，制成土壤匀浆。(3)利用无菌操作方法把土壤匀浆______到培养基上，放在培养箱内培养一段时间。(4)用显微镜观察纤维素分解菌时，要从______中挑取材料制成临时装片。解析　分离纤维素分解菌的培养基中要加入纤维素粉作碳源，加入刚果红溶液加以检测，刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素分解

6、菌在含有刚果红和纤维素的培养基上生长，其产生的纤维素酶能分解纤维素，在菌落周围产生透明圈。挑取周围有透明圈的菌落制成临时装片可观察到纤维素分解菌。答案　(1)纤维素粉和刚果红溶液(2)加入无菌水　(3)接种　(4)周围有透明圈的菌落7．(10分)某同学为了从土壤中分离得到纤维素分解菌，进行了以下操作。第一步：土壤取样。用小铁铲和普通信封将土取回，然后倒入一烧瓶中，加蒸馏水稀释，塞好棉塞。第二步：制备培养基。纤维素粉　　　　　　　　5gNaNO31gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵

7、母膏0.5g水解酪素0.5g待其他物质溶解后加水定容到1000mL。第三步：菌悬液涂布平板。用接种环取少量土壤稀释溶液在以上培养基表层涂布。第四步：培养观察。把接种好的培养皿放到35℃的恒温箱中培养1～2d，观察并记录菌落的生长情况。根据以上实验操作，完成下列题目：(1)找出该同学明显的操作错误。________________________________________________________________________________________________________________________。(2)要

8、想增加该实验的说服力，还应该怎么做？解析　从土壤中分离微生物一般的流程是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→菌悬液涂布平板→挑选出单个菌落。该实验步骤不完整，且在前三步