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时间:2017-11-12
《仪器分析 高效毛细管电泳简介》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第八节高效毛细管电泳简介一、基本原理1、概述在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同,迁移速率不同可实现分离。毛细管电泳是以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据试样中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离、分析物质的一类液相技术,是经典电泳和现代微柱分离的结合。2、电泳现象与电渗流现象电泳现象:带电离子在电场作用下的迁移(定向移动),速度ν电泳电渗流现象:石英玻璃表面存在硅羟基,pH
2、>3时,形成双电层,在高电场的作用下,双电层中的水合阳离子引起毛细管中的溶液整体向负极移动,速度ν电渗流3、分离过程:4、分离类型毛细管区带电泳(CZE):最普遍、最基本的一种分离模式。毛细管凝胶电泳(CGE):将聚丙烯酰胺在毛细管柱内交联生成凝胶。其具有多孔性,类似分子筛的作用,试样分子按大小分离。能够有效减小组分扩散,所得峰型尖锐,分离效率高。可分离测定蛋白质、DNA等。毛细管胶束电动力学色谱(MECC):用来分离中性物质,扩展了高效毛细管电泳的应用范围。二、仪器装置电压:0~30KV。分离柱不
3、涂敷任何固定液;紫外或激光诱导荧光检测器(10-19~10-21mol/L)三、主要特点和应用高分辨率:理论n高达数百万块,甚至数千万块;高灵敏度:可检测出低至10-21mol/L浓度的物质;高分析速度:可在3分钟内分离30种阴离子;1.7分钟分离19种阳离子;4分钟可分离10种蛋白质;试样用量少:仅需几nL(10-9L)的试样;仪器简单,操作成本低:分析一个试样仅需几毫升流动液。不足之处:进样不够方便。应用范围相对较窄。分析阴离子时,由阴极进样,在阳极检测。但电渗流方向与阴离子受电场力作用移动方向
4、相反,出峰时间较长。
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