广金钱草对胆色素结石的实验研究

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1、广金钱草对胆色素结石的实验研究作者：刘琼，单春文，张素中，陈家树【摘要】目的探讨广金钱草对胆色素结石的作用机制。方法用林可霉素对豚鼠造模1周，停药1周后灌服广金钱草高中低剂量和阳性对照药4周，空白组和模型组正常喂养4周。结果广金钱草显著降低豚鼠胆囊结石率，对胆囊炎有治疗效果，并且能影响血液生化学指标和胆汁成分。结论实验通过大体解剖、病理以及血和胆汁生化检查，进一步证明广金钱草抗炎作用，尤其是对慢性炎症。通过抗炎保护了胆囊上皮，防止水肿和分泌大量粘蛋白，维护正常组织结构;同时降低胆汁粘度、DBIL、

2、Ca2+和β-葡萄糖醛酸酶浓度，防止胆色素结石核心形成和结石的增大。抗炎恢复了胆囊的动力学环境，有消除胆汁淤滞的作用，故有排石作用。另一方面，保护肝细胞功能，促进肝细胞分泌胆汁酸，胆汁酸增加使游离胆红素的溶解度增加及钙离子沉积减少，阻止结石的产生。同时，肝脏分泌的增加有利胆作用。广金钱草通过以上几方面达到治疗胆色素结石。【关键词】广金钱草;胆色素结石;胆囊炎15　广金钱草作为四大南药之一，在民间运用历史悠久，被广泛用来治疗热淋、砂淋、小便涩痛、黄疸尿赤、尿路结石等[1]。目前有关它对胆结石治疗的研

3、究较少，尤其是对胆色素结石的研究暂未见。已有研究表明广金钱草通过促进CCK分泌，达到增加胆汁流量、收缩胆囊、扩张奥狄氏括约肌从而达到利胆排石作用的[2]。卢兖伟[3]认为广金钱草总黄酮除具有防治肾结石的作用外，因其有显著的利胆作用，故对胆结石的防治作用值得进行深入研究。本研究在已有利胆研究基础上，全面探讨其对胆色素结石的治疗机制的研究，一方面为胆色素结石提供更多有效药物，另一方面丰富广金钱草药理学研究内容，为药材的单味药制剂和配伍提供药理学依据。　　1材料与方法　　广金钱草制剂由中山大学新华学院药

4、学实验室提供，采用水提醇浸法提取，含16.7g/ml生药。林可霉素(批号09112105。上海旭东海普药业有限公司生产)。消溶肝胆结石片(四川旭华制药厂生产)。豚鼠选用英国种健康短毛雌性豚鼠72只，体重(300±50)g，南方医科大学动物实验中心提供。　　1.1动物分组和药物用量采用随机分组法将其分成6组，空白对照组(A)、模型组(B)、广金钱草高剂量[32.4mg/(100g·d)]组(C)、广金钱草中剂量[16.2mg/(100g·d)]组(D)、广金钱草低剂量[8.1mg/(100g·d)]

5、组(E)、消溶肝胆结石片[0.125mg/(100g·d)]组(F)。每组12只，每5只一大笼，分笼喂养，饲养的环境温度为15～25℃。15　　1.2动物胆色素结石模型制造采用Scott方法[4，5]，除空白对照组外，余5组分别给予豚鼠大腿根部(双后肢交替应用，以防皮肤坏死)皮下注射林可霉素，每日上午进行实验按6mg/100g体重给药，连续7天。　　1.3实验步骤第1、2周正常饲养，以适应环境。第3周造模，空白组在造模时皮下注射等量生理盐水，其余所有组动物注射林可霉素。第4周所有动物休息。第5周A

6、、B组常规饲养，每天灌生理盐水1ml，C、B、E、F组灌胃给药。　　在实验期间，每周称量动物体重1次，每天记录实验室温度和湿度、动物精神状况、皮毛光度、活动情况、进食量、大小便等一般情况。每笼动物除每日自由饮水，并喂适量青菜。每日早晚定时喂养，并清洁豚鼠笼、饲料盆及水壶等。　　1.4样本取材第8周最后一天，灌药300min后，把受试动物处死前由心脏取血,送生化检查。同时，迅速用血管钳阻断胆囊管，取下胆囊，肉眼观察胆囊外形、成石情况，并用注射器吸出全部胆汁，收集所有动物胆石，取材后分别送验。每组各取

7、5只动物的肝和胆囊送病理检查。15　　1.5血清、胆汁生化和胆石分析采用CL-7200全自动生化分析仪，测量胆汁中游离胆红素(UCB)、钙(Ca2+)、胆汁酸、β-葡萄糖醛酸酶含量及血液中谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、尿素氮(BUN)。胆石采用溴化钾压片法，测试仪器为双光束红外分光光度计。　　2结果与分析　　2.1动物的一般情况第1、2周动物生长发育正常，没有死亡。第2周造模、第4周休息，空白组无死亡，其他各组共死亡10只。死前动物均出现精神萎靡不振、腹泻、皮毛倒竖无光泽、体重下降等

8、症状，存活动物有精神欠佳、活动减少、皮毛无光泽、体重下降，最后逐渐到基本正常。在治疗期死亡2只，原因是灌胃操作不当致死。动物不同时期存活情况见表1。表1实验过程中豚鼠存活情况(只)　　对死亡的豚鼠进行尸体解剖发现肝脏大体标本有明显充血水肿，胆囊内有棕褐色脓性分泌物和少量淡黄色絮状沉淀物，并且经化验絮状沉淀主要为胆色素及胆色素盐。镜下可见肝细胞大量坏死，胆囊上皮有多处溃疡，胆囊各层有大量中性粒细胞浸润。　　分析：从死亡动物的大体解剖和病理检查可看出，林可霉素造模对实验动物的肝脏、胆囊