广寄生和红花寄生及其寄主植物与黄酮含量的相关性研究

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1、广寄生和红花寄生及其寄主植物与黄酮含量的相关性研究作者：李永华，陈士林，卢栋，朱开昕，赵明惠【摘要】目的考察广寄生与红花寄生及其寄主植物的总黄酮含量的关系。方法采用分光光度法测定寄生在4种不同寄主植物上的广寄生与红花寄生的总黄酮含量，并用正交实验的方法研究比较了不同提取条件对广寄生样品总黄酮提取率的影响。结果广寄生茎枝的总黄酮含量为5.24～5.56mg/g，广寄生叶的总黄酮含量为27.14～32.08mg/g;红花寄生茎枝的总黄酮含量为3.70～5.00mg/g，红花寄生叶的总黄酮含量为33.87～35.00mg/g。正交实验结果优选的提取条件茎枝是A1B2C2D3，即广寄生茎枝0

2、.5g，乙醇浓度为60%，超声提取时间为30min,超声提取温度为45℃，料液比1∶25;叶是A2B1C2D3,即广寄生叶0.5g，乙醇浓度为70%，超声提取时间为20min,超声提取温度为45℃，料液比1∶25。结论无论是广寄生还是红花寄生叶的总黄酮含量高于茎枝的总黄酮含量，寄生在同一寄主植物上广寄生茎枝的总黄酮含量要比红花寄生茎枝的总黄酮含量高，而红花寄生叶的总黄酮含量要比广寄生叶的总黄酮含量高。优选的提取方法稳定、可靠、简捷，提取效率高。【关键词】桑寄生;广寄生;红花寄生;寄主;总黄酮6　桑寄生是中国传统常用中药材，《中国药典》桑寄生药材为桑寄生科钝果寄生属广寄生Taxillu

3、schinensis(DC.)Danser的干燥带叶茎枝[1]，但由于桑寄生沿用历史的原因，目前桑寄生药材原植物来源依然十分复杂，除了广寄生外，至少还包括有桑寄生Taxillussutchuenensi(Lecomte)Danser、红花寄生ScurrulaparasiticaL.、毛叶钝果寄生Taxillusnigrans(Hance)Danser、柳叶钝果寄生Taxillusdelavayi(VanTiegh.)Danser等，在药材流通与使用上都作桑寄生使用[2]。不同寄主植物的同一种桑寄生药材化学成分含量已见文献报道[3]，而生长于相同寄主植物的不同桑寄生药材品种的化学成分含

4、量及其含量的差异性研究目前尚未见报道。本文通过对来自相同寄主植物上广寄生和红花寄生总黄酮含量进行检测与比对分析，考察桑寄生品种及其寄主植物与桑寄生总黄酮含量的关系，为桑寄生药材的科学使用提供理论依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器与试剂岛津UV-265FW分光光度计;KQ-2200E超声波清洗仪(江苏昆山超声仪器有限公司);芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号为100080-200306);所用试剂均为分析纯。　　1.26药材桑寄生药材样品分别采自广西南宁、钦州等地，经广西中医学院邓家刚教授鉴定分别为广寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser和红

5、花寄生ScurrulaparasiticaL.，寄主植物分别为桑树MorusalbaL.、板栗CastaneamollissimaBlume、夹竹桃NeriumindicumMill、梅Prunusmume(Sieb.)Sieb.etZucc.等，将采集桑寄生药材样品清洗干燥茎叶分开粉碎(60目)后备用。2方法与结果　　2.1显色方法与检测波长确定参考有关文献采用三氯化铝比色法进行测定[4，5]。以一定浓度的乙醇为溶剂，以三氯化铝为显色剂，对对照品溶液与样品溶液依法显色后，按紫外-可见分光光度法(《中国药典》2005年版Ⅰ部附录)在200～600nm波长范围内扫描，测得对照品与样品的

6、最大吸收波长为408nm左右。　　2.2标准曲线的制备精确称取105℃干燥至恒重的芦丁对照品5.03mg，置10ml容量瓶中，加少量60%乙醇溶解后定容至刻度。精确吸取5ml于10ml容量瓶中，加60%乙醇稀释至刻度，制成0.25mg/ml的标准液。精确吸取标准液0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，加60%乙醇稀释至1.0ml，加0.1mol/L的三氯化铝溶液2ml，0.1M的醋酸钠溶液1ml，摇匀，室温放置20min，在波长408nm测吸收度。以吸收度A对浓度C作标准曲线，回归方程为A=0.2466C-0.0044，r为0.9998，表明在0.0063～0.06

7、3mg/ml6之间呈良好的线性关系。　　2.3总黄酮提取工艺设计采用广寄生样品进行正交实验，选择乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取温度(C)、料液比(D)为实验因素。因素水平见表1，实验结果见表2。表1提取工艺参数设计　　2.4稳定性实验精确吸取样品溶液2ml，依法显色20min后至100min内，在波长408nm，每隔10min测定一次吸收度。结果表明：显色后室温放置20～100min内，其吸收度稳定，RSD为1.89%。　　2.5精密度实验精确吸取样