丙氨酸氨基转移酶ifcc法检测试剂中加入　5’-磷酸吡哆醛的评价

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1、丙氨酸氨基转移酶IFCC法检测试剂中加入　5’-磷酸吡哆醛的评价【摘要】目的评价在试剂中加有5’-磷酸吡哆醛的丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂。方法利用日立U-3310紫外分光光度计、温度控制仪和磁力搅拌仪，于37℃，340nm波长，速率法，使用加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛ALT试剂，测试临床标本，观察两种ALT试剂的检测结果相关性。结果加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛的ALT试剂测试临床标本结果比较，回归方程为Y=0.8629X-2.4019,R2=0.9602。结论加5’-磷酸吡哆醛ALT试剂与未加5’-磷酸吡哆醛ALT试剂有较好的相关性，且

2、加有5’-磷酸吡哆醛ALT试剂测试结果比未加5’-磷酸吡哆醛ALT试剂测试结果约高14%。【关键词】丙氨酸氨基转移酶;5’-磷酸吡哆醛;相关性Determinationofalanineaminotransferaseassayreagentwithpyridoxal-5’-phosphoricacid　　[Abstract]ObjectiveToevaluatealanineaminotransferaseassayreagentwithpyridoxal-5’-phosphoricacid.MethodsALTwasdetectedwithaseriesoft

3、estsonHITACHIU-3310UVspectrophotometer,spectrophotometer-controllerandmagneticstirrerat281nmand37℃accordingtospeedratemethodby7alanineaminotransferaseassayreagentwithorwithoutpyridoxal-5’-phosphoricacid.ResultsAscomparedtheconcentrationsdetectedbyalanineaminotransferaseassayreagentwit

4、horwithoutpyridoxal-5’-phosphoricacid,theregressionequationwasY=0.8629X-2.4019,R2=0.9602.ConclusionTherelativitybetweenalanineaminotransferaseassayreagentwithorwithoutpyridoxal-5’-phosphoricacidiswellandtheconcentrationdetectedbyalanineaminotransferaseassayreagentwithpyridoxal-5’-phos

5、phoricacidishigherthanthereagentwithoutpyridoxal-5’-phosphoricacidabout14%.　　[Keywords]alanineaminotransferase;pyridoxal-5’-phosphoricacid;relativity　　吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺是维生素B6的三种形式，它们在体内可以互相转化。维生素7B6在体内经磷酸化作用转变为相应的磷酸酯，即维生素B6的辅酶形式：磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺，它们之间也可以相互转变，均为活性型。作为转氨基的辅酶，磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺在氨基酸代谢中非常重要，

6、是氨基酸代谢中的转氨酶及脱羧酶的辅酶，通过两者互变起着传递氨基的作用。血清中的ALT必须在酶和辅酶同时存在时才表现出最大活力，磷酸吡哆醛为其辅酶，在反应中起到传递氨基作用，测定ALT时，加入磷酸吡哆醛可提高酶的活性。本文将讨论在测定血清中丙氨酸氨基转移酶时，在检测试剂中加入5’-磷酸吡哆醛和不加5’-磷酸吡哆醛时两种检测结果的关系。　　1材料与方法　　1.1仪器日立U-3310紫外分光光度计，日立温度控制仪，日立磁力搅拌仪。日立7180全自动生化分析仪。　　1.2试剂按照IFCC配置的丙氨酸氨基转移酶基础试剂，然后再配置下述两种不同配方试剂。配方一(后面标示为AL

7、T1)：取适量基础试剂，按照IFCC推荐方法要求，在反应液中加入5’-磷酸吡哆醛溶液。配方二(后面标示为ALT2)：取与配方一相等量的基础试剂，用亚沸水代替5’-磷酸吡哆醛溶液，即在反应液中加入等量的亚沸水。　　1.3检测样品临床新鲜冰冻血清80例，其中健康人群50例，来自本院健康查体人员;肝病20例、肾病10例(含透析病人3例)均为本院住院患者。　　1.4测定原理L-丙氨酸+2-酮戊二酸、丙氨酸氨基转移酶、丙酮酸+L-谷氨酸、丙酮酸+NADH+H+、乳酸脱氢酶、乳酸+NAD+。7　　1.5方法　　1.5.1常规开机，做好仪器日常维护及实验前质控工作。　　1.5.

8、2主要分析