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1、凝聚胺检测技术在交叉配血中的应用体会作者：洗炳培，李结敏，余文潮，赖文【关键词】,凝聚胺检测技术；交叉配血；血型鉴定 ［摘要］目的：评价凝聚胺在交叉配血和不完全抗体检测中的使用。方法：用凝聚胺法对500名受血者标本与其同型献血员标本做交叉配血，谱细胞反应分别用抗人球蛋法和凝聚胺法测定。结果：检测中共发现31例冷凝集引起的假阳性；14例纤维蛋白网罗红细胞导致假阳性；3例同种抗体；4例自身抗体；4例在凝聚胺交叉配血中红细胞不出现非特异性可逆凝集。结论：凝聚胺法具有操作简便、快速、敏感性强和结果清晰等优点,是目前基层医院交叉配血理想的方法。 ［关键词］凝聚
2、胺检测技术；交叉配血；血型鉴定 1980年Palezari和Jiang首先将凝聚胺技术应用在血库作业上,随后Fisher于1983年对盐水介质法、木瓜酶法、低离子盐水法和凝聚胺法等46种方法检测异体抗体的能力进行比较,结果发现凝聚胺法灵敏度高出其他方法2倍～250倍,而且具有方法简便、时间短、灵敏度高、结果明显等优点［1，2］。输血前凝聚胺交叉配血是预防受血者不完全抗体引起的迟发性溶血性贫血的主要措施,也是筛检自身免疫性溶血性贫血的有效方法之一。本血站为确保输血安全合理,自2002年引入凝聚胺检测技术进行交叉配血。现将聚胺检测技术在本血站应用的结果作一
3、阐述并分析。 1 材料与方法 1.1 试剂 polybrene试剂(包括低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液和重新悬浮液)为台湾东耀企业有限公司产品；抗人球蛋白试剂、谱细胞由广州市血液中心提供。 1.2 标本 2003年至2005年由地方医院提供送检的标本共500例。 1.3 方法 凝聚胺法：在主侧管内加受检血清2滴和献血员2%红细胞悬液2滴,次侧管加入献血员血清2滴和受检者2%红细胞悬液2滴；各管分别加入低离子介质0.6ml,混匀,于室温下静置1min；各管加入凝聚胺2滴,混匀,3500r/min离心15
4、6s,移去上清液,观察管底红细胞有无凝块(如无凝块必须重做)；加重新悬浮液2滴,轻轻摇动观察凝块是否散开,若为凝聚胺引起的非免疫性凝集在1min内即自然散开，若是特异性抗原抗体引起的凝集即不会散开,必要时可在显微镜下观察；常规法按《全国临床检验操作规程第二版》操作。 2 结果 2.1 检测共发现31例冷凝集引起的假阳性 受血者血清中含有冷凝集素，效价为4～256，间接抗人球蛋白试验阳性。解决此类假阳性的方法可在最后滴入Resusperding液时，将试管置入37℃水浴中，轻轻摇晃试管使冷凝集散去，并在30s内观察结果。 2.2 14例纤维蛋白网
5、罗红细胞导致假阳性 此类假阳性的凝集结果很容易与抗原抗体反应的凝集区分。为慎重起见，只须将标本置于37℃20min～30min，待血清自然析出，再重新做实验。 2.3 3例同种抗体 2例在交叉配血的主侧管凝集，后经谱细胞实验证实标本血清中分别含有抗E和抗C。凝聚胺法测得效价分别为1∶4和1∶616，抗人球蛋法分别为1∶4和1∶8。1例在新生儿红细胞放散液中发现抗体，证实为IgG抗A。凝聚胺法测得效价为1∶128，抗人球蛋法为1∶128。 2.4 4例自身抗体 在凝聚胺法交叉配血中有2例主次管均凝集，
6、直接、间接抗人球蛋白试验阳性。2例次侧管凝集，直接抗人球蛋白试验阳性。证实为自身抗体。 2.5 4例在凝聚胺交叉配血中红细胞不出现非特异性可逆凝集 考虑为药物干扰影响［3］。解决方法是在凝聚胺法的第三步倒掉上清液，再加凝聚胺溶液离心,若出现非特异性可逆凝集便已消除干扰,若不行则要重新抽取不受药物干扰的标本。 3 讨论6 以上结果说明凝聚胺交叉配血既可以检出完全抗体,又可以检出有临床意义的不完全抗体,有效地避免了迟发性溶血性输血反应的发生,给临床治疗诊断提供了有效的科学依据(尤其是自身免疫性溶血性贫血)。虽然存在冷凝集、纤维蛋白和一些
7、药物的干扰，只要在配血过程中多留心、多分析，这些问题还是比较容易解决的。在凝聚胺交叉配血中，加入的低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液在离心后弃去对标本有稀释和洗涤作用，可使结果明显清晰，而无盐水法受血浆物质干扰的问题。上面解决药物的干扰也是基于此原理。传统的交叉配血法有盐水介质法、酶法(包括木瓜酶和菠萝酶法)、抗人球蛋白(Coombs试验)法。盐水介质法虽然简便快速,但不能发现不完全(免疫性)抗体,单用该法配血有危险性,需要增加酶法或抗人球蛋白法,才能避免不完全抗体引起的配血不合,达到安全输血。但酶法或抗人球蛋白法的实验步骤繁琐、试验反应时间长,一般需要20m
8、in~1h,往往会耽误抢救治疗工作。国内一些大医院新近引进的微柱凝胶试验交叉配血
