六味地黄丸对帕金森小鼠氧化应激反应的影响

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1、六味地黄丸对帕金森小鼠氧化应激反应的影响作者：董梦久钱红雨周素方刘文武吴忠兵【摘要】探讨六味地黄丸对帕金森病小鼠模型的异常行为和黑质抗氧化系统的影响。［方法］经腹腔注射1甲基4苯基1，2，3，6四氢吡啶（MPTP），建立小鼠帕金森病（PD）模型。通过爬竿实验和滚筒实验研究小鼠造模和给药后的行为表现；给药4周后测定小鼠中脑黑质部位超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活性及丙二醛（MDA）水平的变化。［结果］经MPTP诱导的小鼠，其爬竿时间、滚筒运动潜伏期与正常对照组比较有显著性差异，经六味地黄丸给药后能明显改善MPTP诱导的小鼠的行为学表现；可使

2、MPTP诱导小鼠的MDA含量降低，SOD、GSHPX含量升高。［结论］经六味地黄丸给药可以改善MPTP致帕金森病小鼠的运动功能障碍，提高机体抗氧化能力，减轻机体的氧化应激损伤。【关键词】帕金森病；六味地黄丸；氧化应激Fundproject：SubjectofIntegratedTCMandWMofHubeiProvincialHealthBureau（No：E.W.F［2006］63帕金森病（Parkinson’6sdisease，PD）是一种以黑质多巴胺能神经元特征性缺失为主要病理改变的神经系统变性疾病，临床上以静止性震颤、肌僵直、运动减少和姿势调节障碍为特征。临床研究表明

3、，帕金森病患者处于氧化应激状态，氧化应激反应是PD的发病机制之一［1］，在各种神经变性机制中，氧化应激仍占主导地位，并对多巴胺神经元死亡起重要作用［2］。　　1材料与方法　　1.1材料　　（1）药物：滋阴补肾之中药六味地黄丸。美多巴：上海罗氏制药公司产品，批号：SH0607。（2）动物：C57BL小鼠50只，雄性，体重20～25g，由武汉大学动物实验中心提供，动物合格证号：SCXK（鄂）2003-0004。（3）试剂：1甲基4苯基1，2，3，6四氢吡啶（MPTP），为Sigma公司产品。超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）、丙二醛（MDA）试剂

4、盒为南京建成生物工程公司产品。　　1.2方法　　（1）动物分组6将50只小鼠随机分为5组：正常对照组（A）、模型组（B）、美多巴组（C）、六味地黄丸组（D）、美多巴加六味地黄丸组（E），每组10只。（2）模型制备：以无菌生理盐水溶解MPTP后，按25mg／kg的剂量腹腔注射小鼠，每日1次，连续5d。（3）给药：美多巴组，六味地黄丸组，美多巴加六味地黄丸组根据药理学方法计算小鼠给药量［3］，按照每次灌胃量0.5ml配制。正常对照组，模型组每只鼠给予灌胃等体积生理盐水，1次/d，连续4周。（4）行为学实验5组小鼠分别进行爬竿实验和滚筒实验的行为测验以检测其肢体运动协调情况。各组小鼠

5、于实验前4d进行2次/d爬杆、滚筒行为训练。两个实验在实验的第2周和第4周检测小鼠的行为学改变，最后计算得分情况。（5）小鼠脑组织SOD、GSHPx、MDA含量测定：实验结束后，各组小鼠断头取脑，分离中脑黑质。制备脑组织匀浆液，取适量上清液进行SOD、GSHPX、MDA的检测，具体方法按南京建成生物工程研究所试剂盒说明书步骤进行测试。（6）统计学处理方法：所有实验数据采用SPSS11.5统计软件进行统计学处理，结果用均数±标准差表示，对资料进行t检验。　　2结果　　2.1小鼠造模情况　　小鼠注射MPTP后出现全身震颤、弓背、皮毛及尾巴竖立、后肢张开、运动迟缓、活动减少，并随

6、MPTP给药次数增加上述症状表现趋于明显。　　2.2爬竿实验6　　小鼠运动功能测定结果，以爬竿时间为指标考察小鼠行为学变化。模型组与正常对照组比较有显著性差异（P<0.01）；C、D、E三组（以下简称给药组）给药2周及4周后与模型组比较均有显著性差异（P<0.01）；给药组之间比较无明显差异（P>0.05），给药组给药4周后与正常组比较有差异（P<0.05），见表1。表1各组小鼠爬竿实验结果（略）与模型组比较，﹡P<0.01；与正常组比较，﹟P<0.05　　2.3滚筒实验　　经过治疗的3组小鼠行为都有改善，与模型组比较均有差异（P<0.

7、05），见图1。图1各组小鼠的滚筒实验评分2.4小鼠黑质抗氧化系统指标检测脑组织GSHPx、SOD含量与正常组比较，模型组明显降低显（P<0.01），而MDA含量模型组较正常组明显升高（P<0.01）；与模型组比较，给药组小鼠脑内SOD、GSHPx水平升高，MDA水平下降（P<0.01）。见表2。表25组小鼠脑组织SOD、GSHPx和MDA含量测定结果比较（略）　　脑组织SOD、和MDA含量在给药组组间比较差异无统计学意义，推测与样本数偏少有关。6　　3讨论中医认为P