丙型肝炎患者血清il-6、il-12与hcv含量变化及相关性研究

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1、丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12与HCV含量变化及相关性研究作者:黄伟英,欧超伟,王小梅【关键词】丙型肝炎;,,白细胞介素-6;,,白细胞介素-12;,,转氨酶  摘要:目的:探讨丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平的变化以及在丙型肝炎发病机制中的作用。方法:分别应用ELISA法检测52例丙型肝炎患者(其中轻度18例,中度19例,重度15例)血清的IL-6、IL-12浓度,荧光定量PCR检测HCVRNA含量,同时测定ALT水平,然后分析它们之间的关系,并与15名正常健康人作对照。结果:丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12、ALT和HCVRNA水平均非常显著地高于正常对照组(P

2、<0.01),相关性分析表明,丙型肝炎患者血清中的ALT、HCV病毒含量均与IL-6、IL-12浓度呈正相关。结论:丙型肝炎患者血清IL-6、IL-12水平高低与HCV病毒含量有关,并且与肝脏的损伤程度密切相关。  关键词:丙型肝炎;白细胞介素-6;白细胞介素-12;转氨酶  TheResearchofRelationshipbetweenSerumIL-6,IL-12LevelsandHCVContentinPatientswithHCVInfection8  Abstract:Objective:ToexplorethechangesofserumIL-6,IL-12lev

3、elsinpatientswithhepatitisCandtheroleofIL-6,IL-12inpathogenesyofhepatitisC.Method:LevelsofserumIL-6andIL-12weredetectedbyELISA,contentsofHCVRNAbyfluorescentquantitationPCRin52caseshepatitisCand15normalcontrols.LevelsofALTweremeasuredinthesametime.Result:SerumlevelsofIL-6,IL-12,ALTandHCVviruswer

4、ehigherthanthoseinnormalcontrols(P<0.01).therewerepositivecorrelationbetweenserumlevelsofIL-6,IL-12andcontentsofALTandHCV.Conclusion:TheserumlevelsofIl-6,Il-12inpatientswithhepatitisCwererelatedtoHCVcontent.Theirlevelswerealsorelatedtoimmunefunctioninjurydegreeofliver.  Keywords:HepatitisC;I

5、nterleukin-6;Interleukin-12;Aminopherase  本研究拟通过对52例丙型肝炎患者血清中细胞因子IL-6、IL-12、谷丙转氨酶(ALT)和HCV病毒RNA含量的检测,并对它们进行相关性分析,探讨细胞因子在HC发病过程中的作用。8  1材料和方法  1.1研究对象:丙型肝炎组选择广东医学院附属医院传染科HC患者52例(其中轻度18例,中度19例,重度15例),其诊断标准符合1995年第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准,其中男27例,女25例,平均年龄42.6岁。所有患者HCVIgG阳性,血清HCVRNA阳性,并排除其它病毒性肝

6、炎、自身免疫性疾病及代谢性疾病,未经干扰素及免疫抑制剂治疗。正常对照组为15例(男8例,女7例),平均年龄39.5岁,均为我院保健科体检合格的健康人,均无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患,肝、肾功能正常,乙型肝炎病毒标志物和丙型肝炎标志物检测均为阴性。  1.2试剂和仪器:IL-6、IL-10ELISA试剂盒分别由北京华美公司和武汉伯士德生物工程公司提供;定量PCR试剂盒由深圳晶美生物工程公司提供,用于HCV病毒含量测定;RT-200C型全自动生化分析仪为美国杜雷公司产品;Opticon实时荧光定量PCR仪为MJResearch公司产品。  1.3方法:分别采集各实验对象静脉血5ml,静

7、置1H后2500rpm离心10min,取上层血清,用于测定血清的细胞因子IL-6、IL-12、ALT和HCV病毒RNA含量的检测。8  1.3.1HCVRNA测定:150μL血清中加入150μL裂解液,混匀,加入50μL氯仿,13000rpm离心15min,取上清,加入100μL异丙酚,13000rpm离心10min,加入20μLDEPC水,轻轻混匀。向毛细管分别加入15μLRNA溶液,8.8μL的RT-PCR反应液,0.2μL的PCREnhancer,于

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