化学诱变剂ems筛选越橘茎尖抗旱突变体的初步研究

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1、化学诱变剂EMS筛选越橘茎尖抗旱突变体的初步研究陈凌，张文玲，张敏，李政，李凌西南大学园艺园林学院，重庆400716摘要:本实验以两个品种越橘继代苗茎尖为试材，用甲基磺酸乙酯(EMS)对其茎尖进行处理后，外植体再生率和再生株生根率比对照均有所下降。M1代植株经干旱胁迫后进行初步筛选后，过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶(SOD)作者简介：陈凌（1985-），男，重庆潼南人，硕士研究生，主要从事园林植物遗传育种与生理研究通讯作者：李凌，教授，硕士生导师。、过氧化物酶(POD)活性增强，丙二醛(MDA)含量减少，对干旱环境表现出一定的抗性。这两组材料经浓度为0.3%EMS

2、诱变处理后可能存在抗旱性较强的突变植株。关　键　词:甲基磺酸乙酯；越橘；诱变；抗旱突变体中图分类号：S603.4TheinitialstudyonscreeningdroughtresistancemutantsofblueberryshootswithEMSmutagenesisCHENLing，ZhangWen-ling，ZhangMin，LIZheng,LILing(SchoolofHorticultureandLandscapeArchitecture,SouthwestUniversity,Chongqing400716,China)Abstract:Them

3、eristemofblueberryculturewastreatedbyEMS,boththeshootinductionrateandtherootingratedecreasedmorethanthatofcontrol.DroughttolerantvariantswereselectedfromtheM1generationplants,thentheactivityofSOD,CAT,PODenhancedandthecontentofMDAdecreasedwhichmeansthattheregeneratedplants’abilityofdrough

4、tresistantwasimproved.Thestrongestdroughtresistantmutantplantswereobtainedatthetreatmentof0.3%EMS.Keywords:EMS;blueberry;inducedmutation;drought-toleranceidentification越橘(Vaccinium)属于杜鹃花科(Ericaceae)越橘属[1]，为多年生落叶或常绿灌木或小灌木。越橘果实含有多种维生素、微量元素、黄色斛皮苦素、叶酸、熊果酸、花色苷等对人类健康有益的物质，具有延缓脑神经衰老、解除眼睛疲劳、增强心脏

5、功能和防癌的独特功效。越橘对酸性土壤适应性强，但是我们在十年栽培过程中发现越橘根系浅，抗旱能力弱。为此本实验结合前人的研究成果[2、3、4、5、6、7、8、9]，开展了越橘诱变的研究工作。并对干旱处理后M1代植株部分生理指标进行了测定。以期为越橘的抗旱育种提供基础研究数据。1材料和方法1.1实验材料本实验材料是以“V3”和“3#”越橘试管苗，取自本实验室。化学诱变剂甲基磺酸乙酯（Ethylmethanesulfonate简称EMS）为美国SIGMA公司生产。1.2实验方法配制pH4.8，0.01mo1/L的磷酸缓冲液（pH4.8），高压灭菌后冷却至室温。在无菌条件下EM

6、S经抽滤灭菌（经0.22um的微过滤器注射）后添加到磷酸缓冲液中，配制成浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%（分别以A、B、C、D、E、F表示）的处理液。剪取大小约0.5cm的试管苗茎尖放入到上述浓度的EMS溶液中，震荡处理1h(pH4.8、0.01mo1/L的缓冲溶液处理作为对照，以CK表示)，无菌水冲洗五遍后接种于预选出的培养基中，每个处理接种10瓶，每瓶接种10个茎尖，观察试管苗的生长状况。生根后以透气性较好的松针土为基质移栽于8*8规格的小塑料钵中于09年夏季高温天气下在温室中培养至12-16片叶。在干旱处理前先一次性浇足水，四天后，

7、当土壤含水量约为30%后测定。以每处理30盆为一个群体，每天早晨8点每处理随机取15株成熟叶片2-3片保存于4℃保温盒中测定丙二醛的含量、超氧化物歧化酶、过氧化物酶及过氧化氢酶活性[10]，连续测定3天。2结果与分析2.1EMS处理对越橘茎尖生长情况的影响在诱变剂处理材料的过程中，随EMS浓度的增加，越橘茎尖越来越软。材料转入培养基以后，茎尖进入萌发阶段。由于浓度差异，各处理萌发状态不一，低浓度的萌发较快也较为整齐；浓度高萌发时间推迟且萌发水平参差不齐。20天后在存活的植株群体中观察发现不同的变异类型，其中包括红色茎杆、叶形、茎粗、茎长等