dna指纹的遗传分析

《dna指纹的遗传分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、【 实验结果】1电泳结果图：图1：电泳结果图说明：a.条带1-6是marker的条带。b.条带7-9是基因D1S80的条带。2marker的标准曲线的制作：marker1标准带的相关曲线条带123456789101112基因长度/bp1031900800700600500400300250200150100Lg/bp3.01332.95422.90312.84512.77822.69902.60212.47712.39792.30102.17612迁移距离/cm1.922.022.142.252.352.512.682.852.983.103.223.38图4：mark

2、er1的标准曲线根据图4算出marker2的相关数据：marker2的相关数据条带1’2’3’4’5’6’迁移距离/cm1.411.641.982.262.673.07Lg/bp3.391453.239753.015512.830832.560422.2966基因长度/bp2462.9181736.8001026677363197所以可以估算出条带1’~6’的标准分子量大概为2400、1700、1000、700、400、200。将这一组数据应用到实验结果中marker标准曲线的绘制上，显然会给实验结果带来很大的影响。但又不可避免。marker标准条带的相关数据条带123

3、456基因长度/bp240017001000700400200lg/bp3.38023.23043.00002.84512.60212.3010迁移距离/cm1.221.411.691.952.282.64图2marker的标准曲线3成员A、C、D的D1S80的计算：根据marker的标准曲线知表2：图1中编号ACD的相关数据条带A(7)C(8)D(9)迁移距离/cm2.222.272.32lg/bp2.628182.590862.55354基因长度4253903584结果记录表：表3：结果记录表D1S80DNA指纹特征小组成员大小/bp长度（重复数）杂合/纯合A425

4、18纯合B---------------C39015纯合D35813纯合E---------------F---------------【实验分析及讨论】A从图1可知小组成员里只有A、C、D有正常的条带，而且全是纯合体，而B、E、F并没有出现正确的条带，分析可能原因：a在取样时取得太少了，致使提取的DNA浓度过低，在该实验的PCR条件下30个循环不能得到正确的DNA分子拷贝。b取样不合适，可能在去口腔上皮时并没有在适合的位置取，导致取出来的并不是口腔上皮。c在操作过程中一些错误的步骤导致没有提出正确的DNA分子。B图1中最下面的有一排亮亮的条带。据分析是PCR体系里引物

5、的条带。但是我们可以发现与B、E、F相比，A、C、D对应的条带最亮最宽，说明引物的含量较多，但是偏偏A、C、D有正确的条带。这似乎说不通，但是进一步的分析可以推测有以下两种原因：a在向Pcr小管里加入体系时，由于移液枪不准造成的加入体系不同，但这种概率较小。b在向胶孔加入样品时由于加入量不同造成的结果。这个显然比第一种出现的概率要大得多。C原理中我们指出人类1号染色体上的VNTRD1S80，核心序列由16个核苷酸组成，拷贝数在14～41个之间，已知29种不同的等位基因。但是我们的实验结果里D的拷贝数为13，却小于14，由于两者比较接近所以将D的拷贝数应该认为是14，而出

6、现这种偏差的原因可能在于：amarker标准的分子量我们是用的周五晚上组的图估算出来的(如图3)，并不是说明书上标准的，所以marker的标准曲线与实际的可能有一定的差距，这样就会导致最后的结果也会有一定的差距。b在photoshopCS3软件测量距离时，并没有专业的分析距离的功能，而是利用相关功能读出来的，所以这可能会给结果带来很大的偏差。D如果一个个体的两个D1S80等位基因之间相差一个重复，不可以用琼脂糖凝胶电泳检测。原因是在实验中我们用到的缓冲液是1*TAE，1.5%的琼脂糖。根据相关资料显示这种胶的的分辨率在80bp~4kb，而一个重复是16bp，所以我们不可

7、以用琼脂糖凝胶电泳检测。F用PCR、RFLP、RAPD方法产生DNA指纹图谱各有利弊：PCR方法简单，但不准确，还需要设计引物.RFLP利用酶的特异性给为准确快速，缺点有RFLP分析对样品纯度要求较高，样品用量大，且RFLP多态信息含量低，多态性水平过分依赖于限制性内切酶的种类和数量，加之RFLP分析技术步骤繁琐、工作量大、成本较高，所以其应用受到了一定的限制。RAPD利用随机的引物原理简单，快速，弊端有RADP图谱中某些弱带重复性较差，而且目前该法在引物长度和序列及应用的引物数目、扩增反应条件等实验技术方面未标准化，影响了不同条件下结果