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1、大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子无菌萌发及成苗途径第29卷第6期2009年12月西南林学院JOURNALOFS0UTHWESTFORESTRYUNIVERSITYVo1.29No.6DeC.2009大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子无菌萌发及成苗途径庞惠仙,杨红明,马骏,刘英杰(1.昆明市林业科学研究所,云南昆明650223;2.云南林业职业技术学院,云南昆明650224)摘要:采用无菌播种技术,对粉绿红唇大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子进行萌发试验,并设计配制多种培养基进行原球茎继代增殖,丛芽分化,生根试验.通过对种子萌发,原球茎发育及成苗过程的观察,得出杂交子代的繁殖技术及成苗途径.关键词:大花蕙兰;
2、虎头兰;杂交;种子;无菌萌发;成苗途径中图分类号:$682.31文献标识码:A文章编号:1003—7179(2009)06—0082—03我国的兰花育种工作起步较晚,育种与生产水平较低,与国外相比有很大差距.目前国内市场上的主要兰花品种大多从国外引进,如蝴蝶兰,大花蕙兰及其他洋兰.许多品种引进后在国内扩繁,栽培,然后投放市场,具有自主知识产权的品种不多¨J.我国兰花的育种资源很多,如大花蕙兰育种的原始亲本材料大部分产自我国西南地区¨.云南有许多独特的兰花资源』,利用云南自有资源,培育独具特色的兰花新品种,对开发云南的花卉资源,加快云南的花卉育种工作,有积极促进作用.关于兰花的杂交育种及其种子
3、萌发,成苗技术研究,国内已有相关报道.一般而言,地生兰类种子的萌发较困难,以根状茎为中间繁殖体成苗;而附生兰和腐生兰的种子萌发较容易,以原球茎为中间繁殖体成苗.大花蕙兰是兰属的多代杂交种,虎头兰是大花蕙兰原始杂交亲本材料之一,二者均为附生兰.经云南省科学技术情报研究院检索查询:粉绿红唇大花蕙兰(Cymbidiumsp.'PleiadesMemory')¨一与虎头兰(CymbidiumhookerianumRchb.f.)¨-2,12]变异种一多舌多瓣蝶花大虎头兰的杂交新品种选育,国内未见报道.通过这一研究有可能选育出具有商业价值和科研价值的大花虎头兰新品种,同时可探讨这一杂交子代性状的变异规
4、律,为今后的兰花杂交育种工作奠定基础.1材料与方法1.1材料来源2006年1月10日,以市售粉绿红唇大花蕙兰为母本,以家栽虎头兰变异种一多舌多瓣蝶花大虎头兰(奇花大虎头兰)为父本人工授粉杂交,成功获得蒴果1个,当年9月7日采果,果实生长240d.1.2培养基设计及培养条件采用1/2MS培养基为基本培养基,种子萌发培养基为:a.1/2MS;b.1/2MS+6一BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L:e.1/2MS+6一BA2.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA1.0mg/L.原球茎增殖及器官分化培养基为:d.1/2MS+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L:e.1/2MS+6一B
5、A0.5m#L+NAA4.0mg/L;f.1/2MS+6一BA2.5mg/L+KT0.5m异/L+NAA0.5mg/L;生根培养基为:g.1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L;h.1/2MS+6.BA0.1mg/L+NAA1.0mg/L.所有培养基均附加2%的蔗糖,0.75%琼脂粉;种子萌发培养基和生根培养基添加1.0g/L活性炭;pH5.6,培养温度(23±2)c【=,光照12h/d,光照度1500～2000lx,其中种子萌发在培养室内散射光下进行.1.3蒴果及种子处理方法剪掉果柄和残留花梗,称取果实质量.接种前将蒴果表面用75%乙醇棉球擦拭干净,于超净工作台上放入75
6、%乙醇液中浸泡5rain,无菌水洗2遍,擦干,剖开朔果,将种子取出全部均匀接种到种子萌发培养基上,每瓶接种量尽量一致.接种完毕,称取果壳质量.每种培养基接种3瓶,共9瓶,置于培养室的培养架上,不开灯,定期观察,及时将萌发形成的小原球茎转接到相应培养基上,记录小球茎数量.收稿日期:2009—09—08作者简介:庞惠仙(196O～),女,云南昆明人,高级工程师,主要从事植物组织培养的研究.作者E—mail:PangHX593@sohu.corn第6期庞惠仙等:大花蕙兰与奇花虎头兰杂交种子无菌萌发及成苗途径832结果与分析2.1杂交果实发育情况该杂交果实较大,果长7em,径粗3cnl,果皮绿色,纺
7、锤形,一面扁平,一面拱圆.剖开果壳,种子呈乳黄色颗粒,团块状,种子量不多,只占据蒴果1/3空间.根据果实全质量与果壳质量之差,得出鲜种子质量为2.97g,即杂交种子质量为果实质量的11.8%.从蒴果形状和种子与果实质量的百分比,说明该杂交蒴果发育欠佳;种子呈团块状,尚未完全散开且果壳呈绿色,表示该杂交蒴果尚未充分成熟.2.2种子萌发,原球茎的发育与生长该杂交种子较易萌发,在3种培养基上均能顺利萌发,接种58d
