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时间:2017-11-11
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1、Helenna电泳仪操作程序1.准备1.2试剂的准备:脱染色液:取500ml冰醋酸于脱染色液桶中再加入9500ml蒸馏水混匀。有效期6个月。1.2染色液:取浓缩酸兰染剂一瓶于染色桶中再加入5%的冰醋酸1000ML混匀。在室温下有效期为6个月。2.操作步骤2.1样品准备:2.1.1.SPIFE样品盘准备:将样品插条放入样品盘中的正确位置。2.1.2加样:将准备好的供试品排好顺序;在样品盘中按顺序每孔加入17ul准备好的供试品品。每次试验需做一份血清蛋白电泳正常质控。2.2开机打开“SPIFE3000”电源开关。仪器自检,
2、自动清洗并排空残留的液体。电泳显示屏上显示:“SERUMPROTEIN21℃.COOL”。打开电泳仓盖,电泳显示屏上显示:INFILING。自动点样器自动移动到最左端。电泳显示屏上显示:“TOMOVEAPLLICATORLEFTPRESS(START)TOMOVEAPLLICATORRIGHTPRESS(CONTINUE)”2.3电泳按照电泳显示屏上提示,按CONTINUE键,自动点样器将移动到电泳仓最右端。将加好样品的样品盘放置于样品槽中。按START键,自动点样器移动回样品槽中。2.3.1刀锋放置使用100人份/盒
3、的试剂:刀锋放置在自动点样器上所标识的2,A,9,13,16号位置上。使用60、30、18人份/盒的试剂:刀锋放置在自动点样器上所标识的2,8,14号位置上。将刀锋加重块放在刀锋上面,每个刀锋上面放一个。2.3.2放置凝胶片取1.0ML界面液置到电泳槽中,注意避免产生气泡。将凝胶片从保护包装中取出,揭掉凝胶片上的保护膜,放到电泳槽中,放置时,凝胶片下面不能有气泡。小心的用BlotterC吸水纸吸干多余的缓冲液,用吸水纸将凝胶片和电极周围多余的界面液擦除。2.3.3将两个碳电极棒分别放于凝胶片外侧的盐桥上,使碳棒的两极紧
4、靠有磁性的电极。关上电泳仓盖按下Start/stop键启动程序,电泳显示屏上显示:LOADSAMPLE1(START)RUN(CONTINUE)NEXTOPERATION2.3.4一般情况下,按“START”键电泳仪将开始自动蘸样、点样、电泳和烘干凝胶片。但如果要从其他步骤开始操作,就要按TESESELECT/CONTINUE键直到你需要的操作程序出现,再按START/STOP键。蘸样和点样时,可打开电泳仓盖观察刀锋蘸样和点样的位置,如不正确,按“start/stop”停止操作,仔细检查刀锋放置位置是否正确,样品盘上的
5、加样槽是否插紧,检查完毕,再按START/STOP键,仪器开始运行。2.3.5烘干程序结束后,仪器将自动报警,电泳显示屏上显示:FINISHEDPRESS(CONTINUE)TOCONTINUE,按“CONTINUE”键结束程序。打开电泳仓盖,根据电泳显示屏上提示:“TOMOVEAPLLICATORLEFTPRESS(START)TOMOVEAPLLICATORRIGHTPRESS(CONTINUE)”2.3.6按TEST/CONTINUE键自动点样器将移动到最右端,可以取出样品盘洗净,以备下次实验使用。2.3.7染色
6、、脱色将烘干的凝胶片从电泳槽中取出,用盐桥去除器铲除凝胶片上的盐桥。再将凝胶片上的圆孔挂在支架的左边,将凝胶片的椭圆孔挂在支架的右边。放入染色槽中。按下Start/stop键启动程序,染色显示屏上显示:SERUMPROTEINDRAWINGPUMP10秒后,显示:STAIN1(START)RUN(CONTINUE)NEXTOPERATTION一般情况下,按“START”电泳仪将开始自动染色、脱色和烘干凝胶。但如果要从其他步骤开始操作,就要按TESTSELECT/CONTINUE键直到你需要的操作程序出现,再按START
7、/STOP键。烘干程序结束后,仪器自动报警,染色显示屏上显示:FINISHEDPLATEOUT,GELHOLDERIN,PRESS(CONTINUE)按“CONTINUE”键结束程序.将染色支架从染色槽中取出,把凝胶片从染色支架上取下来,再把染色支架放回仪器。2.3.8扫描打印结果3.临床意义3.1正常血清蛋白电泳分析正常血清经电泳后可分为Alb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白五个区带,β包括β1和β2,β2主要是C3成分。3.2急性感染患者血清蛋白电泳分析急性感染患者血清蛋白电泳主要特征是Alb明
8、显降低,α2-球蛋白增加,TP、α1、β、γ-球蛋白基本正常。3.3肝硬化患者血清蛋白电泳分析肝硬化患者血清蛋白电泳主要特征是TP、Alb降低,γ-球蛋白明显增加,使得β和γ球蛋白连接在一起不易分开,可出现β—γ桥,即肝硬化血清蛋白电泳图谱的特征。3.4多发性骨髓瘤(单克隆免疫球蛋白血症)患者血清蛋白分析患者血清和尿液中可出现结构
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