四川地区大豆根际土壤豆科植物根瘤菌捕获及多样性的分析

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1、四川地区结瘤大豆根际土壤中紫云英、苜蓿和三叶草根瘤菌的多样性分析收稿日期Received:接受日期Accepted:*教育部博士点基金项目（NO.20135103120003）、国家自然科学基金项目（31300461）、四川农业大学“人才引进项目”和四川农业大学大学生创新性实验计划项目和科研兴趣计划项目SupportedbyDoctoralFundofMinistryofEducationofChina(NO.20135103120003),NationalNaturalScienceFoundationofChina(NO.31300461),ResearchFounda

2、tionfortheIntroductionofTalentofSichuanAgriculturalUniversityandInnovativeexperimentandResearchInterestProjectofUndergraduateinSichuanAgriculturalUniversity.**通讯作者Correspondingauthor(E-mail:yuxiumeicool@163.com)李艳梅钟宇舟谭渊何中山徐雯芳陈强余秀梅**四川农业大学资源环境学院微生物系成都610041摘要[目的]分析四川地区结瘤大豆根际土壤是否存在与紫云英、苜蓿和三叶

3、草共生结瘤的根瘤菌及其多样性,从而为豆科植物的在四川地区种植与轮作提供依据。[方法]本研究从四川盆地采集了不同种植模式下结瘤大豆根际土壤样品31份；利用紫云英、苜蓿和三叶草进行盆栽捕获试验以获得共生根瘤，从根瘤中分离纯化出根瘤菌，对其做表型和分子鉴定；将根瘤菌回接到紫云英、苜蓿、三叶草和大豆中，以检测根瘤菌的寄主范围。[结果]苜蓿和三叶草分别在6个土壤样品中共生结瘤，而紫云英只在2个土样中共生结瘤，并从共生根瘤中分离出14株根瘤菌；16SrDNA基因序列的相似性分析表明这14株根瘤菌均属于根瘤菌属（Rhizobium），且16SrDNA基因的系统发育树分析揭示它们分属于根瘤

4、菌属的不同种；回接实验结果表明这些根瘤菌都只能让捕获豆科植物结瘤，而不能让其他三种豆科植物结瘤。[结论]四川地区结瘤大豆根际土壤中能与紫云英（Rhizobiumastragali）、苜蓿（Rhizobiummeliloti）和三叶草（Rhizobiumleguminosarumvar.trifolii）共生根瘤菌资源较少，且其与大豆根瘤菌（Bradyrhizobiumjaponicum）分属于不同的属；根瘤菌的回接实验进一步证明了根瘤菌的寄主专一性，且这些根瘤菌并不是大豆根瘤菌。关键词根瘤菌；大豆根际土壤；紫云英；苜蓿；三叶草14Analysisforthediversit

5、yofrhizobianodulatingAstragalussinicus,MedicagosativaandTrifoliumrepensinnodulatedsoybeanrhizospheresoilinSichuanLIYanmei,ZHONGYuzhou,TANYuan,HEZhongshan,XUWenfang,CHENQiang&YUXiumei**DepartmentofMicrobiology,CollegeofResourceandEnvironmentalSciences,SichuanAgriculturalUniversity,Chengdu61

6、1130,ChinaAbstract:Objective:TheresearchaimedtoanalyzewhetherrhizobianodulatingwithAstragalussinicus,MedicagosativaandTrifoliumrepensappeararoundnodulatedsoybeanrhizosphereinSichuanandthediversityoftherhizobia.whichshouldapplysomeusefulbasisinformationforplantingleguminousplantsinSichuan.M

7、ethods:Thirty-onerhizospheresoilsamplesofnodulatedsoybeanwithdifferentplantingstylewerecollectedfromSichuanbasin.ThreeleguminousplantsofAstragalussinicus,MedicagosativaandTrifoliumrepenswereplantedinthe31soilsamplestocapturerhizobia.Rhizobiastrainswereisolated