rp-hplc直接测定水果中维生素c含量

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1、RP-HPLC直接测定水果中维生素C含量刘贵花1潘富友*（台州学院医药化工学院浙江临海317000）摘要：应用反相高效液相色谱法对时令水果中维生素C含量进行直接测定。方法：色谱柱EclipseXDB-C18(5mm4.6×250mm)；流动相乙腈-水(40∶60v/v)；流速1.0ml/min；检测波长275nm。实验结果表明维生素C在10~640μg/ml范围内呈良好线性，R2=0.99996，回收率为99.3%~104.5%，RSD=1.65%。本法操作简便，结果准确、重现性好，为测定水果中维生素C的含量提供了一种有效方法。

2、关键词：水果；维生素C(Vc)；反相高效液相色谱(RP-HPLC)中图分类号：文献标识码：A文章编号：DeterminationonVitaminCinFruitsbyRP-HPLCLiuGuihua,PanFuyou(TaizhouUniversitySchoolofPharmaceuticalandChemicalEngineeringZhejiangLinhai317000)Abstract:ThevitaminCinfruitsoftheseasonwastesteddirectlybyreversed-phasehig

3、hperformance1iquidchromatography.ThemethodswasthattheEclipseXDB-C18Column(5mm4.6×250mm)wasusedandthemobilephasewasamixtureofacetonitrileandwater(40∶60v/v)andTheflowratewas1.0ml/minandthedetectionwavelengthwas275nm.Theexperimentresultsshowedthatthebetterlinearrelation

4、wasachievedwhentheconcentrationofvitaminCwas10~640μg/ml,therelatedcoefficientwas0.99996andtherangofrecoverywasfrom99.3%to104.5%andtherelativestandarddeviationwas1.65%.Themothodiseasytooperatewithpreciseresultandgoodreproducibility,whichestablishesareliablemethodforde

5、terminationofvitaminCinfruits.Keywords:Fruits;VitaminC(Vc);Reversed-phasehighperformance1iquidchromatography(RP-HPLC)50引言收稿日期：基金项目：浙江省自然科学基金（M2003115）1刘贵花，女，在读硕研，（1983-），主要从事色谱研究*通讯联系人，教授，硕导，panfy@tzc.edu.cn维生素C，又称抗坏血酸(AH2))。医学研究发现它不但具有生理活性，而且在人体内能阻止亚硝胺的形成，具有一定的防癌作用[

6、1]。但人体自身不能合成维生素C，必须由食物中摄取，所以分析测定水果和蔬菜中维生素C含量，将对鉴别水果和蔬菜的营养价值具有重要意义。目前水果和蔬菜中维生素C测定的方法除了药典规定的碘量法[2]，还有比色法[3]、紫外分光光度法[4]、荧光法[5]等，但这些方法所需试剂多且操作繁琐，测定结果准确性也存在一定问题[6]。近年来发展了用高效液相色谱法测定维生素C含量的方法，具有高效、快速、稳定、可靠等特点，但文献报道的所用流动相体系均较复杂，一般都采用了缓冲盐或者低浓度酸[7-10]。本文应用反相高效液相色谱法，采用乙腈-水(40∶6

7、0v/v)作流动相，直接测定了时令常见水果中的维生素C含量，取得了理想的效果。1实验部分1.1主要仪器与试剂Agilent1200液相色谱仪，配有VWD检测器；UV-2450紫外分光光度计；Milli-Q纯水超纯水系统；HS-120D超声波清洗机；AP-01过滤器；FA2004A电子天平。甲醇、乙腈（色谱纯），TEDIA公司；抗坏血酸(分析纯)，无锡展望化工试剂有限公司；磷酸（分析纯），无锡飞达化工厂；超纯水（由Milli-Q纯水超纯水系统制备）。1.2色谱分离条件色谱柱：EclipseXDB-C18(5mm4.6×250mm)

8、，流动相：乙腈-水(40∶60v/v)，流速：1.0ml/min，5波长：275nm；进样量：10ml。1.3溶液配制1.3.1标准贮备液的配制精密称取抗坏血酸0.25g，置250ml容量瓶中，加0.1%磷酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。得1000μg/ml的标准